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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学、种质资源学领域,涉及一种用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合及其检测分子标记的引物对。
技术介绍
1、木姜叶柯(lithocarpus litseifolius(hance)chun)是壳斗科常绿乔木,俗称“甜茶”、“溆浦瑶茶”,主要分布于长江以南各省份,作为日常饮品已有数千年的历史。木姜叶柯因为二氢查尔酮含量高,是天然甜味剂的良好来源。此外,近些年来,人们还发现了木姜叶柯的药用价值,其黄酮类化合物因具有抗氧化、抗过敏和抑菌特性以及降低血压、降低胆固醇和预防糖尿病的能力而被重视。木姜叶柯是一种特色植物资源,具有重要的经济、药用和育种价值。
2、迄今,国内没有标准化的木姜叶柯种质资源圃,木姜叶柯种质资源的鉴定一直以形态性状鉴定为主要依据。然而,木姜叶柯属于高大乔木,有性世代周期长,性状鉴定过程中不仅鉴定周期较长,而且其农艺性状易受环境条件和栽培管理措施的影响。此外,传统的鉴定方法对于一些性状差异较小、亲缘关系较近的种质资源的鉴定十分困难,给木姜叶柯种质资源的鉴定带来了诸多不便。因此,亟需准确的分子标记方法来对木姜叶柯种质资源进行鉴定。
3、分子标记分析方法均以dna的多态性为基础,如rflp、rapd、aflp、issr、ssr、以及snp标记等,它们均能产生具有高度个体特异性的dna指纹图谱。早期rflp、rapd、aflp分子标记技术曾被应用到多个物种的dna指纹图谱建库上,但以上几个标记技术在使用中经常出现稳定性差、多态性低、以及数据整合困难等问题未能被广泛应用
技术实现思路
1、有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合及其检测分子标记的引物对。
2、为达到上述目的,本专利技术提供如下技术方案:
3、1.用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,具体包括以下snp分子标记:
4、第1个snp分子标记306676_61,其核苷酸序列如seq id no.37所示;
5、第2个snp分子标记409640_49,其核苷酸序列如seq id no.38所示;
6、第3个snp分子标记49102_44,其核苷酸序列如seq id no.39所示;
7、第4个snp分子标记221537_45,其核苷酸序列如seq id no.40所示;
8、第5个snp分子标记328712_97,其核苷酸序列如seq id no.41所示;
9、第6个snp分子标记250643_87,其核苷酸序列如seq id no.42所示;
10、第7个snp分子标记15302_129,其核苷酸序列如seq id no.43所示;
11、第8个snp分子标记85497_65,其核苷酸序列如seq id no.44所示;
12、第9个snp分子标记8463_141,其核苷酸序列如seq id no.45所示。
13、进一步用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,还包括以下snp分子标记:
14、第10个snp分子标记185295_75,其核苷酸序列如seq id no.46所示;
15、第11个snp分子标记48830_118,其核苷酸序列如seq id no.47所示;
16、第12个snp分子标记12424_72,其核苷酸序列如seq id no.48所示。
17、2.扩增上述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,根据snp分子标记位点序列进行设计,分别包括2条上游分型引物和1条下游通用引物;其中,
18、针对第1个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.1-3所示;
19、针对第2个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.4-6所示;
20、针对第3个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.7-9所示;
21、针对第4个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.10-12所示;
22、针对第5个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.13-15所示;
23、针对第6个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.16-18所示;
24、针对第7个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.19-21所示;
25、针对第8个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.22-24所示;
26、针对第9个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.25-27所示。
27、进一步所述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,还包括以下引物对:
28、针对第10个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.28-30所示;
29、针对第11个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.31-33所示;
30、针对第12个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.34-36所示。
31、3.一种检测seq id no.37-48所示的snp分子标记组合的引物对组合在构建木姜叶柯dna指纹图谱中的应用。
32、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.1-27所示的pcr扩增引物对组合。
33、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.28-36所示的pcr扩增引物对组合。
34、4.一种检测seq id no.37-48所示的snp分子标记组合的引物对组合在鉴定木姜叶柯种质中的应用。
35、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.1-27所示的pcr扩增引物对组合。
36、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.28-36所示的pcr扩增引物对组合。
37、5.含有seq id no.1-27所示的pcr扩增引物的检测试剂或试剂盒。
38、进一步,含有seq id no.1-36所示的pcr扩增引物的检测试本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.用于构建木姜叶柯DNA指纹图谱的SNP分子标记组合,其特征在于,包括以下SNP分子标记:
2.根据权利要求1所述的用于构建木姜叶柯DNA指纹图谱的SNP分子标记组合,其特征在于,还包括以下SNP分子标记:
3.扩增权利要求1或2所述SNP分子标记组合的PCR扩增引物对组合,其特征在于,根据SNP分子标记位点序列进行设计,分别包括2条上游分型引物和1条下游通用引物;其中,
4.根据权利要求3所述SNP分子标记组合的PCR扩增引物对组合,其特征在于,还包括以下引物对:
5.一种检测权利要求1或权利要求2所述的SNP分子标记组合的引物对组合在构建木姜叶柯DNA指纹图谱中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述引物对组合为权利要求3或权利要求4所述的PCR扩增引物对组合。
7.一种检测权利要求1或权利要求2所述的SNP分子标记组合的引物对组合在鉴定木姜叶柯种质中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述引物对组合为权利要求3或权利要求4所述的PCR扩增引物对组合。
...【技术特征摘要】
1.用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,其特征在于,包括以下snp分子标记:
2.根据权利要求1所述的用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,其特征在于,还包括以下snp分子标记:
3.扩增权利要求1或2所述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,其特征在于,根据snp分子标记位点序列进行设计,分别包括2条上游分型引物和1条下游通用引物;其中,
4.根据权利要求3所述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,其特征在于,还包括以下引物对:
5.一种检测权...
【专利技术属性】
技术研发人员:邱小燕,肖深根,田玉桥,伍贤进,陈阳峰,李自强,向助文,王依清,石兴雨,汪明磊,
申请(专利权)人:湖南农业大学,
类型:发明
国别省市:
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