【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物培育，特别是一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法。
技术介绍
1、石榴(punicagranatuml.)别名安石榴、金罂、钟石榴等，为千屈菜科(lythraceae)石榴属(punica)的一种多年生落叶灌木或小乔木，不仅是果树，也是特色经济林树种，因此，石榴树在生态、药用和经济等方面发挥着重要的作用。
2、石榴种类很多，‘泰山红’石榴是其中的一种，‘泰山红’石榴果实个大，平均单果重500克，果实近圆形或扁圆形，果面光洁，呈鲜红色，外形美观，果实皮簿，籽粒鲜红、透明、粒大肉厚，核半软，平均百粒重54克，口感香甜美味。
3、一般的石榴主要采用扦插繁殖，石榴扦插繁殖速度相对较快，能够大规模种植，操作简单，然而，目前‘泰山红’石榴的扦插方法由于生根率较低，无法适用于大规模使用。
4、基于此，本专利技术通过对现有技术进行了进一步的改进，来解决现有的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，以解决现有技术中的不足。
2、本专利技术采用的技术方案如下：
3、一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，包括对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养得到丛生芽，再将丛生芽进行二次培养得到幼苗；
4、其中：愈伤组织诱导分化培养采用诱导分化培养基；
5、所述诱导分化培养基中引入了亚麻籽与葛根混合提取物。
6、作为进一步的技术方案：所述对泰山红石榴愈
7、作为进一步的技术方案：所述外植体具体处理为：
8、将泰山红石榴叶片切成0.7cm×0.7cm大小的块状叶片，近轴面朝上，接种在诱导分化培养基中进行愈伤诱导和不定芽分。
9、作为进一步的技术方案：所述诱导分化培养基按重量份计包括以下成分制成：硝酸钾42-46份、硝酸铵50-55份、硫酸锌0.4-0.46份、磷酸二氢钾2-4份、硫酸亚铁0.1-0.2份、硫酸镁6-8份、黄腐酸钠0.1-0.3份、烟酸0.02-0.05份、氯化钴0.001-0.003份、氯化钙2-3份、乙二胺四乙酸二钠0.08-0.12份、硼酸0.11-0.18份、硫酸锰0.5-0.6份、萘乙酸0.02-0.05份、肌醇0.05-0.09份、吲哚乙酸0.015-0.018份、蔗糖0.3-0.5份、卡拉胶40-46份、琼脂粉12-15份、亚麻籽与葛根混合提取物0.1-0.3份；
10、所述诱导分化培养基的ph为6.0-6.5。
11、作为进一步的技术方案：所述亚麻籽与葛根混合提取物制备方法为：
12、首先，将亚麻籽与湿沙混合在一起，置于28℃温度下，放置10天，然后取出，清洗干净；
13、将清洗干净后的亚麻籽、葛根混合到一起，然后进行粉碎，得到混合粉碎料；
14、将上述得到的混合粉碎料、乙醇溶液进行混合，然后再以1500r/min转速搅拌4小时，再进行超声波处理10min，静置1小时后，进行离心处理，过滤，去除滤渣，得到滤液；
15、将滤液再进行过0.21um微孔滤膜处理，得到复滤液；
16、对复滤液进行喷雾干燥，得到亚麻籽与葛根混合提取物。
17、作为进一步的技术方案：所述亚麻籽与湿沙按1：30质量比例混合；
18、其中湿沙含水量为20％；
19、所述亚麻籽、葛根混合质量比为1:1-3；
20、所述混合粉碎料、乙醇溶液混合比例为34g：120ml；
21、所述乙醇溶液质量分数为70％；
22、所述超声波频率为45khz。
23、作为进一步的技术方案：所述诱导分化为：
24、开始在黑暗无光环境下进行培养7-8天，完成后，再移出至正常光照下进行培养至得到丛生芽；
25、黑暗环境下温度保持在20℃；
26、正常光照时的温度为23℃，光照强度为1100lx，每天正常光照的时间为12h。
27、作为进一步的技术方案：所述丛生芽进行二次培养采用的二次培养基按重量份计包括以下成分制成：硝酸钾52份、硝酸铵46份、硫酸锌0.3份、磷酸二氢钾5份、硫酸亚铁0.5份、硫酸镁7份、烟酸0.02、氯化钙3份、乙二胺四乙酸二钠0.2份、硼酸0.04份、硫酸锰0.7份、萘乙酸0.01份、肌醇0.04份、吲哚乙酸0.03份、卡拉胶38份、琼脂粉20份；
28、所述诱导分化培养基的ph为6.4。
29、作为进一步的技术方案，所述二次培养为正常光照下培养：
30、正常光照时的温度为25℃，光照强度为1500-1550lx，每天正常光照的时间为16h。
31、泰山大红石榴适应性强，寿命长，耐瘠薄，抗旱、适栽范围广，适用于道路、公园、庭院、四季绿化美化及山岭薄地、轻盐碱地等栽植。该品种定植后第二年结果，结果株率90％，第四年可丰产，亩产达300多千克；六年后逐渐进入盛果期，亩产达1000～2000千克。2000年泰山区已建丰产园5000余亩，总产900万千克，总产值8000万元，平均亩产达1500千克，最高亩产达2000余千克，一、二级果率占90％以上。远销河北、天津、山西、上海、江苏等地。1994年，在全国林业名、优、特、新品种博览会上，泰山大红石榴被评为银奖产品。
32、有益效果：
33、本专利技术选择生理代谢旺盛、分化程度较低的泰山红石榴叶片离体组织进行愈伤组织诱导分化，通过采用了泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法来进行泰山红石榴的繁殖，本专利技术的方法能够有效保持亲本优良遗传特性，能够大规模的培育品种优良的泰山红石榴树。
