【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种利用转运工程策略改造酿酒酵母工程菌提高麦角硫因产量的方法，属于生物工程。
技术介绍
1、麦角硫因(l-ergothioneine，egt)，学名2-巯基-l-组氨酸三甲基内盐，是1909年tanret等人在研究麦角真菌clavicepspurpurea时分离出的一种独特含硫化合物，是一种稀有的天然氨基酸衍生物。在生理ph条件下，麦角硫因主要以硫酮的形式存在，因其具有较高的氧化还原电势，不易发生自身氧化，所以具有比其他硫醇类抗氧化剂(如谷胱甘肽)更高的稳定性和更强的抗氧化活性。麦角硫因具有清除自由基、维持细胞正常生长、维持dma生物合成、防止紫外线辐射引起的损伤、美白、抗衰老、抗炎等诸多功能，在抗氧化和调节能量方面发挥着重要作用，是一种多功能的细胞生理保护剂。麦角硫因独特的生理功能及理化性质，决定了它在化妆品、食品、生物医学等领域具有广阔的应用前景。
2、目前，国内外获取麦角硫因的方法主要有三种，分别是提取法、化学合成法、微生物发酵法。其中，从食用菌中提取麦角硫因存在耗时、提取效率低、杂质多等问题，从而限制了...
【技术保护点】
1.过表达外排转运蛋白编码基因在提高麦角硫因发酵生产中的应用，其特征在于，将下述基因或蛋白序列相似度高的外排转运蛋白在其他生物体中的表达用于麦角硫因的生产；
2.一种过表达关键基因强化麦角硫因外排转运提高麦角硫因发酵产量的方法，其特征在于，通过基因工程技术将目的基因MRH1、PHM7、HNM1、TPO5或SCW10分别导入产麦角硫因的酿酒酵母工程菌中，构建酿酒酵母工程菌株M02-MRH1、M02-PHM7、M02-HNM1、M02-TPO5或M02-SCW10。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，运用LiAc/ssDNA/PEG高效转化...
【技术特征摘要】
1.过表达外排转运蛋白编码基因在提高麦角硫因发酵生产中的应用，其特征在于，将下述基因或蛋白序列相似度高的外排转运蛋白在其他生物体中的表达用于麦角硫因的生产；
2.一种过表达关键基因强化麦角硫因外排转运提高麦角硫因发酵产量的方法，其特征在于，通过基因工程技术将目的基因mrh1、phm7、hnm1、tpo5或scw10分别导入产麦角硫因的酿酒酵母工程菌中，构建酿酒酵母工程菌株m02-mrh1、m02-phm7、m02-hnm1、m02-tpo5或m02-scw10。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，运用liac/ssdna/peg高效转化或电转化将过表达基因mrh1/phm7/hnm1/tpo5/scw10的重组载体导入酿酒酵母中，构建酿酒酵母工程菌。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，构建流程如下：将目的基因mrh1/phm7/hnm1/tpo5/scw10与线性化载体pyes2-ura3-egt1-egt2连接，得到重组载体pyes2-ura3-egt1-egt2-mrh1/phm7/hnm1/tpo5/scw10；用所述重组载体转化产麦角硫因的酿酒酵母，通过sc-ura固体培养筛选，获得含重组载体pyes2-ura3-egt1-egt2-mrh1/phm7/hnm1/tpo5/scw10的酿酒酵母工程菌株。
<...【专利技术属性】
技术研发人员：王亮，程婧妍，郭越，陈喜媚，李倩，聂钒宇，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：
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