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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物、生物工程,具体涉及一株益生植物乳杆菌及其应用。
技术介绍
1、益生菌被定义为通过定植在生物机体内,改变宿主菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物。目前常用的益生菌包括乳酸杆菌属、链球菌属、芽孢杆菌属、双歧杆菌属、肠球菌属、曲霉菌属、念珠菌属和酵母属等。益生菌对多种消化道疾病表现出显著治疗效果,如急性感染性腹泻、抗生素相关性腹泻、溃疡性结肠炎、肠易激综合征和功能性胃肠道疾病等,因此被认为是最有潜力的抗生素替代品之一。
2、植物乳杆菌是一种革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性、无芽孢、厌氧或兼性好氧球菌或棒状菌,其主要发酵产物是碳水化合物代谢产生的乳酸。据报道植物乳杆菌是肠道细菌的主力军,具有生理活性且代谢稳定,外源补充的植物乳杆菌在通过宿主上行消化系统后仍然具有一定存活率,并在到达宿主肠道后定植并发挥其益生作用。因此,从某种程度上说动物肠道内存活的植物乳杆菌数量可以反应出动物的健康状态。
3、但是,在实际生产加工以及动物食用过程中,植物乳杆菌不可避免地面临着环境或宿主消化道中的多种胁迫,如在发酵生产过程中由于乳酸和乙酸积累形成酸胁迫、在保藏和运输过程中冷冻和冻干形成冷冻胁迫、在宿主消化道中面临胃酸胁迫和胆盐胁迫。菌株性能,如对低ph和高胆盐的耐受性、抗菌性能、粘附性能、抗氧化性能和降低胆固醇活性等,直接影响其作为益生菌时的益生性能。
4、微胶囊技术是指以可成膜的聚合物材料为囊材,通过化学法、物理法或物理化学法将物质进行包埋和固化,并在特定条件下控制释放的技术。微胶囊的作用体现在保护物质
技术实现思路
1、本专利技术的第一目的在于提供一株益生植物乳杆菌,该益生植物乳杆菌能够耐受模拟消化道环境并抑制5种病原指示菌活性。
2、为实现上述技术目的,本专利技术采用如下技术方案:
3、一株益生植物乳杆菌,其分类命名为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)nj1007,保藏编号为cctcc no:m20211196。
4、所述植物乳杆菌nj1007的菌落形态特征:革兰氏阳性菌、无芽孢,菌落呈圆形、凸起、深乳白色。
5、所述植物乳杆菌nj1007的体外益生特性。
6、植物乳杆菌nj1007在血琼脂平板表面长出的植物乳杆菌nj1007菌落周围无溶血环,表明菌株属于γ-溶血,可以作为益生菌使用。菌株的发酵液及其滤液对单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、β-溶链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有活性抑制作用,尤其对大肠杆菌活性抑制能力最强,而菌体对5种病原指示菌活性均无影响,表明菌株合成的有效抑菌成分是被分泌到胞外发挥作用。ph值为7.0的发酵滤液的抑菌效果最差,表明菌株合成的有效抑菌成分主要为有机酸类化合物。菌株具有较强的粘附能力,其自聚集率为43.14%,以二甲苯和乙酸乙酯作为吸附剂时的细胞表面疏水性分别为95.08%和82.26%,对caco-2细胞的粘度系数为1253cfu/100 caco-2 cells。菌株具有良好的抗氧化性,其对dpph·自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别可以达到88.23%、38.97%和66.23%。
7、所述植物乳杆菌nj1007对引起高尿酸血症的嘌呤核苷的降解效果。
8、采用任宇杰等人(任宇杰,单成俊,王英,张会,刘浩男,刘小莉,周剑忠.降解嘌呤核苷乳酸菌的筛选及益生特性探索[j].微生物学通报,2023,50(02):541-552.)报道的乳酸菌降解嘌呤核苷的方法测定植物乳杆菌nj1007降解肌苷和鸟苷的能力。植物乳杆菌nj1007对肌苷和鸟苷的降解率分别为96.37%和96.74%,表明菌株具有较好的降解嘌呤核苷的能力,可作为预防或治疗高尿酸血症的潜在菌株。
9、本专利技术的第二目的在于提供上述益生植物乳杆菌在制备广谱抑菌制剂中的应用。
10、作为一种优选的实施方式,所述益生植物乳杆菌以菌液或发酵滤液的形式作为广谱抑菌制剂使用;
11、所述菌液为发酵所述益生植物乳杆菌得到的发酵液;
12、所述发酵滤液为将所述菌液离心后获得的上清液。
13、优选的,所述益生植物乳杆菌在mrs液体培养基中静置培养发酵。
14、作为一种优选的实施方式,所述广谱抑菌制剂抑制的病原菌包括单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、β-溶链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
15、本专利技术的第三目的在于提供上述益生植物乳杆菌在制备肠道菌群调节药物中的应用。
