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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于动物繁殖,具体涉及一种精液冷冻保存的方法。
技术介绍
1、精子超低温冷冻技术目前已在牛、羊、鸡的人工授精得到广泛应用,不仅可实现优质精液的跨时间、空间的调配,而且在优秀地方遗传资源的保护和充分利用方面具有重要意义。然而,由于猪精子膜胆固醇-磷脂比低、不饱和脂肪酸含量高等特性,导致其对温度变化更为敏感,极易受到冷冻损伤。因此,目前猪冷冻精液技术仍不成熟,在实际生产中的应用效果不理想。
2、环糊精是无毒无害的一种小型筒状、具有一个疏水中心和外部亲水性的低聚糖,常用于药物、食品的包被和载体等用途。环糊精可结合胆固醇和脂肪酸,并通过浓度梯度运输其进出细胞膜,可增加质膜胆固醇含量,提高羊、牛、马、兔等精子的抗低温冷冻损伤的能力。肌肽(β-丙氨酰-l-组氨酸)是一种由β-丙氨酸和l-组氨酸两种氨基酸组成的二肽,广泛存在于易兴奋组织中,具有ph缓冲、金属离子螯合、抗氧化能力以及阻止脂质氧化终产物形成的能力。目前尚未见到有关肌肽或肌肽联合环糊精载胆固醇(clc)在猪精液冷冻保存剂中的应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种提高精液冷冻保存效果的方法,以解决精子胆固醇含量低以及氧化损伤导致的冷冻活力差问题。
2、为实现上述目的,本专利技术采用以下的技术方案为:
3、一种提高精液冷冻保存效果的方法,其特征在于,其是将精液加入含有肌肽的冷冻保存液中进行冷冻保存。
4、如上所述的方法,优选地,所述肌肽在冷冻保存液中的浓度为1.2~
5、如上所述的方法,优选地,将精液先进行前处理,前处理为在精液中加入环糊精载胆固醇,孵育后离心,弃上清后的精液中加入冷冻保存液。进一步优选地,所述环糊精载胆固醇添加的浓度为0.3~1.5mg/1.2×108精子,孵育的温度为17℃,孵育的时间为15~30min。
6、如上所述的方法,优选地,所述冷冻保存液中还包括10~15%的鸡蛋黄和3~8%的甘油。
7、进一步地,所述精液为猪精液、牛精液、鼠精液、羊精液、人精液。
8、肌肽和环糊精载胆固醇在提高精液冷冻保存质量中的应用。肌肽和环糊精载胆固醇处理精液,从而提高精液冷冻保存后的质量。
9、具体地,在精液中先加入环糊精载胆固醇,孵育后离心,弃上清后的精液中加入含有肌肽的冷冻保存液冷冻保藏。
10、进一步地,所述环糊精载胆固醇添加的浓度为0.3~1.5mg/1.2×108精子,孵育的温度为17℃,孵育的时间为15~30min;肌肽在冷冻保存液中的浓度为1.2~10mm。本专利技术的有益效果在于:
11、本专利技术提供的一种提高精液冷冻保存效果的方法,该方法能有效提高精液冷冻保存后质膜的完整性、精子活力、胆固醇含量和atp含量,并降低活性氧含量。本专利技术还提供了肌肽的一种新的用途,在精液冷冻保存液中加入肌肽,能有效果提高冷冻保存的精液的质量,为精液保存提供了一定的技术支持。
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1.一种提高精液冷冻保存效果的方法,其特征在于,其是将精液加入含有肌肽的冷冻保存液中进行冷冻保存。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述肌肽在冷冻保存液中的浓度为1.2~10mM。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将精液先进行前处理,前处理为在精液中加入环糊精载胆固醇,孵育后离心,弃上清后的精液中加入冷冻保存液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述环糊精载胆固醇添加的浓度为0.3~1.5mg/1.2×108精子,孵育的温度为17℃,孵育的时间为15~30min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述冷冻保存液中还包括10~15%的鸡蛋黄和3~8%的甘油。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述精液为猪精液、牛精液、鼠精液、羊精液、人精液。
7.肌肽和环糊精载胆固醇在提高精液冷冻保存质量中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,在精液中先加入环糊精载胆固醇,孵育后离心,弃上清后的精液中加入含有肌肽的冷冻保存液冷冻保藏。
9.根
...【技术特征摘要】
1.一种提高精液冷冻保存效果的方法,其特征在于,其是将精液加入含有肌肽的冷冻保存液中进行冷冻保存。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述肌肽在冷冻保存液中的浓度为1.2~10mm。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将精液先进行前处理,前处理为在精液中加入环糊精载胆固醇,孵育后离心,弃上清后的精液中加入冷冻保存液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述环糊精载胆固醇添加的浓度为0.3~1.5mg/1.2×108精子,孵育的温度为17℃,孵育的时间为15~30min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述冷冻...
【专利技术属性】
技术研发人员:白佳桦,刘彦,许晓玲,刘克雄,张寒冰,张司龙,
申请(专利权)人:北京市农林科学院,
类型:发明
国别省市:
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