CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法技术

本发明专利技术提供了CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，涉及CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法技术领域。复苏后用完全培养基重悬细胞，以1:5入T‑25培养瓶，混匀后转入培养箱中，再转移至离心管，离心处理，离心完成后弃去上清，重悬调整浓度；CIK细胞离心处理，离心完成后弃去上清，加入CIK细胞培养基，将浓度进行稀释为不同浓度的效应细胞，设置实验孔、效应细胞对照孔及靶细胞对照孔进行铺板培养，每孔加入CCK‑8，混匀培养，再用酶标仪测定OD值，最后计算杀伤率。本发明专利技术通过统一的检测工艺，包括靶细胞准备、效应细胞准备、铺板以及杀伤检测，实现CIK细胞杀伤肿瘤细胞的可重复检测，以判定细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及cik细胞培养，特别涉及cik细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法。

技术介绍

1、cik(cytokine-induced killer，cik)细胞即多种细胞因子诱导的杀伤细胞，是将人的外周血或脐带血中的单个核细胞在体外用多种细胞因子(如抗cd3mcab,il-2,ifn-γ,il-1α等)共同培养后获得的一群以表达cd3+cd56+为主要效应细胞的异质细胞群。这群细胞兼具有t淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和nk细胞的非mhc限制性杀瘤特性，对肿细胞的杀伤活性高，在临床上具有强大的广谱抗瘤活性。

2、cik细胞在培养过程中表达fasl(ⅱ型跨膜糖蛋白)通过与肿瘤细胞膜表达的fas(ⅰ型跨膜糖蛋白)结合，诱导肿瘤细胞凋亡。cik细胞能以不同的机制识别肿瘤细胞通过直接的细胞质颗粒和穿孔素穿透封闭的肿瘤细胞膜进行胞吐，实现对肿瘤细胞的裂解实现杀伤肿瘤细胞的功能。由于cik细胞溶瘤作用是非mhc限制性的，即不受肿瘤组织类型的限制，因此可以对任何一种肿瘤细胞均起到杀伤作用，尤其对高抗原表达的癌症疗效最好，如：髓性白血病、黑色素瘤、肾细胞癌、转移性肾癌、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，在步骤S100，装有RPMI1640培养液的离心管中还加入了10％FBS。

3.根据权利要求1所述的CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，步骤S100和步骤S200中离心处理转速设置为1000r/5min，步骤S300中离心处理转速设置为1500r/5min。

4.根据权利要求1所述的CIK细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，步骤S400，铺板时，在实验孔和对照孔周围留有一圈空孔，向该圈空孔中加入10％FBS液...

【技术特征摘要】

1.cik细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的cik细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，在步骤s100，装有rpmi1640培养液的离心管中还加入了10％fbs。

3.根据权利要求1所述的cik细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，步骤s100和步骤s200中离心处理转速设置为1000r/5min，步骤s300中离心处理转速设置为1500r/5min。

4.根据权利要求1所述的cik细胞杀伤肿瘤细胞的检测方法，其特征在于，步骤s40...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘元，王淑玲，
申请(专利权)人：赛欧双源青岛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：