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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药,尤其涉及一株长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)及其在改善孤独症谱系障碍中的应用,上述菌株从临床粪菌移植(fecalmicrobiota transplantation,fmt)供体菌液中分离获得。
技术介绍
1、孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,asd)是一类以严重孤独、缺乏情感反应、语言发育障碍、刻板重复动作等反应为特征的发育障碍疾病。美国疾控中心2018年统计数据显示,孤独症发病率高达1/59。在中国孤独症逐渐呈高发趋势,发病率高达1%。研究发现肠道菌群失调与孤独症谱系障碍的发生发展具有相关性。
2、长双歧杆菌(bifidobacterium longum)是自然存在于人类胃肠道中的革兰氏阳性棒状细菌,是婴儿在通过母亲阴道时最早在肠道内定植的细菌之一。长双歧杆菌属于益生菌。长双歧杆菌包括婴儿双歧杆菌和猪双歧杆菌亚种。作为人体内健康的肠道菌群,长双歧杆菌能增强免疫力、降低传染病、减轻和治疗胃肠道感染、治疗焦虑和抑郁症和改善腹泻、便秘等。
3、现已有不少研究发现益生菌在改善情绪和调节宿主行为方面的有益作用,当益生菌治疗能显著改善肠易激综合征,炎症肠道疾病和肝性脑病患者的胃肠道症状、神经症状、焦虑抑郁情绪和认知能力,使患者生活质量明显提高。因此,基于益生菌可以保护肠黏膜屏障、抑制致病菌过度增长、增强免疫功能、缓解胃肠道症状,并通过肠-脑轴影响大脑和行为的功能等,益生菌治疗有望成为孤独症谱系障碍(asd)的辅助治疗手段。
技术实现思路
1、为了克服现有技术中的至少一个问题,本专利技术提供一株分离自临床fmt供体菌液的长双歧杆菌分离株,该菌株能改善asd患者的探索行为和自发活动行为,且对asd小鼠的焦虑抑郁样行为和社交行为活动具有改善作用,可将其用于改善孤独症谱系障碍的研究和应用。
2、为实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案:
3、本专利技术的第一个方面是提供一株长双歧杆菌lslmrs3,其保藏编号为cctcc no:m20231055,其分类命名为bifidobacterium longum,保藏日期为2023年06月19日,保藏单位为中国典型培养物保藏中心(简称cctcc),保藏单位地址为中国.武汉.武汉大学。
4、进一步地,所述长双歧杆菌lslmrs3的16s rrna的序列如seq id no.1所示。
5、进一步地,所述长双歧杆菌lslmrs3的形态特征为:在哥伦比亚血平板培养呈较小、圆形、光滑、半透明白色菌落;经革兰染色后镜下呈紫色、典型双歧杆菌形态。
6、本专利技术的第二个方面是提供一种微生物菌剂,其包含本专利技术的第一个方面中任一所述的长双歧杆菌的菌体、芽胞、培养液中的至少一种。
7、进一步地,所述微生物菌剂为长双歧杆菌的冻干菌粉,所述冻干菌粉的制备包括步骤:将发酵所得菌液离心浓缩,与抗冻剂及赋形剂混合,预冻,冷冻干燥,磨细混匀。具体地,将发酵所得菌液4℃离心浓缩,与抗冻剂(甘露醇,10-100g/l)以及赋形剂(脱脂乳粉,50-200g/l)等混合后,-40℃预冻1-2小时,放入真空冷冻干燥机中进行冷冻干燥15-25小时,磨细混匀。可理解的是,上述抗冻剂和赋形剂也可为本领域其他常规使用的试剂。
8、进一步地,所述冻干菌粉的活菌浓度为1×107~1×109cfu/g;具体地,可为:1×107~5×107cfu/g、5×107~1×108cfu/g、1×108~5×108cfu/g、5×108~1×109cfu/g等等;更优选地,选取1×108~1×109cfu/g的冻干菌粉用于制备菌悬液。
9、进一步地,所述微生物菌剂可用于制备长双歧杆菌的菌悬液,所述菌悬液的制备包括步骤:将长双歧杆菌的冻干菌粉悬浮于pbs溶液中制备pbs菌悬液,所述pbs菌悬液中的活菌浓度为1×108~1×1010cfu/ml(例如108-109cfu/ml、109-1010cfu/ml等)。
10、本专利技术的第三个方面是提供一种如本专利技术第一个方面中任一所述的长双歧杆菌、或如本专利技术第二个方面中任一所述的微生物菌剂在制备用于改善孤独症谱系障碍的产品中的应用。可理解的是,上述改善孤独症谱系障碍包括预防和/或治疗孤独症谱系障碍疾病。
