【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于临床医学，具体涉及一组血清学生物标志物在克罗恩病临床诊断中的应用。
技术介绍
1、炎症性肠病(inflammatory bowel disease,ibd)是一种病因尚不完全明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病，目前主流观点认为其主要是在具有遗传易感性的个体中，由于环境、饮食、药物、肠道菌群等多种因素的影响导致个体肠道免疫稳态失衡所导致的肠道炎症损伤，包括克罗恩病(crohn’sdisease,cd)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,uc)。cd临床症状主要表现为腹痛、腹泻、腹部包块、肛周瘘管等，病变呈多节段、跳跃式分布，常导致肠梗阻、狭窄、穿孔等，造成严重的肠道致残。由于其病情反复、迁延不愈，中青年发病率逐年增加，临床缺乏灵敏的早期诊断方法以及有效的治疗手段等特点，给个人、家庭及社会带来了沉重的负担，所以又被称为“绿色癌症”。目前，临床对于cd的诊断方法主要为内镜检查及活检组织病理学诊断，创伤性较大，给病人带来较大的痛苦，且费用相对较高，在临床的应用中不甚方便；而影像学检查对于cd的诊断价值较低，且血清及粪便的生物学标志物特异度或灵敏度较低。而早诊断、早治疗，对于cd患者的预后具有较大的益处，因此寻找便捷、有效的血清学生物标志物，在cd临床诊断、治疗及预后管理的过程中具有重要的意义。
2、现有技术中通过检测cd患者外周血crp水平来评估cd患者疾病活动程度。crp是一种非特异性急性炎症的血清学标志物，主要由由肝细胞合成，是机体受到感染和组织损伤时，血浆中能检测出的急性实相反应蛋白，与炎
3、此外，现有技术中还通过检测cd患者外周血中抗微生物相关抗体(如asca，cbir1，ompc)来诊断克罗恩病。抗多糖抗体是一类针对微生物(细菌、真菌)细胞壁多糖类抗原决定簇的抗体，作为cd相关的特异性血清学标志物已经被大部分临床医生认可，其中针对酿酒酵母菌细胞壁甘露聚糖的血清反应性抗体asca是第一个被发现对cd具有高度特异性的血清学标志物。目前临床上检测ibd患者外周血中asca的水平，来评估ibd患者的疾病行为和疾病活动程度。但是，有研究表明这些抗微生物相关抗体对于cd诊断普遍存在灵敏度低、阳性检出率低或特异性低等不足。
4、术语：
5、1、炎症性肠病，英文名为inflammatory bowel disease，缩写为ibd。
6、2、克罗恩病，英文名为crohn’s disease，缩写为cd。
7、3、血浆淀粉样蛋白-2，英文名为serum amyloid a2，缩写为saa2。
8、4、胰岛素样生长因子结合蛋白-2，英文名为insulin like growth factorbinding protein 2，缩写为igfbp2。
9、5、高尔基膜蛋白-1，英文名为golgi membrane protein 1，缩写为golm1。
10、6、二肽基肽酶-4，英文名为dipeptidyl peptidase 4，缩写为dpp4。
11、7、鸟苷酸结合蛋白-1，英文名为guanylate binding protein 1，缩写为gbp1。
12、8、“生物标志物”，在本文中或可写作“标志物”或“血清学标志物”，包括基于dna、rna、蛋白质、碳水化合物或糖脂的分子学标志物，在本文中指血清中的可溶性蛋白质分子标志物，它们的存在可以在受试者的或患者的外周血清样本中通过标准方法(本文中所涉及到的方法)进行检测。
13、9、“样品”是指来源于cd患者或健康受试者的外周血清样本，可以用过公知的技术获得。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一组具有高度灵敏度和特异度的cd血清诊断标志物集合，用于临床对于cd的早期诊断，以指导临床对于cd的治疗过程，并为进一步解释cd的病理生理学发病机制提供新的理论依据。
