【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物育种，具体涉及一种mir-34b在调控布莱凯特黑牛脂质代谢中的应用。
技术介绍
1、布莱凯特黑牛是国内第一个通过体细胞核移植培育成功的肉牛新种质，通过杂交育种和分子标记辅助育种的技术，克服了鲁西黄牛和渤海黑牛的缺点，采用黑毛和牛的种公牛精液，对鲁西黄牛进行了改良，使后代表现出优良特性的组合。该牛体躯高大，肌肉发达，筋腱明显，皮薄骨细，体质结实，结构匀称。该肉质鲜嫩，口感好，呈典型的大理石花纹，又称“雪花肉”，细嫩多汁，其牛肉含有丰富的蛋白质，氨基酸组成比猪肉更接近人体需要，能提高机体抗病能力，具有营养心肌、增强抵抗力的功能，同时含铁量丰富，肌间脂肪中饱和脂肪酸含量很低，不饱和脂肪酸含量高，风味独特。在2015年，该品种被专家认定为新种群，继承了黑毛和牛的专门化肉牛品种特征，是生产大理石纹牛肉的优秀牛种。
2、犊牛初生重是牛育种目标性状中不可或缺的一部分，是影响肉牛生产性能的重要因素，这也是被许多研究人员研究得出的结论。犊牛初生重是犊牛出生后测量的第一个也是最重要的生长性状。脂肪组织作为畜禽初生重的重要组成部分，也是影响其产肉性能的重要因素。在产肉动物育种过程中，研究揭示影响imf含量的遗传机制可以对提高畜禽生长发育以及改善产肉性能有一定的指导意义，进一步将使牛肉行业提高选择性育种标准和肉类价值。
3、在动物中，新陈代谢的系统控制由代谢组织进行，并依赖于过多分子（如激素和脂蛋白复合物）的调节循环。微小rna（mirna）是转录后基因抑制因子家族，存在于整个动物界，与各种环境下的基因表达
4、鞘氨醇1磷酸酯裂解酶1 ( sphingosine 1 phosphate lyase 1，sgpl1) 是鞘脂代谢过程中的关键酶，是分解代谢s1p的唯一胞内酶。sgpl1通过直接调控体内s1p水平而影响体内鞘脂类的代谢稳态。bektas等研究表明，相比正常小鼠，sgpl1敲除小鼠血清及肝脏中鞘脂中间代谢产物鞘氨醇、二氢鞘氨醇、神经酰胺水平升高，同时非鞘脂代谢途径的磷脂、tg、二酰甘油及胆固醇水平也升高，这说明sgpl1不仅调节鞘脂代谢，同时还影响其他脂类的代谢。进一步研究表明，sgpl1突变会导致脂肪组织中脂肪合成和分解氧化基因均表达上调，但以氧化分解为主。除此之外，sgpl1促进肺腺癌细胞的增殖和迁移，促进脂肪分解限速酶hsl和脂肪酸氧关键酶cpt1以及lpl、ppar-γ表达上调。综上表明sgpl1在脂类和脂肪代谢中发挥着重要作用，sgpl1过表达会导致动物机体血清脂类代谢紊乱、脂肪氧化分解作用加强及脂肪含量降低，这具有潜在的临床意义，为调节脂质代谢提供了全新的研究思路和调控靶点。
5、然而mir-34和sgpl1在肉牛生长发育中的作用仍不明确，也无相关报道，为了提高和闫旭布莱凯特黑牛的优良品质，需要对其在该品种犊牛初生重中发挥的作用进行确认。
技术实现思路
1、为解决现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种mir-34b在调节布莱凯特黑牛脂肪细胞增殖分化表达中的应用，其促进脂肪组织的增殖和生长，进而影响犊牛初生重。
2、为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案。
3、mir-34b在布莱凯特黑牛育种中的应用。所述mir-34b的核苷酸序列如seq id no:11所示。
4、所述应用为筛选mir-34b含量低的个体作为种牛。
5、mir-34b在调节布莱凯特黑牛脂肪增殖分化中的应用。
6、优选地，所述应用为将含mir-34b模拟物（mimics）或抑制剂（inhibitor）的载体转染靶细胞。
7、在优选的实施例中，mir-34b模拟物的核苷酸序列如seq id no: 5和6所示；mir-34b抑制剂的核苷酸序列如seq id no: 9所示。
8、优选地，所述载体包括但不限于慢病毒、腺病毒、腺相关病毒、脂质体和构建病毒的质粒。
9、优选地，所述靶细胞选自布莱凯特黑牛的体细胞、受精卵、细胞系。
10、本专利技术具有以下优点：
11、本专利技术通过试验证明mir-34b可以调节布莱凯特黑牛脂肪组织的增殖和生长，进而调节犊牛初生重。mir-34b能影响布莱凯特黑牛脂肪细胞的增殖和生长，从而影响胎牛的生长，在育种中应筛选mir-34b含量低的个体作为优质布莱凯特黑牛犊牛。本专利技术为优质布莱凯特肉牛的育种提供了新的方向。
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1.miR-34b在布莱凯特黑牛育种中的应用，其特征在于，所述应用为筛选miR-34b含量低的个体作为种牛；
2.miR-34b在调节布莱凯特黑牛脂肪增殖分化中的应用，其特征在于，所述应用为将含miR-34b模拟物或抑制剂的载体转染靶细胞；miR-34b的核苷酸序列如SEQ ID NO: 11所示。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，miR-34b模拟物的核苷酸序列如SEQ IDNO: 5和6所示；miR-34b抑制剂的核苷酸序列如SEQ ID NO: 9所示。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述载体选自慢病毒、腺病毒、腺相关病毒、脂质体或构建病毒的质粒。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述靶细胞选自布莱凯特黑牛的体细胞、受精卵、细胞系。
【技术特征摘要】
1.mir-34b在布莱凯特黑牛育种中的应用，其特征在于，所述应用为筛选mir-34b含量低的个体作为种牛；
2.mir-34b在调节布莱凯特黑牛脂肪增殖分化中的应用，其特征在于，所述应用为将含mir-34b模拟物或抑制剂的载体转染靶细胞；mir-34b的核苷酸序列如seq id no: 11所示。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：董雅娟，刘瑞莉，张文琦，柏学进，陈振鹏，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：
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