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用于构建木姜叶柯DNA指纹图谱的SNP分子标记制造技术

技术编号:40344969 阅读:4 留言:0更新日期:2024-02-09 14:31
本发明专利技术涉及一种用于构建木姜叶柯DNA指纹图谱的SNP分子标记组合,其核苷酸序列如SEQ ID NO.37‑SEQ ID NO.48所示。还提供对应的PCR扩增引物对,核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.36所示,利用其中的9对引物对组合就可以构建木姜叶柯的指纹图谱,用来建立木姜叶柯的分子身份证。利用本发明专利技术提供的SNP分子标记组合的PCR扩增引物对组合进行检测与鉴定,检测结果100%准确,检测结果提供了高度的可靠性。这对建立起完整的木姜叶柯种质指纹图谱库从而鉴别种质资源具有重要实践意义和保护意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学、种质资源学领域,涉及一种用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合及其检测分子标记的引物对。


技术介绍

1、木姜叶柯(lithocarpus litseifolius(hance)chun)是壳斗科常绿乔木,俗称“甜茶”、“溆浦瑶茶”,主要分布于长江以南各省份,作为日常饮品已有数千年的历史。木姜叶柯因为二氢查尔酮含量高,是天然甜味剂的良好来源。此外,近些年来,人们还发现了木姜叶柯的药用价值,其黄酮类化合物因具有抗氧化、抗过敏和抑菌特性以及降低血压、降低胆固醇和预防糖尿病的能力而被重视。木姜叶柯是一种特色植物资源,具有重要的经济、药用和育种价值。

2、迄今,国内没有标准化的木姜叶柯种质资源圃,木姜叶柯种质资源的鉴定一直以形态性状鉴定为主要依据。然而,木姜叶柯属于高大乔木,有性世代周期长,性状鉴定过程中不仅鉴定周期较长,而且其农艺性状易受环境条件和栽培管理措施的影响。此外,传统的鉴定方法对于一些性状差异较小、亲缘关系较近的种质资源的鉴定十分困难,给木姜叶柯种质资源的鉴定带来了诸多不便。因此,亟需准确的分子标记方法来对木姜叶柯种质资源进行鉴定。

3、分子标记分析方法均以dna的多态性为基础,如rflp、rapd、aflp、issr、ssr、以及snp标记等,它们均能产生具有高度个体特异性的dna指纹图谱。早期rflp、rapd、aflp分子标记技术曾被应用到多个物种的dna指纹图谱建库上,但以上几个标记技术在使用中经常出现稳定性差、多态性低、以及数据整合困难等问题未能被广泛应用。因此,国际新品种保护联盟建议ssr和snp作为首选的dna指纹标记技术。由于snp标记具有覆盖全基因组、高通量、位点特异、共显性遗传、误检率低、开发和检测成本急剧降低、数据易整合等优点,将成为未来基因型鉴定的主要标记类型。随着测序技术的发展,测序通量呈现指数增长趋势,而测序成本则急剧降低,为全基因组水平snp标记的检测提供了强有力的技术支持。每个物种上存在丰富的snp,如何根据不同鉴定目标,制定snp位点筛选原则、位点数目、位点组合、判定阈值等成为筛选snp构建指纹图谱的关键。


技术实现思路

1、有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合及其检测分子标记的引物对。

2、为达到上述目的,本专利技术提供如下技术方案:

3、1.用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,具体包括以下snp分子标记:

4、第1个snp分子标记306676_61,其核苷酸序列如seq id no.37所示;

5、第2个snp分子标记409640_49,其核苷酸序列如seq id no.38所示;

6、第3个snp分子标记49102_44,其核苷酸序列如seq id no.39所示;

7、第4个snp分子标记221537_45,其核苷酸序列如seq id no.40所示;

8、第5个snp分子标记328712_97,其核苷酸序列如seq id no.41所示;

9、第6个snp分子标记250643_87,其核苷酸序列如seq id no.42所示;

