【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物领域，特别涉及一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、植物、真菌、某些原生生物和大多数细菌从gtp和分支酸开始从头制备叶酸(维生素b9)，但高等动物缺乏合成途径的关键酶，并且因此需要饮食叶酸。叶酸对于健康是至关重要的，并且抗叶酸药物广泛用于癌症化疗和抗微生物剂中。在细胞代谢过程中，叶酸提供了嘌呤、胸苷酸和甲硫氨酸合成所需要的单碳单位。哺乳动物细胞不能从头合成叶酸，需要从环境中摄取的叶酸跨膜转运到胞内。质子偶联叶酸转运蛋白(the proton-coupledfolate transporter,pcft)，也称溶质转运蛋白slc46a1(solute carrier family46member 1,slc4a1)，利用细胞内外的质子梯度差，同向转运质子与叶酸分子至胞内。
2、pcft高表达于正常人体的肠道刷状缘膜和脉络丛，也在实体瘤中高表达。不同于已知的还原型叶酸转运蛋白(reduced folate carrier,rfc)和叶酸受体蛋白(folatereceptors,frs)在中性ph下最高的叶酸转运活性，pcft在微酸的ph 5.5下转运活性最高。因此，pcft被认为是肿瘤细胞利用其周边微酸的ph环境摄取叶酸的主要转运蛋白之一。
3、根据叶酸分子的结构，临床上开发了一系列叶酸结构类似的分子，干扰叶酸代谢实现其药理作用，它们被称为抗叶酸药物。传统抗叶酸药物都是通过rfc进行转运，而导致毒副作用。pcft在肿瘤中高表达，并且能够利用肿瘤微酸外环境所提供的质子梯
技术实现思路
1、本申请为了克服现有技术中的缺陷，提供一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体及其应用。
2、本申请的第一方面，提供了一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，包括重链可变区与轻链可变区，所述重链可变区包括氨基酸序列如seq id no.1所示的hcdr1，氨基酸序列如seq id no.2～3其中之一所示的hcdr2，氨基酸序列如seq id no.4～5其中之一所示的hcdr3；所述轻链可变区包括氨基酸序列如seq id no.6～7其中之一所示的lcdr1，氨基酸序列如seq id no.8所示的lcdr2，氨基酸序列如seq id no.9～10其中之一所示的lcdr3。
3、本申请的第二方面，提供一种分离的多核苷酸，编码上述抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体。
4、本申请的第三方面，提供一种表达载体，含有上述分离的多核苷酸。
5、本申请的第四方面，提供一种抗体的表达系统，所述表达系统含上述的表达载体或基因组中整合有外源的如上述的多核苷酸。
6、本申请的第五方面，提供上述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体的制备方法，包括如下步骤：在适合表达所述抗体的条件下，培养上述的抗体的表达系统，从而表达出所述的抗体，纯化分离出所述的抗体。
7、本申请的第六方面，提供一种产品，为检测试剂盒或药物组合物，所述检测试剂盒包括本申请的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，所述药物组合物包括本申请的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体及药学上可接受的载体。
8、本申请的第七方面，提供前述抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体、多核苷酸、表达载体，表达系统或产品在制备用于诊断、治疗或预防肿瘤的药物中的用途；优选的，所述肿瘤选自结肠癌、直肠癌、肝癌、胃癌、食管癌中的一种或多种的组合。
9、本申请公开的一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体及其应用，带来的有益效果包括但不限于：(1)提供一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段及其制备方法。(2)本申请制备的抗体可以直接抑制pcft的叶酸转运活性，从而能够抑制癌细胞对于叶酸的摄取。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，包括重链可变区与轻链可变区，所述重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的HCDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO.2～3其中之一所示的HCDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO.4～5其中之一所示的HCDR3；
2.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，所述重链可变区包括氨基酸序列如下任一所示的HCDR1～HCDR3：
3.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体还包括如下技术特征中的至少一项：
4.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，其特征在于，
5.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体包括：
6.一种分离的多核苷酸，编码如权利要求1～5任一权利要求所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体。
7.一种表达载体，含有如权利要求6所述的分离的多核苷酸。
8.一种抗体的表达系统，所述表达系统含有如权利要求7所述的表达
9.一种产品，为检测试剂盒或药物组合物，所述检测试剂盒包括如权利要求1～5任一权利要求所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，所述药物组合物包括如权利要求1～5任一权利要求所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体及药学上可接受的载体。
10.如权利要求1～5任一权利要求所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体、如权利要求6所述的多核苷酸、权利要求7所述的表达载体，权利要求8所述的表达系统或如权利要求9所述的产品在制备用于诊断、治疗或预防肿瘤的药物中的用途；优选的，所述肿瘤选自结肠癌、直肠癌、肝癌、胃癌、食管癌中的一种或多种的组合。
...【技术特征摘要】
1.一种抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，包括重链可变区与轻链可变区，所述重链可变区包括氨基酸序列如seq id no.1所示的hcdr1，氨基酸序列如seq id no.2～3其中之一所示的hcdr2，氨基酸序列如seq id no.4～5其中之一所示的hcdr3；
2.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，所述重链可变区包括氨基酸序列如下任一所示的hcdr1～hcdr3：
3.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体还包括如下技术特征中的至少一项：
4.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，其特征在于，
5.如权利要求1所述的抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述抗质子偶联叶酸转运蛋白单克隆抗体包括：
6.一种分离的多核苷酸，编码如权利要求1～5任一权利...
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