2、在前期工作中，我们收集了30例cd患者手术切除回肠肠段样本的炎症部位和相对正常部位组织，包括肠道黏膜层(muc)，黏膜下层-肌层-浆膜层(sms)，肠旁脂肪组织(mat)，肠系膜(mes)和肠系膜淋巴结(mln)，以及5例非cd患者(non-cd control，nc)对应的相对正常部位组织(此5位对照组入组患者为早期升结肠肿瘤患者，手术切除升结肠及回肠末端肠段，所取样本备份并进行免疫病理学检查，由两位以上专业病理科医生复核为非肿瘤侵袭的相对正常部位组织)。我们首先对上述样本进行蛋白质组学测序和16s rrna测序分析研究，描绘了cd肠道炎症发生过程中不同组织部位的蛋白质分子谱和细菌谱。随后我们根据差异蛋白质分子在cd患者不同组织部位的相对表达量的变化情况及差异菌种相关基因在cd患者不同组织部位相对表达量的变化情况绘制c-fuzzy图谱，统计学分析方法表明p.c1(protein cluster 1)和m.c1(microbial cluster 1)之间具有较强的相关性。随后我们对p.c1中的蛋白质分子和m.c1中的细菌基因进行相关性分析和功能注释后，鉴定出一系列关键的差异蛋白质分子和关键菌种，在cd肠道炎症发生过程中肠道炎症向肠外组织播散和菌群向肠外组织移位的过程中起到了重要的作用。
3、根据我们在前期工作中的研究结果，我们认为在cd肠道炎症发生的过程中，肠道及其附属器官不同组织内免疫调节的紊乱及物理屏障功能的破坏，可能参与了cd发生时肠道炎症向肠外组织的播散及菌群移位的过程，因此我们推测上述关键蛋白质分子和关键菌种是否能够在cd患者体液样本中具有诊断效能。于是我们收集了30例cd患者及30例健康对照者配对的外周血清及粪便样本，分别进行了血清非靶向蛋白质组学测序以及粪便16srrna测序分析，并与组织蛋白组学和细菌组学的结果进行比较，发现5种上述关键蛋白质分子在cd患者外周血清中存在差异表达的情况，包括saa2、dpp4、golm1、igfbp2和gbp1，且上述关键蛋白质分子和粪便中的关键菌种具有良好的相关性。
4、基于此，本专利技术的第一方面提出了一组血清学生物标志物在克罗恩病临床诊断中的应用，所述血清学生物标志物包括saa2、dpp4、golm1、igfbp2或gbp1蛋白质分子中的至少一种。
5、根据本专利技术所提供的应用，通过检测所述血清学生物标志物在受试者外周血血清中的表达水平，判断受试者是否患有克罗恩病。
6、具体来说，当受试者外周血血清中saa本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.检测蛋白生物标志物SAA2表达水平的试剂在制备克罗恩病临床诊断试剂盒中的应用，其中，所述试剂盒通过检测所述蛋白生物标志物SAA2在受试者外周血血清中的表达水平，判断受试者是否患有克罗恩病。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，当受试者外周血血清中蛋白生物标志物SAA2表达水平升高，指示所述受试者患有克罗恩病。
3.一种用于克罗恩病临床诊断的试剂盒，其特征在于，包括检测受试者外周血血清中蛋白生物标志物SAA2表达水平的试剂。
4.根据权利要求3所述的用于克罗恩病临床诊断的试剂盒，其特征在于，当受试者外周血血清中蛋白生物标志物SAA2表达水平升高，指示所述受试者患有克罗恩病。
5.根据权利要求4所述的用于克罗恩病临床诊断的试剂盒，其特征在于，所述检测受试者外周血血清中蛋白生物标志物SAA2表达水平的试剂包括：基于免疫检测技术检测所述蛋白生物标志物SAA2表达水平的试剂。
6.根据权利要求5所述的用于克罗恩病临床诊断的试剂盒，其特征在于，所述基于免疫检测技术检测所述蛋白生物标志物SAA2表达水平的试剂至少包括与所述蛋
7.一种用于克罗恩病临床诊断的模块，其特征在于，包括诊断指标输入模块和克罗恩病状态评估模块；
8.一种用于筛选治疗克罗恩病的药物的方法，其特征在于，包括：
...【技术特征摘要】
1.检测蛋白生物标志物saa2表达水平的试剂在制备克罗恩病临床诊断试剂盒中的应用，其中，所述试剂盒通过检测所述蛋白生物标志物saa2在受试者外周血血清中的表达水平，判断受试者是否患有克罗恩病。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，当受试者外周血血清中蛋白生物标志物saa2表达水平升高，指示所述受试者患有克罗恩病。
3.一种用于克罗恩病临床诊断的试剂盒，其特征在于，包括检测受试者外周血血清中蛋白生物标志物saa2表达水平的试剂。
4.根据权利要求3所述的用于克罗恩病临床诊断的试剂盒，其特征在于，当受试者外周血血清中蛋白生物标志物saa2表达水平升高，指示所...
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