【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多肽，尤其涉及一种鱼源咸味增强肽及其基于分子模拟筛选的方法和应用。
技术介绍
1、咸味增强肽是近年来研究的一个热门课题，它被认为是一种可以替代食盐的天然提取物。与传统的人工合成的风味促进剂相比，咸味增强肽具有绿色健康、安全易接受等特点。咸味增强肽是从天然食材中提取出来的，它能够为食物提供咸味，并且还能够补充人体必需的氨基酸。相比于直接减少食盐添加量而导致食品味道欠佳的情况，咸味增强肽可以在一定程度上解决食品咸味感知降低、风味欠缺等问题。咸味增强肽的开发和利用有着巨大的价值和前景。对于那些需要限制钠摄入的人群来说，咸味增强肽可能是一种理想的选择，它可以帮助人们减少食盐的摄入量，同时保持食物的美味。 总的来说，咸味增强肽是一种有潜力的、绿色健康的盐替代品，对于促进饮食健康和改善食品质量具有积极的作用。
2、鲣鱼是一种具有高度营养价值和开发潜力的海洋资源。其富含优质蛋白质，且脂肪含量相对较低，具有多种重要营养成分，如维生素、矿物质和抗氧化剂等，是一个良好的营养来源，能够满足身体所需的各种微量元素，因此，利用鲣鱼开发制备咸味增强肽具有很好的应用前景。目前，利用鲣鱼制备咸味增强肽的工艺迄今为止尚未见报道。
3、
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种鱼源咸味增强肽及其基于分子模拟筛选的方法和应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、本专利技术首先提供了一种鱼源咸味增强肽，所述鱼源咸味增强肽氨基酸序列
4、本专利技术进一步提供了一种制备上述的鱼源咸味增强肽的方法，所述方法包括如下步骤：
5、1) 鲣鱼酶解液的制备：
6、使用不锈钢绞肉机对鲣鱼进行处理，加水搅拌形成鲣鱼浆料液，调节ph值至碱性后加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解结束后进行灭酶处理，离心收集上清液，即得鲣鱼酶解液；
7、2) 鲣鱼酶解液的分离纯化：
8、利用凝胶过滤色谱sephadex g-25对鲣鱼酶解物进行分离纯化，收集得到的不同组分冻干后备用；
9、3) 咸味增强肽的鉴定和筛选：
10、采用纳升液相色谱-四极杆轨道阱质谱仪对不同组分进行氨基酸序列测定，获得多肽序列。使用计算机方法辅助筛选组分中可食用且具有亲水性的小分子肽，通过分子对接软件筛选得到咸味增强肽，即得到所述的鲣鱼咸味增强肽。
11、上述步骤1) 中，碱性蛋白酶的酶底比为5.25% (w/w)，酶解条件为50℃，酶解时间3.09h。
12、上述步骤2) 中，sephadex g-25凝胶过滤色谱的分离纯化条件为：先用去离子水平衡，再用去离子水进行洗脱，流速为0.3 ml/min，检测波长为214 nm。
13、上述步骤3) 中，质谱得到的肽序列通过蛋白质数据库筛选得到的具有鲣鱼蛋白源的多肽序列，上述鲣鱼蛋白源的多肽通过多肽毒性数据库筛选得到无毒可食用、亲水性＞0 的肽序列。
14、上述步骤3) 中，使用chem3d pro软件将前一步得到的小分子肽生成多肽模型，将该模型导入discovery studio 2019 软件中，进行配体最小化，获得最佳多肽模型。
15、上述步骤3) 中，咸味受体enac模型由swiss-model网站同源建模获得，其中enac受体序列获得于ncbi网站，筛选得到评分最高的受体模型作为对接受体模型。多肽模型与受体enac进行分子对接，得到1个小分子肽，即为所述的鲣鱼咸味增强肽。
16、本专利技术还提供了上述的鱼源咸味增强肽在风味调节剂中的应用。
17、本专利技术的显著优点在于：
18、本专利技术利用肽组学和分子对接的方法，简化了分离纯化等繁琐的步骤，节省了昂贵的仪器耗材使用，从鲣鱼酶解物中筛选出具有特定氨基酸序列的咸味增强肽。以食源性材料进行咸味增强肽的可控酶解制备，降低成本的同时有利于实现呈味肽的规模化生产和应用，为应用于食品调味品的发展提供理论支撑。
19、
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种鱼源咸味增强肽，其特征在于：其氨基酸序列为LDFE，分子量为522.59 Da，所述咸味增强肽来源于鲣鱼，且与咸味受体ENaC进行分子对接。
2.一种基于分子模拟筛选如权利要求1所述鱼源咸味增强肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，碱性蛋白酶酶底比为5.25%w/w，酶解温度为50 ℃，酶解时间为3.09 h。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，Sephadex G-25凝胶过滤色谱的分离纯化条件为：先用去离子水平衡，再用去离子水进行洗脱，流速为0 .3 mL/min，检测波长为214 nm。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中，质谱得到的肽序列通过蛋白质数据库筛选得到的具有鲣鱼蛋白源的多肽序列，所述鲣鱼蛋白源的多肽通过多肽毒性数据库筛选得到无毒可食用、亲水性＞0 的肽序列。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中，所述使用计算机方法辅助筛选的方法具体包括：使用Chem3D Pro软件将得到的
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中，咸味受体ENaC模型由SWISS-MODEL网站同源建模获得，其中ENaC受体序列获得于NCBI网站，筛选得到评分最高的受体模型作为对接受体模型；将多肽模型与受体模型进行分子对接，得到1个小分子肽，即为所述的鲣鱼咸味增强肽。
8.一种如权利要求1所述鱼源咸味增强肽在制备调味品产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种鱼源咸味增强肽，其特征在于：其氨基酸序列为ldfe，分子量为522.59 da，所述咸味增强肽来源于鲣鱼，且与咸味受体enac进行分子对接。
2.一种基于分子模拟筛选如权利要求1所述鱼源咸味增强肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，碱性蛋白酶酶底比为5.25%w/w，酶解温度为50 ℃，酶解时间为3.09 h。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，sephadex g-25凝胶过滤色谱的分离纯化条件为：先用去离子水平衡，再用去离子水进行洗脱，流速为0 .3 ml/min，检测波长为214 nm。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中，质谱得到的肽序列通过蛋白质数据库筛选得到的具有鲣鱼蛋白源的...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡茜茜，汪少芸，高婷婷，黄心澄，陈旭，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。