一种MsPYR1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法技术

本发明专利技术公开了一种MsPYR1‑like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，属于新疆野苹果种子研究技术领域，包括提取种子RNA以及合成cDNA第1链；以cDNA为模板扩增基因；构建MsPYR1‑like基因载体与亚细胞定位；MsPYR1‑like基因不同层积时期表达及种子萌发分析；本方法以新疆野苹果种子为试验材料，扩增PMsPYR1‑like基因序列，对MsPYR1‑like基因生物信息学，编码蛋白进行序列特征、进化树分析；利用亚细胞定位探明其作用位置；qRT‑PCR分析新疆野苹果种子低温层积过程中的表达水平，为新疆野苹果种子MsPYR1‑like基因解除休眠作用机制提供了理论基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及新疆野苹果种子研究，具体涉及一种mspyr1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法。

技术介绍

1、脱落酸(aba)在调控植物多个生长发育过程中起关键作用，如抑制种子萌发、促进气孔关闭、果实成熟和响应逆境胁迫。萌发主要取决于种子的生理状态(休眠)，由植物基因型和环境因子(如温度、土壤湿度、光照)和营养供应之间的相互作用影响。在植物中萌发主要是通过调节脱落酸(aba)和赤霉素(ga)的代谢和信号来实现的，aba和ga的拮抗作用对种胚形成到种子萌发的全过程进行调控，其时空平衡在种子生物学中起着关键作用。当aba/ga比率高时，有利于种子休眠而不是发芽，当aba/ga比率低时，则相反。pyr/pyl/rcar基因家族作为aba受体，与aba结合后能够启动aba信号传导通路，诱导aba应答基因的表达，aba受体的研究是阐明植物激素代谢和信号传导通路的关键环节。2009年，ma和park两个研究团队在拟南芥中分别采用酵母双杂交和遗传筛选的方法，发现并证实pyr/pyl/rcar蛋白是新的aba受体，分别命名为rcar1和pyr1。拟南芥中rcar本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种MsPYR1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：所述的MsPYR1-like基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的一种MsPYR1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：所述的

3.根据权利要求1所述的一种MsPYR1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：所述的MsPYR1-like基因参与调控种子休眠解除过程，且新疆野苹果种子萌发率与MsPYR1-like基因表达水平呈负相关。

4.根据权利要求1所述的一种MsP...

【技术特征摘要】

1.一种mspyr1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：所述的mspyr1-like基因的核苷酸序列如seq id no.1所示，蛋白序列如seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的一种mspyr1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：所述的

3.根据权利要求1所述的一种mspyr1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：所述的mspyr1-like基因参与调控种子休眠解除过程，且新疆野苹果种子萌发率与mspyr1-like基因表达水平呈负相关。

4.根据权利要求1所述的一种mspyr1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：包括

5.根据权利要求4所述的一种mspyr1-like基因扩增、表达与亚细胞定位分析方法，其特征在于：步骤2.1所述的提取新疆野苹果种子rna以及合成新疆野苹果种子的cdna第1链的过程包括

6.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶春秀，房震，李静，张凯，马娟，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：