【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及使用原子力显微镜检测附着于固体基底的寡核苷酸双链体中是否存在错配对的装置和方法。具体而言，本专利技术的方法和装置允许通过使用包含afm悬臂的原子力显微镜来定性和定量分析寡核苷酸双链体样品中错配对的存在，所述afm悬臂包含dna错配修复蛋白。本专利技术的方法和装置允许检测基因突变，而无需扩增、标记或修饰样品。这种装置和方法可用于多种临床诊断应用，包括但不限于检测和/或分析与癌症、创伤、败血症、无菌性炎症、心肌梗塞、中风、移植、糖尿病、镰状细胞病以及其他临床病症相关的生物标志物。
技术介绍
1、循环游离dna或无细胞dna(cfdna)是释放到血浆中的降解dna片段。示例性cfdna包括但不限于循环肿瘤dna(ctdna)和无细胞胎儿dna(cffdna)。特别值得注意的是，在癌症中观察到cfdna水平升高，尤其是在疾病的晚期。也有证据表明，cfdna随着年龄的增长而增加。
2、cfdna已被证明是多种临床病症的有用生物标志物，所述临床病症包括但不限于癌症、创伤、败血症、无菌性炎症、心肌梗塞、中风、移植、糖尿病、镰...
【技术保护点】
1.一种用于确定附着于固体基质的寡核苷酸双链体中错配存在的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述DNA错配修复蛋白是原核错配修复蛋白。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述DNA错配修复蛋白包括MutS或其同源物。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述DNA错配修复蛋白是真核错配修复蛋白。
5.原子力显微镜(AFM)悬臂尖端，包含组氨酸标记的DNA错配修复蛋白。
6.根据权利要求5所述的AFM悬臂尖端，其中所述DNA错配修复蛋白是原核错配修复蛋白。
7.根据权利要求6所述...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于确定附着于固体基质的寡核苷酸双链体中错配存在的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述dna错配修复蛋白是原核错配修复蛋白。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述dna错配修复蛋白包括muts或其同源物。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述dna错配修复蛋白是真核错配修复蛋白。
5.原子力显微镜(afm)悬臂尖端，包含组氨酸标记的dna错配修复蛋白。
6.根据权利要求5所述的afm悬臂尖端，其中所述dna错配修复蛋白是原核错配修复蛋白。
7.根据权利要求6所述的afm悬臂尖端，其中所述dna错配修复蛋白包括muts或其同源物。
8.根据权利要求5所述的afm悬臂尖端，其中所述dna错配修复蛋白是真核错配修复蛋白。
9.根据权利要求5所述的afm悬臂尖端，其中所述组氨酸标记的dna错配修复蛋白通过接头连接到所述afm悬臂尖端。
10.根据权利要求6所述的悬臂尖端的afm，其中所述组氨酸标记的dna错配修复蛋白通过所述组氨酸标签与ni(ii)离子的络合作用而被固定到所述afm悬臂尖端。
11.一种用于检测样品中基因突变存在的方法，所述方法包括：
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述探针寡核苷酸包含选自ras、egfr和pik3ca的野生型基因的互补寡核苷酸。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述ras基因选自kras、hras、nras、r-ras、m-ras、e-ras、di-ras1、di-ras2、nkiras1、nkiras2、tc21、rap1、rap2、rit1、rit2、rem1、rem2、rad、gem、rheb1、rheb2、noey2、r-ras、rerg、rala、ralb、rasd1、rasd2、rrp22、rasl10b、rasl11a、rasl11b、ris/rasl12和flj22655。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述方法检测kras基因的第12或13位密码子的突变。
<...【专利技术属性】
技术研发人员：朴俊元，绍拉夫·米什拉，昌吉尔·班，
申请(专利权)人：浦项科技大学研究与商业发展基金会，
类型：发明
国别省市：
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