【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及视网膜色素上皮细胞的条状聚集体、用于制造其的装置和制造方法、以及含有该条状聚集体的治疗药物。
技术介绍
1、使用es/ipsc来源的视网膜色素上皮细胞(rpe)用于针对眼部疾病的基于细胞的再生疗法，在过去10年里是眼科临床领域的一个大的关注点(非专利文献1)。根据这些临床研究，伴随着一些可能的有效性，这种治疗方法的安全性变得明确。迄今为止，在这些临床研究中，有使用细胞悬浮液的方法和使用rpe片的方法这两种方法，这两种方法都有优缺点。使用细胞悬浮液的移植可以从管中立即使用，或者可以利用通过短时间培养的细胞储备，可以通过小的外科侵袭进行移植，但是难以控制细胞在移植部位的配置，移植的细胞常常在玻璃体中形成视网膜前膜(erm)(非专利文献1、2)。相比之下，rpe片可以通过目视确认移植片按照计划以正确的方式被配置，但是片的准备需要时间、成本和伴随大的巩膜和神经视网膜切开的侵袭性外科处理(非专利文献3)。因此，仍然没有解决提供能够以短时间、低成本准备并且移植的方法是非侵袭性的，同时在其移植部位可容易地控制的视网膜色素上皮细胞的移植材料的问题。
2、现有技术文献
3、非专利文献1：sugita,s et al.,(2020)j.clin.med.9,2217.
4、非专利文献2：schwartz,s.d.et al.,(2015)lancet 385,509-516.
5、非专利文献3：lyndon da cruz et al.,nature biotechnology adva
技术实现思路
1、专利技术要解决的问题
2、本专利技术要解决的问题是提供能够以短时间、低成本准备并且移植的方法是非侵袭性的、同时在其移植部位可容易地控制的视网膜色素上皮细胞的移植材料，以及该移植材料的制造方法。
3、解决技术问题的手段
4、本专利技术的专利技术人假设，即使是能够容易地注入到视网膜下的条状聚集体的rpe细胞，也能够像小片移植一样扩展到覆盖一定面积。近年来，作为微小组织形态学的机理，报告了表面覆盖性、组织收缩性和粘附力的关系(yamashita,t.et al.,(2016).actabiomater.45,85-97.)。专利技术人确认，粘附力和收缩力取得平衡的细胞在曲率小的凹面上自发地生成了球状组织，以该见解为基础，研究了凹面下端的曲率，发现曲率小的槽面使细胞生成带状组织。尽管小组织的制作基本上需要诸如光刻等的特殊技术，但是引入聚二甲基硅氧烷(pdms)软光刻和简单的三维(3d)印刷相结合的制造技术，可使这种组织工程学方法广泛使用。在本专利技术中，制作了具有细槽的基于pdms的培养装置，并研究了hipsc-rpe细胞是否能够形成条状聚集体。而且，确认了hipsc-rpe细胞是否能够从涂敷在培养皿上的条状聚集体扩展，扩展的hipsc-rpe细胞是否能够呈现与条状聚集体形成前相同的rpe特性。另外，还验证了形成了条状聚集体的hipsc-rpe是否能够实质上注入动物的眼睛。
5、即，本专利技术涉及以下内容。
6、[1]一种视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
7、[2]根据上述[1]所述的条状聚集体，其特征在于，全长/主干外径的比率为2～1000。
8、[3]根据上述[2]所述的条状聚集体，其特征在于，横截面形状为圆形或椭圆形。
9、[4]根据上述[1]～[3]中任一项所述的条状聚集体，视网膜色素上皮细胞是由多能干细胞分化诱导的细胞。
10、[5]一种用于制造上述[1]～[4]中任一项所述的条状聚集体的装置，上述装置具有基体部件，
11、该基体部件具有设置有1个以上槽的上表面，
12、该槽包括具有条状聚集体的长度和宽度的空腔部分，作为用于将被接种的视网膜色素上皮细胞培养成条状聚集体的模具。
13、[6]根据上述[5]所述的装置，上述槽具有空腔部分作为该槽的底部，并且具有位于该空腔部分之上的上部，该上部具有上述槽的开口。
14、[7]根据上述[5]或[6]所述的装置，上述槽的横截面形状为v字形，该v字形的最深部带有圆弧。
15、[8]一种视网膜色素上皮细胞的条状聚集体的制造方法，包括以下步骤：
16、(1)将悬浮于液体培养基中的视网膜色素上皮细胞接种在上述[5]～[7]中任一项所述的装置的槽内的步骤；