34、为了提高愈伤组织的诱导率以及胚状体的分化率，本专利技术通过对诱导分化培养基进行了优化，通过对诱导分化培养基成分进行了大量的优化调整，以及各成分的用量配比的调整，使得采用诱导分化培养基能够更有效的促进泰山红石榴愈伤组织的分化培养；
35、本专利技术采用诱导分化培养基中不仅添加了全面的营养成分，同时，还引入了一定量的亚麻籽与葛根混合提取物，由于本专利技术制备的亚麻籽与葛根混合提取物中含有多种活性成分，多种活性成分的共同作用，使得亚麻籽与葛根混合提取物不仅全面强化了诱导分化培养基的营养基础，同时，其能够显著提高泰山红石榴愈伤组织分化率的效果，缩短了泰山红石榴愈伤组织分化培养时间，本专利技术的诱导分化培养基可以为愈伤组织提供充足的营养物质，提高了后续成苗的质量，成苗后，进行移栽的成活率超过90％，可见，本专利技术方法培育的泰山红石榴幼苗的成苗质量高。
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1.一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于，包括对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养得到丛生芽，再将丛生芽进行二次培养得到幼苗；
2.根据权利要求1所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养以泰山红石榴叶片为外植体。
3.根据权利要求1所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述外植体具体处理为：
4.根据权利要求3所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述诱导分化培养基按重量份计包括以下成分制成：硝酸钾42-46份、硝酸铵50-55份、硫酸锌0.4-0.46份、磷酸二氢钾2-4份、硫酸亚铁0.1-0.2份、硫酸镁6-8份、黄腐酸钠0.1-0.3份、烟酸0.02-0.05份、氯化钴0.001-0.003份、氯化钙2-3份、乙二胺四乙酸二钠0.08-0.12份、硼酸0.11-0.18份、硫酸锰0.5-0.6份、萘乙酸0.02-0.05份、肌醇0.05-0.09份、吲哚乙酸0.015-0.018份、蔗糖0.3-0.5份、卡拉胶40-46份、琼脂
5.根据权利要求4所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述亚麻籽与葛根混合提取物制备方法为：
6.根据权利要求5所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述亚麻籽与湿沙按1：30质量比例混合；
7.根据权利要求1所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述诱导分化为：
8.根据权利要求1所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述丛生芽进行二次培养采用的二次培养基按重量份计包括以下成分制成：硝酸钾52份、硝酸铵46份、硫酸锌0.3份、磷酸二氢钾5份、硫酸亚铁0.5份、硫酸镁7份、烟酸0.02、氯化钙3份、乙二胺四乙酸二钠0.2份、硼酸0.04份、硫酸锰0.7份、萘乙酸0.01份、肌醇0.04份、吲哚乙酸0.03份、卡拉胶38份、琼脂粉20份；
9.根据权利要求8所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法的，其特征在于，所述二次培养为正常光照下培养：
...【技术特征摘要】
1.一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于，包括对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养得到丛生芽，再将丛生芽进行二次培养得到幼苗；
2.根据权利要求1所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述对泰山红石榴愈伤组织诱导分化培养以泰山红石榴叶片为外植体。
3.根据权利要求1所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述外植体具体处理为：
4.根据权利要求3所述的一种泰山红石榴愈伤组织诱导分化及成苗方法，其特征在于：所述诱导分化培养基按重量份计包括以下成分制成：硝酸钾42-46份、硝酸铵50-55份、硫酸锌0.4-0.46份、磷酸二氢钾2-4份、硫酸亚铁0.1-0.2份、硫酸镁6-8份、黄腐酸钠0.1-0.3份、烟酸0.02-0.05份、氯化钴0.001-0.003份、氯化钙2-3份、乙二胺四乙酸二钠0.08-0.12份、硼酸0.11-0.18份、硫酸锰0.5-0.6份、萘乙酸0.02-0.05份、肌醇0.05-0.09份、吲哚乙酸0.015-0.018份、蔗糖0.3-0.5份、卡拉胶40...
【专利技术属性】
技术研发人员：苑兆和，樊瑶羽薇，招雪晴，滕应芬，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：
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