【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农作物种植，尤其涉及一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法。
技术介绍
1、苦瓜是葫芦科苦瓜属植物，是重要的食药同源蔬菜作物，亦是海南省冬种北运的主要蔬菜作物，占据着冬季蔬菜市场的重要份额。苦瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌苦瓜专化型引起的一种严重危害苦瓜产量和品质的土传病害，在任何生育期均能侵染并造成危害，严重时可引起整株萎蔫死亡。随着复种指数的逐年增加，苦瓜枯萎病日益加剧，严重制约着苦瓜产业的健康发展。苦瓜枯萎病菌在土壤中的存活力和致病力较强，难防难治，选育抗病品种是最经济有效的方法，而高效精准的鉴定评价技术体系是抗病品种选育的重要基础。近年来有关瓜类作物枯萎病抗性鉴定评价的研究多集中在黄瓜和西瓜等，关于苦瓜枯萎病抗性鉴定技术鲜有报道，仍未形成完善的精准的高效的鉴定评价技术体系。尖孢镰刀菌常用的接种方法有灌根法、胚根法、伤根法、蘸根法、浸根法等。种质来源、环境条件、接种方法、接种浓度、鉴定时间等均能影响苦瓜枯萎病的抗性鉴定，因此，制定简单、高效、统一的鉴定评价方法是解决这一问题的重要手段。
技术实现思路
1、鉴于此，本专利技术提出一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，能构建最精准最高效的枯萎病抗性鉴定评价技术体系。
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、本专利技术提出一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，包括如下步骤：
4、将露白的苦瓜种子播种于装满灭菌基质的营养钵，保证基质湿润，待苦瓜幼苗生长至两叶一心时采用灌根法在距根际1±0.2cm处用注射
5、进一步说明，所述枯萎病菌菌液接种菌液浓度为1×104个/ml～1×107个/ml，接种天数为0～25d。
6、进一步说明，所述枯萎病菌菌液接种菌液浓度为1×106个/ml，接种天数为25d。
7、进一步说明，所述生理指标包括苯丙氨酸解氨酶活性、多酚氧化酶活性、叶绿素和可溶性蛋白质含量中的一项或几项。
8、进一步说明，所述露白的苦瓜种子为：将苦瓜种子浸泡于温水中，用湿润的纱布包裹种子，放置于培养箱中培养，获得露白的苦瓜种子。
9、进一步说明，所述枯萎病菌菌液为：将尖孢镰刀菌接种到马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于培养箱中培养，取菌饼接种到马铃薯葡萄糖肉汤培养基中，振荡培养，过滤菌丝，得枯萎病菌菌液。
10、进一步说明，苦瓜种子的培养条件为：放置在28±2℃培养箱中催芽2-3d。
11、进一步说明，尖孢镰刀菌在培养箱中培养的条件为：于28±2℃培养箱中培养7-10d。
12、进一步说明，所述振荡培养的条件为：在26-28℃下、120r/min振荡培养7d。
13、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
14、(1)本专利技术以中抗枯萎病品种热科2号苦瓜为试验材料，采用不同接种方法、不同菌液浓度、不同鉴定时间等方法研究苦瓜枯萎病的抗性生理，综合分析病情指数、根系形态及各项生理指标等，构建高效精准的鉴定评价技术体系，为提高苦瓜种质枯萎病鉴定评价效率和精准性、抗病品种选育提供理论和技术支撑。
15、(2)本专利技术以苯丙氨酸解氨酶(pal)活性、多酚氧化酶(ppo)活性、叶绿素和可溶性蛋白质含量作为判断植物抗病能力强弱的生理指标，苯丙氨酸解氨酶是植物体内合成酚类化合物的关键酶，多酚氧化酶是一种重要的抗氧化酶，叶绿素和可溶性蛋白是植物中的重要生理成分，都能客观反映植物抗病性的强弱。
16、(3)本专利技术采用灌根法接种苦瓜枯萎病菌，这种方法操作简便，可行性强，相对于其他方法来说，操作较为简便，能够节省时间和人力成本，在试验的过程中能够有效地减少接种过程中的人为因素影响及准确地控制接种的菌液浓度和时间，从而保证结果的准确性和可重复性，有利于精准的筛选出具有抗病性的苦瓜种质资源，为抗病品种育种和抗病资源鉴定评价提供理论依据和实践指导。
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1.一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述枯萎病菌菌液接种菌液浓度为1×104个/mL～1×107个/mL，接种天数为0～25d。
3.如权利要求2所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述枯萎病菌菌液接种菌液浓度为1×106个/mL，接种天数为25d。
4.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述生理指标包括苯丙氨酸解氨酶活性、多酚氧化酶活性、叶绿素和可溶性蛋白质含量中的一项或几项。
5.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述露白的苦瓜种子为：将苦瓜种子浸泡于温水中，用湿润的纱布包裹种子，放置于培养箱中培养，获得露白的苦瓜种子。
6.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述枯萎病菌菌液为：将尖孢镰刀菌接种到马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，于培养箱中培养，取菌饼接种到马铃薯葡萄糖肉汤培养基中，振荡培养，过滤菌丝，得枯萎病菌菌液。>
7.如权利要求5所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，苦瓜种子的培养条件为：放置在28±2℃培养箱中催芽2-3d。
8.如权利要求6所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，尖孢镰刀菌在培养箱中培养的条件为：于28±2℃培养箱中培养7-10d；所述振荡培养的条件为：在26-28℃下、120r/min振荡培养7d。
...【技术特征摘要】
1.一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述枯萎病菌菌液接种菌液浓度为1×104个/ml～1×107个/ml，接种天数为0～25d。
3.如权利要求2所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述枯萎病菌菌液接种菌液浓度为1×106个/ml，接种天数为25d。
4.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述生理指标包括苯丙氨酸解氨酶活性、多酚氧化酶活性、叶绿素和可溶性蛋白质含量中的一项或几项。
5.如权利要求1所述的一种精准鉴定苦瓜枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述露白的苦瓜种子为：将苦瓜种子...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩旭，凌怡，杨衍，牛玉，杜公福，于仁波，刘昭华，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：
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