10、第7个snp分子标记15302_129,其核苷酸序列如seq id no.43所示;

11、第8个snp分子标记85497_65,其核苷酸序列如seq id no.44所示;

12、第9个snp分子标记8463_141,其核苷酸序列如seq id no.45所示。

13、进一步用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,还包括以下snp分子标记:

14、第10个snp分子标记185295_75,其核苷酸序列如seq id no.46所示;

15、第11个snp分子标记48830_118,其核苷酸序列如seq id no.47所示;

16、第12个snp分子标记12424_72,其核苷酸序列如seq id no.48所示。

17、2.扩增上述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,根据snp分子标记位点序列进行设计,分别包括2条上游分型引物和1条下游通用引物;其中,

18、针对第1个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.1-3所示;

19、针对第2个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.4-6所示;

20、针对第3个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.7-9所示;

21、针对第4个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.10-12所示;

22、针对第5个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.13-15所示;

23、针对第6个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.16-18所示;

24、针对第7个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.19-21所示;

25、针对第8个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.22-24所示;

26、针对第9个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.25-27所示。

27、进一步所述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,还包括以下引物对:

28、针对第10个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.28-30所示;

29、针对第11个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.31-33所示;

30、针对第12个snp分子标记的pcr扩增引物对核苷酸序列如seq id no.34-36所示。

31、3.一种检测seq id no.37-48所示的snp分子标记组合的引物对组合在构建木姜叶柯dna指纹图谱中的应用。

32、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.1-27所示的pcr扩增引物对组合。

33、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.28-36所示的pcr扩增引物对组合。

34、4.一种检测seq id no.37-48所示的snp分子标记组合的引物对组合在鉴定木姜叶柯种质中的应用。

35、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.1-27所示的pcr扩增引物对组合。

36、进一步所述的应用中,所述引物对组合为seq id no.28-36所示的pcr扩增引物对组合。

37、5.含有seq id no.1-27所示的pcr扩增引物的检测试剂或试剂盒。

38、进一步,含有seq id no.1-36所示的pcr扩增引物的检测试本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于构建木姜叶柯DNA指纹图谱的SNP分子标记组合,其特征在于,包括以下SNP分子标记:

2.根据权利要求1所述的用于构建木姜叶柯DNA指纹图谱的SNP分子标记组合,其特征在于,还包括以下SNP分子标记:

3.扩增权利要求1或2所述SNP分子标记组合的PCR扩增引物对组合,其特征在于,根据SNP分子标记位点序列进行设计,分别包括2条上游分型引物和1条下游通用引物;其中,

4.根据权利要求3所述SNP分子标记组合的PCR扩增引物对组合,其特征在于,还包括以下引物对:

5.一种检测权利要求1或权利要求2所述的SNP分子标记组合的引物对组合在构建木姜叶柯DNA指纹图谱中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述引物对组合为权利要求3或权利要求4所述的PCR扩增引物对组合。

7.一种检测权利要求1或权利要求2所述的SNP分子标记组合的引物对组合在鉴定木姜叶柯种质中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述引物对组合为权利要求3或权利要求4所述的PCR扩增引物对组合。

9.含有权利要求3或权利要求4所述的PCR扩增引物的检测试剂或试剂盒。

...

【技术特征摘要】

1.用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,其特征在于,包括以下snp分子标记:

2.根据权利要求1所述的用于构建木姜叶柯dna指纹图谱的snp分子标记组合,其特征在于,还包括以下snp分子标记:

3.扩增权利要求1或2所述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,其特征在于,根据snp分子标记位点序列进行设计,分别包括2条上游分型引物和1条下游通用引物;其中,

4.根据权利要求3所述snp分子标记组合的pcr扩增引物对组合,其特征在于,还包括以下引物对:

5.一种检测权...

【专利技术属性】
技术研发人员:邱小燕肖深根田玉桥伍贤进陈阳峰李自强向助文王依清石兴雨汪明磊
申请(专利权)人:湖南农业大学
类型:发明
国别省市:

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