【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多糖提取，尤其涉及一种中国被毛孢多糖及其制备方法和应用。
技术介绍
1、冬虫夏草为传统名贵中药材，是冬虫夏草菌和蝙蝠蛾科昆虫幼虫的复合体。研究表明，冬虫夏草中含有多糖、核苷、蛋白质或多肽、甾醇和d-甘露醇等多种生物活性成分，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、降血糖、抗菌、抗疲劳和保肾保肝等多种药理功效。作为冬虫夏草的无性型菌株，中国被毛孢(hirsutella sinensis liu,guo,yu et zeng,sp.nov.)具有抗疲劳、抗肿瘤、抗炎、保肾和抑制肺纤维化等多种药理活性，其发酵产物被广泛用于医药和保健食品，其最具代表性的产品为杭州华东医药股份有限公司生产的“百令胶囊”(中国被毛孢cs-c-q80发酵菌丝体)。2010年，中国被毛孢以冬虫夏草(ophiocordyceps sinensis)的无性型菌株被《中华人民共和国药典》(2010版)收录。
2、糖类化合物是自然界中存在最为广泛的，有着重要生物功能的一类化合物，包括单糖及其衍生物、寡糖、多糖和复合多糖等。真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离得到的一类活性多糖。作为一种天然生物大分子，真菌多糖因其广泛的药理活性和低毒副作用的优点，成为生物学和医学领域中的研究热点。冬虫夏草多糖(cordycepspolysacchride，cp)具有免疫调节、降血糖、抗肿瘤等多种药理功效，是冬虫夏草的主要活性成分之一。但是，中国被毛孢多糖的研究却始终未得到广泛关注。
3、多糖，作为中国被毛孢的主要有效成分之一，具有广泛的药理活
技术实现思路
1、多糖是由多个单糖分子脱水缩合而成的一类结构复杂的糖类物质，结构单位之间以糖苷键相连接，常见的糖苷键有ɑ-1,3糖苷键、β-1,6糖苷键、β-1,4糖苷键、ɑ-1,4糖苷键和β-1,3糖苷键等。多糖广泛存在于动物、植物和微生物中，不同来源的多糖具有不同的生物活性。
2、本专利技术对中国被毛孢中的多糖进行了提取、分离和纯化，得到了一种新中国被毛孢多糖，经测试，该中国被毛孢多糖能够抑制上皮间质转化(emt)作用，在治疗和/或预防原发性胆汁性胆管炎上具有一定的效果。
3、具体地，本专利技术提供了一种中国被毛孢多糖组分hswp-1b，由1,4-linked-α-d-glcp残基和4,6-linked-α-d-manp残基组成甘露葡聚糖，1,4-linked-α-d-glcp的o-6位点上分枝，其侧链为1-linked-α-d-glcp。
4、本专利技术的中国被毛孢多糖组分hswp-1b中除上述结构单元外，还含有以下单糖单元：鼠李糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖。
5、其中，所述多糖的平均分子量为5～15kda；
6、进一步地，所述多糖的平均分子量为7～10kda；
7、更进一步地，所述多糖的平均分子量为8.57kda。
8、本专利技术的中国被毛孢多糖组分hswp-1b红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3424.33cm-1、2920.28cm-1、2854.17cm-1、1636.73cm-1、1405.36cm-1、1033.51cm-1、851.23cm-1、766.36cm-1、628.62cm-1。
9、其中，3424.33cm-1处的特征的强吸收带反映了糖环上o-h键的拉伸振动；2920.28cm-1、2854.17cm-1的峰能反映糖环上c-h和c-h2边界的拉伸振动；1636.73cm-1处的吸收峰代表c＝o边界的拉伸振动；吡喃糖环的拉伸振动峰为1033.51cm-1，851.23cm-1吸收峰表明存在α构型单糖残基。
10、本专利技术提供了一种中国被毛孢多糖组分hswp-1c，由1,2,6-linkedα-d-galp、1,3,4.6-linkedα-d-glcp、4,6-linkedβ-d-manp、1,4-linkedα-d-glcp、1,4,6-linkedα-d-glcp和1-linkedα-d-glcp残基组成的半乳甘露葡聚糖。
11、本专利技术的中国被毛孢多糖组分hswp-1c中除上述结构单元外，还含有以下单糖单元：葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖和半乳糖醛酸。
12、其中，所述hswp-1c的平均分子量为1～10kda；
13、进一步地，所述hswp-1c的平均分子量为2～6kda；
14、进一步地，所述hswp-1c的平均分子量为2.18kda。
15、本专利技术的中国被毛孢多糖组分hswp-1c的红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3432.59cm-1、2926.03cm-1、2845.91cm-1、1639.48cm-1、1599.85、1025.25cm-1、857.23cm-1、620.35cm-1。
16、其中，3432.59cm-1处的特征的强吸收带反映了糖环上o-h键的拉伸振动；2845.91cm-1的峰反映糖环上c-h和c-h2边界的拉伸振动；1639.48cm-1处的吸收峰代表c＝o边界的拉伸振动；吡喃糖环的拉伸振动峰为1025.25cm-1。
17、本专利技术提供一种中国被毛孢多糖组分hswp-1d，由1,4-linked-α-d-glcp残基和4,6-linked-α-d-manp残基组成甘露葡聚糖，1,4-linked-α-d-glcp的o-6位点上分枝，其侧链为1-linked-α-d-glcp。
18、本专利技术的中国被毛孢多糖组分hswp-1d还含有以下单糖单元：甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖。
19、其中，所述hswp-1d的平均分子量为1～10kda；
20、进一步地，所述hswp-1d的平均分子量为1～5kda；
21、进一步地，所述hswp-1d的平均分子量为1.09kda。
22、本专利技术的中国被毛孢多糖组分hswp-1d的红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3421.58cm-1、2923.03cm-1、2851.42cm-1、1639.48cm-1、1405.36cm-1、1025.25cm-1、851.72cm-1、631.37cm-1。
