一种基于RyR2通道判断待测物是否为心脏毒性化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于RyR2判断待测物是否为心脏毒性化合物的方法。本发明专利技术公开的方法以RyR2为心脏毒性化合物筛选的靶点，相对于阴性对照，受试物激活RyR2靶点，引起Ca<supgt;2+</supgt;外排入胞浆，以细胞内钙离子浓度为检测指标，结合高通量技术，对化合物的心肌毒性进行检测，缩短了测试周期，减少了干扰因素，结果更加稳定可靠，开创了一种新的用于前期大批量检测化合物心脏毒性的体外方法，为心脏毒性安全研究奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于ryr2判断待测物是否为心脏毒性化合物的方法，属于细胞生物学域。

技术介绍

1、自1964年selzer等报道了奎尼丁引起qt间期延长和室颤发作的病例以来，药物引发的心脏毒性开始成为影响公共卫生安全的重要问题。食品、药品或是其他物质，其引发的心脏毒性问题一直受到全球高度重视，物质的心脏安全性评价方法更是各国学者研究的热点。近年来，随着科学技术的不断发展，新的安全性评价方法不断出现。

2、目前心脏毒性化合物的筛选方法有如下几种：人用药品注册技术要求国际协调会(ich)于2000年颁布的s7a指南中，推荐的评价药物致qt间期延长的动物实验技术是目前国际上公认的心脏毒性评价方法；2005年颁布的s7b指南中，推荐的基于离体组织或脏器以及细胞的体外电生理评价方法；逐渐向自动化发展的全自动膜片钳技术的herg钾通道评价方法；ilsi/hesi(国际生命科学研究所健康和环境科学研究所)推荐用于非临床安全性评价试验中的心脏生物标志物心肌肌钙蛋白(ctn)，被认为是诊断心肌损伤和坏死时特异性最强、敏感度最高的“金指标”，可预测某种物质引起本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于RyR2判断待测物是否为心脏毒性化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述稳定表达RyR2的稳转细胞株为稳定表达RyR2的HEK293细胞。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的钙离子染料为Fluo-4AM。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的孵育条件为37℃孵育45min-60min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的阳性对照溶液为含有600μM咖啡因的HBSS溶液。>

6.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种基于ryr2判断待测物是否为心脏毒性化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述稳定表达ryr2的稳转细胞株为稳定表达ryr2的hek293细胞。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的钙离子染料为fluo-4am。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的孵育条件为37℃孵育45min-60min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的阳性对照溶液为含有600μm咖啡因的hbss溶液。

6.根据权利要求1所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：张驰，杨佳欣，杨瑶，杨淼，强雨薇，吴肖肖，纪晗旭，梅秀明，蒋迪尧，徐婧婧，李雨枫，王灿，查莉，王浩杰，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：