11、进一步地,所述产品可用于患有孤独症的哺乳动物,所述哺乳动物选自啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。进一步地,所述啮齿目动物优选鼠;所述灵长目动物优选为猴、猿或人。
12、进一步地,所述应用为制备用于改善asd患者的探索行为和自发活动行为的产品。
13、进一步地,所述应用为制备用于改善asd患者的焦虑抑郁样行为和/或改善社交行为活动(包括改善社交新颖性缺陷)的产品。
14、进一步地,所述产品包括食品、保健品或药物。
15、进一步地,所述产品的剂型包括固体、液体、凝胶、半流质、气雾或粉剂。
16、进一步地,所述药物中还包括药学上可接受的载体或辅料。
17、“药学上可接受的”是指当药物适当地给予动物或人时,它们不会产生不利的、过敏的或其它不良反应。“药学上可接受的载体或辅料”应当与有效成分相容,即能与其共混而不会在通常情况下大幅度降低药物的效果,上述载体或辅料均为本领域常规使用的物质,根据实际需要以用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味。
18、进一步地,在一具体实施方式中,在上述应用中,给予asd小鼠长双歧杆菌lslmrs3菌株灌胃处理;每次108-109cfu(使用pbs悬浮菌液),每两天灌胃一次,其中pbs悬浮菌液中活菌浓度为109-1010cfu/ml,每次灌胃量为0.1-0.2ml。
19、与现有技术相比,本专利技术采用上述技术方案具有以下有益效果:
20、现有技术中用于asd治疗研究的益生菌疗法鲜有对各种菌种的研究,在asd益生菌疗法研究中并不能充分代表其治疗方案的选择多样性;本专利技术首次从临床粪菌移植(fecalmicrobiota transplan本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum),其特征在于,所述长双歧杆菌的名称为LSLMRS3,其保藏编号为CCTCC NO:M20231055。
2.一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂包含如权利要求1所述的长双歧杆菌的菌体、芽胞、培养液中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为长双歧杆菌的冻干菌粉,所述冻干菌粉的制备包括步骤:将发酵所得菌液离心浓缩,与抗冻剂及赋形剂混合,预冻,冷冻干燥,磨细混匀。
4.根据权利要求3所述的一种微生物菌剂,其特征在于,所述冻干菌粉的活菌浓度为1×107~1×109CFU/g。
5.一种如权利要求1所述的长双歧杆菌、或如权利要求2~4中任一项所述的微生物菌剂在制备用于改善孤独症谱系障碍的产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述应用为制备用于改善ASD患者的探索行为和自发活动行为的产品。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述应用为制备用于改善ASD患者的焦虑抑郁样行为和/或改善
8.根据权利要求5~7中任一项所述的应用,其特征在于,所述产品包括食品、保健品或药物。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述产品的剂型包括固体、液体、凝胶、半流质、气雾或粉剂。
10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述药物中还包括药学上可接受的载体或辅料。
...【技术特征摘要】
1.一株长双歧杆菌(bifidobacterium longum),其特征在于,所述长双歧杆菌的名称为lslmrs3,其保藏编号为cctcc no:m20231055。
2.一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂包含如权利要求1所述的长双歧杆菌的菌体、芽胞、培养液中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为长双歧杆菌的冻干菌粉,所述冻干菌粉的制备包括步骤:将发酵所得菌液离心浓缩,与抗冻剂及赋形剂混合,预冻,冷冻干燥,磨细混匀。
4.根据权利要求3所述的一种微生物菌剂,其特征在于,所述冻干菌粉的活菌浓度为1×107~1×109cfu/g。
5.一种如权利要求1所述的长...
【专利技术属性】
技术研发人员:秦环龙,蔚青,毕德玺,王继峰,巫俞利,
申请(专利权)人:上海市第十人民医院,
类型:发明
国别省市:
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