23、其中，3421.58cm-1处的特征的强吸收带反映了糖环上o-h键的拉伸振动；2923.03cm-1、2851.42cm-1的峰反映糖环上c-h和c-h2边界的拉伸振动；1639.48cm-1处的吸收峰代表c＝o边界的拉伸振动；吡喃糖环的拉伸振动峰为1025.25cm-1。
24、本专利技术提供了一种中国被毛孢多糖组分的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：
25、(1)将多糖提取物通过离子交换柱层析分离，得到多糖组分hswp-1；
26、(2)采用梯度醇沉分离纯化得到多糖组分hswp-1a、hswp-1b、h本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种中国被毛孢多糖组分HSWP-1b，其特征在于，由1,4-linked-α-D-Glcp残基和4,6-linked-α-D-Manp残基组成甘露葡聚糖，1,4-linked-α-D-Glcp的O-6位点上分枝，其侧链为1-linked-α-D-Glcp。
2.根据权利要求1所述的多糖组分，其特征在于，多糖中还含有以下单糖单元：鼠李糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖。
3.根据权利要求1所述的多糖组分，其特征在于，所述多糖的平均分子量为5～15kDa；
4.根据权利要求1-3任一所述的多糖，其特征在于，其红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3424.33cm-1、2920.28cm-1、2854.17cm-1、1636.73cm-1、1405.36cm-1、1033.51cm-1、851.23cm-1、766.36cm-1、628.62cm-1。
5.一种中国被毛孢多糖组分HSWP-1c，其特征在于，由1,2,6-linkedα-D-Galp、1,3,4.6-linkedα-D-Glcp、4,6-linkedβ-D-Manp、1,4
6.根据权利要求5所述的多糖组分，其特征在于，HSWP-1c还含有以下单糖单元：半乳糖、鼠李糖和半乳糖醛酸。
7.根据权利要求5所述的多糖组分，其特征在于，所述HSWP-1c的平均分子量为1～10kDa；
8.根据权利要求5～7任意一项所述的多糖组分，其特征在于，其红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3432.59cm-1、2926.03cm-1、2845.91cm-1、1639.48cm-1、1599.85、1025.25cm-1、857.23cm-1、620.35cm-1。
9.一种中国被毛孢多糖组分HSWP-1d，其特征在于，由1,4-linked-α-D-Glcp残基和4,6-linked-α-D-Manp残基组成甘露葡聚糖，1,4-linked-α-D-Glcp的O-6位点上分枝，其侧链为1-linked-α-D-Glcp。
10.根据权利要求9所述的多糖组分，其特征在于，HSWP-1d还含有以下单糖单元：鼠李糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖。
11.根据权利要求9所述的多糖组分，其特征在于，所述HSWP-1d的平均分子量为1～10kDa；
12.根据权利要求9～11任意一项所述的多糖组分，其特征在于，其红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3421.58cm-1、2923.03cm-1、2851.42cm-1、1639.48cm-1、1405.36cm-1、1025.25cm-1、851.72cm-1、631.37cm-1。
13.权利要求1、权利要求5、权利要求4任意一项所述中国被毛孢多糖组分的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：
14.根据权利要求13所述的分离方法，其特征在于，步骤(1)中所用离子交换层析柱为阴离子交换层析柱；进一步选自DEAE纤维素层析柱；
15.权利要求13分离得到的多糖组分在制备治疗和/或预防原发性胆汁性胆管炎产品中的应用；
16.根据权利要求15所述的应用，其特征在于，所述产品为增减细胞活率的产品；进一步地，所述细胞为HIBEC细胞。
...【技术特征摘要】
1.一种中国被毛孢多糖组分hswp-1b，其特征在于，由1,4-linked-α-d-glcp残基和4,6-linked-α-d-manp残基组成甘露葡聚糖，1,4-linked-α-d-glcp的o-6位点上分枝，其侧链为1-linked-α-d-glcp。
2.根据权利要求1所述的多糖组分，其特征在于，多糖中还含有以下单糖单元：鼠李糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖。
3.根据权利要求1所述的多糖组分，其特征在于，所述多糖的平均分子量为5～15kda；
4.根据权利要求1-3任一所述的多糖，其特征在于，其红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3424.33cm-1、2920.28cm-1、2854.17cm-1、1636.73cm-1、1405.36cm-1、1033.51cm-1、851.23cm-1、766.36cm-1、628.62cm-1。
5.一种中国被毛孢多糖组分hswp-1c，其特征在于，由1,2,6-linkedα-d-galp、1,3,4.6-linkedα-d-glcp、4,6-linkedβ-d-manp、1,4-linkedα-d-glcp、1,4,6-linkedα-d-glcp和1-linkedα-d-glcp残基组成的半乳甘露葡聚糖。
6.根据权利要求5所述的多糖组分，其特征在于，hswp-1c还含有以下单糖单元：半乳糖、鼠李糖和半乳糖醛酸。
7.根据权利要求5所述的多糖组分，其特征在于，所述hswp-1c的平均分子量为1～10kda；
8.根据权利要求5～7任意一项所述的多糖组分，其特征在于，其红外光谱至少包括下列吸收峰之一或一种以上：3432.5...
【专利技术属性】
技术研发人员：毕宏涛，杨孟孟，魏立新，戎林，李国强，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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