17、(2)在上述槽内培养视网膜色素上皮细胞，形成视网膜色素上皮细胞的条状聚集体的步骤。
18、[9]根据上述[8]所述的方法，培养基包含rock抑制剂。
19、[10]根据上述[9]所述的方法，rock抑制剂为y-27632。
20、[11]根据上述[8]～[10]中任一项中所述的方法，在槽内培养的视网膜色素上皮细胞的密度为2.5x103细胞/ml～5x105细胞/ml。
21、[12]根据上述[8]～[11]中任一项中所述的方法，视网膜色素上皮细胞的培养时间为1天～7天。
22、[13]一种药物组合物，其含有上述[1]～[4]中任一项所述的视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
23、[14]一种起因于视网膜色素上皮障碍的疾病的治疗药物，其含有上述[1]～[4]中任一项所述的视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
24、专利技术效果
25、根据本专利技术，可制造能够以短时间、低成本准备且移植的方法是非侵袭性的，同时在其移植部位可容易地控制的视网膜色素上皮细胞的移植材料。
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1.一种视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
2.根据权利要求1所述的条状聚集体，其特征在于，全长/主干外径的比率为2～1000。
3.根据权利要求2所述的的条状聚集体，其特征在于，横截面形状为圆形或椭圆形。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的条状聚集体，其中，视网膜色素上皮细胞是由多能干细胞分化诱导的细胞。
5.一种用于制造权利要求1～3中任一项所述的条状聚集体的装置，所述装置具有基体部件，
6.根据权利要求5所述的装置，其中，所述槽具有空腔部分作为所述槽的底部，并且具有位于所述空腔部分之上的上部，所述上部具有所述槽的开口。
7.根据权利要求5所述的装置，其中，所述槽的横截面形状为V字形，所述V字形的最深部带有圆弧。
8.一种视网膜色素上皮细胞的条状聚集体的制造方法，包括以下步骤：
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述培养基包含ROCK抑制剂。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，ROCK抑制剂为Y-27632。
11.根据权利要求8～10中任一项所述的方
12.根据权利要求8～10中任一项所述的方法，其中，视网膜色素上皮细胞的培养时间为1天～7天。
13.一种药物组合物，其含有权利要求1～3中任一项所述的视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
14.一种起因于视网膜色素上皮障碍的疾病的治疗药物，其含有权利要求1～3中任一项所述的视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种视网膜色素上皮细胞的条状聚集体。
2.根据权利要求1所述的条状聚集体，其特征在于，全长/主干外径的比率为2～1000。
3.根据权利要求2所述的的条状聚集体，其特征在于，横截面形状为圆形或椭圆形。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的条状聚集体，其中，视网膜色素上皮细胞是由多能干细胞分化诱导的细胞。
5.一种用于制造权利要求1～3中任一项所述的条状聚集体的装置，所述装置具有基体部件，
6.根据权利要求5所述的装置，其中，所述槽具有空腔部分作为所述槽的底部，并且具有位于所述空腔部分之上的上部，所述上部具有所述槽的开口。
7.根据权利要求5所述的装置，其中，所述槽的横截面形状为v字形，所述v字形的最深部带有圆弧。
8.一...
【专利技术属性】
技术研发人员：高桥政代，田中佑治，田中阳，田中信行，天谷谕，西田光宏，万代道子，
申请(专利权)人：国立研究开发法人理化学研究所，
类型：发明
国别省市：
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