【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于白木香繁殖，具体涉及一种白木香组织培养快繁体系的建立方法。
技术介绍
1、白木香属瑞香科白木香属常绿乔木植物，其含有树脂的心材是国产白木香药材来源。白木香具有极高的经济价值，其树干可分泌出一种能制取中药的物质——白木香，它是我国、印度以及其他东南亚国家的传统名贵的药材和天然香料，有降气、平肝、镇静、止痛等多种功能。此外，白木香树皮纤维发达，为造纸和人造棉的好原料；种子富含油脂，有重要的工业用途。白木香主要分布于我国热带及亚热带地区，然而长期以来受自然灾害和人为破坏，白木香野生资源量不断减少，1987年白木香被列为国家珍稀濒危三级保护植物，1999年被列为国家二级重点保护野生植物。白木香的种子需要即采即种，在自然状态下，白木香种子只能存活1个月左右；新鲜种子在4℃条件下贮存易发霉，1个月后其活力降至50％以下，55天基本上就全部丧失种子活力，此种特性给相关研究带来了极大的不便，因此，建立白木香的再生快繁体系对于种质资源保存和实现其产业应用都具有重要的意义。
2、在之前的研究中，多采用白木香成熟胚作为外植体获得初代无菌苗，进而开展后续研究，但成熟胚只能在每年的6-7月获得，较大的时间局限性不利于工作的开展。相反，通过带芽茎段诱导丛生芽和或通过诱导愈伤组织再分化出不定芽的方式进行再生，则不会有材料难获取的问题存在。植物组织培养是在植物细胞全能性的理论基础上发展起来的一项成熟技术，不受季节时间和空间的限制。该技术可用于苗木的快繁、无病毒苗木的培育、种质资源的离体保存，同时也能为生物技术育种奠定基础。目前，白木香
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的是提供一种白木香组织培养快繁体系的建立方法，本专利技术以白木香实生苗幼嫩茎段作为外植体，通过多轮消毒措施，促使腋芽在无菌环境下萌发，诱导其分化出丛生芽后再对各单芽进行生根诱导，进而获得完整的无菌植株，克服了传统播种繁殖取材受限以及扩繁速度过慢的问题。
2、本专利技术采取的具体技术方案是：
3、一种白木香组织培养快繁体系的建立方法，包括如下步骤：
4、(1)外植体的选择：选择白木香苗当年生枝条顶部的直径2mm以上的绿色带芽茎段作为外植体；
5、(2)外植体的消毒与接种：将外植体截短为长为2cm并带有1-2个腋芽的小段，用水冲洗干净后进行多轮消毒处理，消毒完成晾干至表面无明显水迹，然后茎段芽点朝上接种在腋芽诱导培养基中进行培养；
6、(3)丛生芽的诱导：在腋芽诱导培养基中培养至腋芽长1-2cm，将腋芽从茎上切除获得无菌芽；将无菌芽接种至丛生芽诱导培养基中继续培养；
7、(4)无菌苗的壮苗生根：在丛生芽诱导培养基中培养至丛生芽长至2cm以上后，将其从原始芽上切下，转移至壮苗生根培养基中继续培养至芽的基部开始长出根系。
8、进一步地，所述的消毒处理为：将长为2cm并带有1-2个腋芽的小段转入无菌三角瓶中，先使用75％乙醇浸泡30s，用无菌水清洗2遍，再将外植体用0.1％的升汞消毒8min，无菌水清洗5遍。
9、进一步地，，接种在腋芽诱导培养基培养的培养环境为26±2℃，日光灯光源，光照强度为3000lux，光照时长16h/天。
10、进一步地，，所述腋芽诱导培养基为1/2ms+6-ba 0.2mg/l+naa 0.1mg/l+蔗糖30g/l+agar 7g/l，ph＝5.8。
11、进一步地，，所述无菌芽在丛生芽诱导培养基中培养的培养环境为26±2
12、℃，日光灯光源，光照强度3000lux，光照时长16h/天。
13、进一步地，，所述丛生芽诱导培养基为wpm+6-ba 0.5mg/l+naa 0.2mg/l+蔗糖20g/l+agar 7g/l，ph＝5.8。
14、进一步地，，所述壮苗生根培养基中继续培养的培养环境为26±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，光照时长16h/天。
15、进一步地，，所述生根壮苗培养基为1/2ms+蔗糖30g/l+agar 7g/l，ph＝5.8。
16、本专利技术的有益效果是：
17、1.本专利技术以白木香实生苗幼嫩茎段作为外植体，通过多轮消毒措施，促使腋芽在无菌环境下萌发，诱导其分化出丛生芽后再对各单芽进行生根诱导，进而获得完整的无菌植株，克服了传统播种繁殖取材受限以及扩繁速度过慢的问题。并且本专利技术通过多次试验发现，采用本专利技术的各种培养基配方及培养条件，获得的无菌植株更为优质。
18、2.传统播种繁殖只能在每年的6-7月进行，而采用本专利技术的组培快繁则能在室内实现周年生产。
19、3.传统播种繁殖的繁殖速度较慢，本专利技术的组培快繁能在较短时期内获得大量的后代，且性状稳定。
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1.一种白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述的消毒处理为：将长为2cm并带有1-2个腋芽的小段转入无菌三角瓶中，先使用75％乙醇浸泡30s，用无菌水清洗2遍，再将外植体用0.1％的升汞消毒8min，无菌水清洗5遍。
3.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，接种在腋芽诱导培养基培养的培养环境为26±2℃，日光灯光源，光照强度为3000Lux，光照时长16h/天。
4.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述腋芽诱导培养基为1/2MS+6-BA 0.1-0.3mg/L+NAA 0.1-0.2mg/L+蔗糖20-40g/L+Agar 5-10g/L，pH＝5.5-6。
5.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述无菌芽在丛生芽诱导培养基中培养的培养环境为26±2℃，日光灯光源，光照强度3000Lux，光照时长16h/天。
6.根据权利要求1
7.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述壮苗生根培养基中继续培养的培养环境为26±2℃，日光灯光源，光照强度3000Lux，光照时长16h/天。
8.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述生根壮苗培养基为1/2MS+蔗糖20-40g/L+Agar 5-10g/L，pH＝5.8。
...【技术特征摘要】
1.一种白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述的消毒处理为：将长为2cm并带有1-2个腋芽的小段转入无菌三角瓶中，先使用75％乙醇浸泡30s，用无菌水清洗2遍，再将外植体用0.1％的升汞消毒8min，无菌水清洗5遍。
3.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，接种在腋芽诱导培养基培养的培养环境为26±2℃，日光灯光源，光照强度为3000lux，光照时长16h/天。
4.根据权利要求1所述的白木香组织培养快繁体系的建立方法，其特征在于，所述腋芽诱导培养基为1/2ms+6-ba 0.1-0.3mg/l+naa 0.1-0.2mg/l+蔗糖20-40g/l+agar 5-10g/l，ph＝5.5-6。
5.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱福远，段芳，黄宝兴，陈沫先，李景馨，邓慧杰，付晨晨，宋涛，吴伊雪，赵煜祯，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：
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