16、作为一种优选的实施方式,所述益生植物乳杆菌通过促进肠道中乳酸菌增殖及抑制大肠杆菌生长的方式调节肠道菌群。
17、作为一种优选的实施方式,所述益生植物乳杆菌以微胶囊的形式递送至动物肠道。
18、作为一种优选的实施方式,所述微胶囊制备方式如下:
19、利用生理盐水重悬所述益生植物乳杆菌的菌体,制得菌悬液;
20、配制分离乳清蛋白、可得然胶和海藻酸钠混合溶液,向混合溶液加入所述菌悬液,静置得到胶菌液;其中,混合溶液中分离乳清蛋白质量浓度为5.5-6.5%,海藻酸钠质量浓度为1.5-2.5%,可得然胶质量浓度为0.5-0.8%;
21、将胶菌液滴入氯化钙溶液中形成凝胶球,过滤凝胶球并洗涤后制得所述微胶囊。
22、本专利技术的第四目的在于提供一种植物乳杆菌微胶囊,该微胶囊以上述益生植物乳杆菌作为被递送的药物,分离乳清蛋白、可得然胶和海藻酸钠作为混合壁材制得。
23、由海藻酸钠、分离乳清蛋白和可得然胶共混制备的植物乳杆菌微胶囊在环境中对菌体具有保护作用,在模拟消化道中具有肠溶性。此外,微胶囊中的菌体存活率较高,在4℃和室温条件下贮藏90d时,微胶囊中菌体存活率分别为83.74%和69.80%,是未包埋菌体存活率的1.91和9.06倍。在spf小鼠日粮中添加高活菌数微胶囊(10lg cfu/g)后饲喂14d,小鼠体重增加22.7%,粪便中的乳酸菌增加12.39%,大肠杆菌减少13.32%,表明微胶囊中的菌体可以在spf小鼠肠道中定植和抑制大肠杆菌。
24、本专利技术首次从浓香型多轮底发酵酒醅中分离到既能够耐受模拟消化道环境,也能抑制单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、β-溶链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌活性的一株植物乳杆菌nj1007。该菌株具有较好的安全性和优良的生理生化特性,可作为益生菌使用。利用微囊化技术将该菌株包裹于胶囊中,显著降低了不良消化道环境对菌体产生的影响,提高了菌体存活率。利用该胶囊喂食小鼠能够促进小鼠肠道中乳酸菌的增殖,抑制大肠杆菌生长。
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1.一株益生植物乳杆菌,其分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)NJ1007,保藏编号为CCTCC NO:M20211196。
2.权利要求1所述益生植物乳杆菌在制备广谱抑菌制剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述益生植物乳杆菌以菌液或发酵滤液的形式作为广谱抑菌制剂使用;
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述益生植物乳杆菌在MRS液体培养基中静置培养发酵。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述广谱抑菌制剂抑制的病原菌包括单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、β-溶链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
6.权利要求1所述益生植物乳杆菌在制备肠道菌群调节药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述益生植物乳杆菌通过促进肠道中乳酸菌增殖及抑制大肠杆菌生长的方式调节肠道菌群。
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述益生植物乳杆菌以微胶囊的形式递送至动物肠道。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述
10.一种植物乳杆菌微胶囊,其特征在于,以权利要求1所述益生植物乳杆菌作为被递送的药物,分离乳清蛋白、可得然胶和海藻酸钠作为混合壁材制得。
...【技术特征摘要】
1.一株益生植物乳杆菌,其分类命名为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)nj1007,保藏编号为cctcc no:m20211196。
2.权利要求1所述益生植物乳杆菌在制备广谱抑菌制剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述益生植物乳杆菌以菌液或发酵滤液的形式作为广谱抑菌制剂使用;
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述益生植物乳杆菌在mrs液体培养基中静置培养发酵。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述广谱抑菌制剂抑制的病原菌包括单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、β-溶链...
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