【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析，尤其涉及一种从生物基质中提取并定量检测环桑色烯含量的方法。
技术介绍
1、环桑色烯是一种异戊二烯基黄酮，分子式为c25h22o6，分子量为418，为微黄色的粉末。环桑色烯广泛存在于多种桑科植物中，是桑科植物的有效活性成分之一。既往的研究显示环桑色烯具有多种生物活性，包括抗肿瘤和抗炎症作用，同时，环桑色烯对于多种酶具有抑制作用，包括胆碱酯酶、磷酸二酯酶和酪氨酸酶。
2、近年来，对于传统药物的研究日益受到关注，中药单体在生物体内的血浆或血清药物浓度的测定显得尤为关键，有助于确定实际发挥作用的药物成分及其药物代谢动力学研究，了解生物体对其吸收、分布、代谢和排泄等情况，同时为量效关系的确定奠定了基础。因此，生物基质中提取和测定环桑色烯是一项十分有价值的技术。但目前现有技术中环桑色烯等异戊二烯类黄酮的测定通常依赖于紫外光谱、液相色谱进行定性检测，鲜少有环桑色烯的定量检测。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种从生物基质中提取并定量检测环桑色烯含量的方法，本专利技术提供的方法能够实现环桑色烯的定量检测，准确性以及灵敏度高，且操作简单。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种从生物基质中提取并定量检测环桑色烯含量的方法，包括以下步骤：
4、将待测生物样本、内标物溶液与沉淀剂混合，进行沉淀预处理，得到待测液；
5、将所述待测液进行超高效液相色谱-三重四级杆质谱
6、根据环桑色烯的基质工作曲线与待测液的色谱图，得到待测生物样本中环桑色烯的含量；
7、所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱的超高效液相色谱条件包括：
8、流动相：流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为体积分数为0.1％的甲酸水溶液，流动相b为乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，流动相b的体积分数从55％上升到95％；0.5～2min，流动相b的体积分数保持95％；2.0～2.1min，流动相b的体积分数从95％下降到55％，2.1～3.5min，流动相b的体积分数保持55％。
9、优选地，所述待测生物样本包括血清或血浆。
10、优选地，所述内标物溶液中内标物为石吊兰素；所述内标物溶液的溶剂为甲醇。
11、优选地，所述沉淀剂为乙腈。
12、优选地，所述内标物溶液的浓度为1～5μg/ml；所述待测生物样本、内标物溶液与沉淀剂的体积比为1：0.1：10。
13、优选地，所述超高效液相色谱条件还包括：流动相流速为0.5～1ml/min。
14、优选地，所述超高效液相色谱条件还包括：色谱柱为zorbax eclipse plus c18rrhd色谱柱。
15、优选地，所述超高效液相色谱条件还包括：柱温为20～40℃；进样量为1～3μl。
16、优选地，所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱的质谱条件包括：
17、离子源为电喷雾离子源，采集模式为正离子模式，扫描模式为多反应监测模式；干燥气流速为10l/h，干燥气温度为350℃；雾化气压力为45psi。
18、优选地，所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱的质谱条件还包括：
19、所述环桑色烯的定量离子对为m/z 419.1→362.8，碰撞能量为16ev；
20、当所述内标物溶液中内标物为石吊兰素时，所述石吊兰素的定量离子对为m/z345.1→315.1，碰撞能量为28ev。
21、本专利技术提供了一种从生物基质中提取并定量检测环桑色烯含量的方法，包括以下步骤：将待测生物样本、内标物溶液与沉淀剂混合，进行沉淀预处理，得到待测液；将所述待测液进行超高效液相色谱-三重四级杆质谱分析，得到待测液的色谱图；根据环桑色烯的基质工作曲线与待测液的色谱图，得到待测生物样本中环桑色烯的含量；所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱的超高效液相色谱条件包括：流动相：流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为体积分数为0.1％的甲酸水溶液，流动相b为乙腈；梯度洗脱程序：0～0.5min，流动相b的体积分数从55％上升到95％；0.5～2min，流动相b的体积分数保持95％；2.0～2.1min，流动相b的体积分数从95％下降到55％，2.1～3.5min，流动相b的体积分数保持55％。本专利技术基于沉淀法与液质联用，能够实现生物样本中环桑色烯的快速、准确和稳定检测。具体的，本专利技术通过沉淀法使生物样本中蛋白质沉淀，之后再经超高效液相色谱-三重四级杆质谱分析，结合内标法定量，操作简单，处理效率高，准确性以及灵敏度高，定量范围广，可用于检测生物体内的环桑色烯浓度，能够为环桑色烯的进一步研究提供可行且可靠的检测方法。
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1.一种从生物基质中提取并定量检测环桑色烯含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测生物样本包括血清或血浆。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述内标物溶液中内标物为石吊兰素；所述内标物溶液的溶剂为甲醇。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述沉淀剂为乙腈。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述内标物溶液的浓度为1～5μg/mL；所述待测生物样本、内标物溶液与沉淀剂的体积比为1：0.1：10。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件还包括：流动相流速为0.5～1mL/min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件还包括：色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件还包括：柱温为20～40℃；进样量为1～3μL。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高
10.根据权利要求1或9所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱的质谱条件还包括：
...【技术特征摘要】
1.一种从生物基质中提取并定量检测环桑色烯含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测生物样本包括血清或血浆。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述内标物溶液中内标物为石吊兰素；所述内标物溶液的溶剂为甲醇。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述沉淀剂为乙腈。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述内标物溶液的浓度为1～5μg/ml；所述待测生物样本、内标物溶液与沉淀剂的体积比为1：0.1：10。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶炜剑，孙佳，牛超，王琳琳，李乐乐，
申请(专利权)人：温州医科大学附属第二医院温州医科大学附属育英儿童医院，
类型：发明
国别省市：
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