一种基于297位点的S-腺苷蛋氨酸合成酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体涉及一种基于297位点的S‑腺苷蛋氨酸合成酶突变体及其应用。本发明专利技术S‑腺苷蛋氨酸合成酶突变体的野生菌来源于Guyparkeria sp.XI15，经定点突变获得与酶催化活性相关的核心氨基酸发生突变的突变体；在对应于SEQ ID NO:1的氨基酸序列的第1至390位中仅存在下述之一的突变：D22S；G123D；D244A；K251I；G266S；A297S；其氨基酸序列为SEQ ID NO:3‑8之一所示；本发明专利技术的S‑腺苷蛋氨酸合成酶突变体实现了在S‑腺苷蛋氨酸生物合成中的应用，使得S‑腺苷蛋氨酸的产率能够达到25.7g/L、过程产品纯度能够达到89.7%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，特别涉及一种基于297位点的s-腺苷蛋氨酸合成酶突变体，还涉及上述突变体的应用。

技术介绍

1、s-腺苷蛋氨酸(sam)，英文名为s-adenosyl-methionine，是动物、植物等生命体内重要的代谢中间物质，也是人体内一种重要的生理活性物质，参与多种生化反应，如作为胞内甲基供体，sam在核酸、蛋白质以及脂类等分子的甲基化修饰中扮演重要角色。同时，sam还参与胞内的转硫基反应以及聚胺的合成等重要生化反应。sam也是一种非常有价值的医药分子，在治疗肝病、抑郁症和风湿性关节炎中发挥重要作用。

2、sam是由底物l-甲硫氨酸和atp经s-腺苷甲硫氨酸合成酶酶促合成，因此，s-腺苷蛋氨酸合成酶是合成sam的关键酶。目前腺苷蛋氨酸工业化生产工艺主要有酵母发酵法和酶促转化法两种。国外多采用特殊培育的表达sam的酿酒酵母菌株通过胞内表达制备sam。国内有人研究出基因工程改构的酿酒酵母，发酵表达sam，但目前表达最高的也只达到10g/l发酵液以内，且发酵液中腺苷蛋氨酸的纯度较低，造成整体收率偏低，生产成本仍然较高。酶促法多以从啤酒本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于297位点的S-腺苷蛋氨酸合成酶突变体，其特征在于，所述突变体在对应于SEQ ID NO:1的氨基酸序列的第1至390位中仅存在下述的突变：A297S；其氨基酸序列为SEQID NO: 8所示。

2.权利要求1所述的S-腺苷蛋氨酸合成酶突变体的编码基因，其特征在于，所述编码基因的序列如SEQ ID NO: 14所示。

3.包含权利要求2所述的S-腺苷蛋氨酸合成酶突变体编码基因的表达载体。

4.包含权利要求2所述的S-腺苷蛋氨酸合成酶突变体编码基因的重组细胞。

5.权利要求1所述的S-腺苷蛋氨酸合成酶突变体在制备S-腺苷蛋氨酸中的...

【技术特征摘要】

1.一种基于297位点的s-腺苷蛋氨酸合成酶突变体，其特征在于，所述突变体在对应于seq id no:1的氨基酸序列的第1至390位中仅存在下述的突变：a297s；其氨基酸序列为seqid no: 8所示。

2.权利要求1所述的s-腺苷蛋氨酸合成酶突变体的编码基因，其特征在于，所述编码基因的序列如seq id no: 14所示。

3.包含权利要求2所述的s-腺苷蛋氨酸合成酶突变体编码基因的表达载体。

4.包含权利要求2所述的s-腺苷蛋氨酸合成酶突变体编码基因的重组细胞。

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【专利技术属性】
技术研发人员：马钦元，王辉，高秀珍，张同，沈剑，荣金雷，梁寒冰，张成国，
申请(专利权)人：山东理工大学，
类型：发明
国别省市：