鉴定病毒感染和疫苗接种的生物制造技术

本发明专利技术提供涉及评估生物中是否存在抗－病毒抗体的方法与材料。例如，此文件提供用于测定某生物（例如，猪类成员，如猪）是否含有抗－ＰＲＲＳ病毒抗体的方法与材料。在其它实施方案中，本发明专利技术提供用于测定某具体生物是否接种过某病毒的疫苗形式，受该病毒的天然产生形式感染，还是对该病毒是原初状态的方法与材料。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及参与鉴定病毒感染或疫苗接种的生物(例如，脊椎动物和哺乳动物)的方法与材料。例如，本专利技术涉及鉴定具有抗病毒(例如，猪生殖与呼吸综合征(PRRS)病毒)抗体的哺乳动物(例如，猪)的方法与材料。 2.背景信息 感染某病毒的生物可引发对该感染性病毒的免疫应答。这种免疫应答包括产生能与该病毒结合的抗体。存在抗病毒的抗体可表明该生物接触过该病毒。例如，感染了PRRS病毒的猪可含有能与PRRS病毒结合的猪抗体。 PRRS是一种猪的病毒疾病，其特征在于导致母猪生殖障碍(例如，母猪晚期(late-term)流产和死胎)和仔猪呼吸困难(例如，幼猪间质性肺炎)(Collins等，J.Vet.Diagn.Invest.，4117-126，(1992)和Wensvoort等，Vet Q.，13121-130，(1991))。此病毒于1987年在北美(Keffaber，Am.Assoc.Swine Pract.Newsl.，11-9，(1989)和Hill，“神秘猪疾病的综述和历史(猪不育症与呼吸综合征)”(Overview and History of Mystery Swine Disease(Swine Infertility and Respiratorysyndrome))，刊于《神秘猪疾病委员会纪要》(Proceedings of the Mystery SwineDisease Committee Meeting)，10月6日，Denver CO，第29-30页，LivestockConservation Institute，Madison，WI，(1990))与1990年在欧洲(Paton等，VetRec.，128617，(1991))检测到。致病因子是主要在受感染猪的肺泡巨噬细胞和血液中回收到的小被膜正义链RNA病毒。它是动脉炎病毒科的成员，该病毒科包括马动脉炎病毒(EAV；den Boon等，J.Virol.，652910-2920，(1991))、致小鼠乳酸脱氢酶升高病毒(lactate dehydrogenase elevating virus)(LDV；Plagemann和Moennig，Adv.Vir.Res.，4199-192，(1992))和猿出血热病毒(SHFV；Godeny等，刊于《第九届国际病毒学大会纪要》(In Proceedings of the9th International Congress of Virology)，第22页，8月8-13日，格拉斯哥，苏格兰，(1993)和Plagemann，刊于《Fields病毒学》(Fields Virology)，第三版，第1105-1120页，B.N.Fields，D.M.Knipe和P.M.Howley编，PhiladelphiaLippincott-Raven，(1996))，Order Nidovirales(Cavanagh，Arch.Virol.，142629-633，(1997))。与其它动脉炎病毒相似，PRRS病毒主要感染巨噬细胞并造成许多组织的定居巨噬细胞(resident macrophages)持久感染(Lawson等，VirusRes.，51105-113(1997)和Christopher-Hennings等，J.Vet.Diag.Invest.，7456-464，(1995))。 概述 本专利技术包括涉及评估生物来测定这些生物是否接触过病毒疫苗或受病毒感染的方法与材料。例如，本专利技术提供可用于测定某生物(例如，猪类成员，如猪)是否含有抗-PRRS病毒抗体。例如，测定猪是否含有抗-PPRS病毒的抗体可使养猪场主能鉴定可能受到PRRS病毒感染的猪。这使得场主能将怀疑受PRRS病毒感染的与确信未受感染的猪隔离。鉴定不含抗-PRRS病毒抗体的猪可使养猪场主只给先前未感染的猪群，而不是对整个畜群(可能包括许多先前曾受感染的猪)接种疫苗。 在一个实施方案中，本专利技术提供可用于测定接种了病毒的疫苗形式的某具体生物是受该病毒的天然产生形式感染还是对该病毒是原初状态的方法与材料。就人和农夫而言，区分接种疫苗的生物和受病毒的天然产生形式感染的生物使临床兽医能确定各生物抗该病毒免疫力的免疫学来源。例如，接收猪群的农夫可确定接种PRRS病毒疫苗的猪群是否受该病毒的天然产生形式(例如，PRRS病毒的野生分离物(field isolate))感染或对该病毒是原初状态。利用此信息，农夫可确定畜群是否无需接种疫苗，或者任何未受感染的猪是否处于受，例如受病毒的天然产生形式感染的危险中。 总体上，本专利技术的特征在于一种检测猪抗-PRRS病毒抗体的试剂盒。此试剂盒装有(a)一种多肽，该多肽含有选自NSP 2多肽和ORF 5多肽的PRRS病毒多肽中的氨基酸序列，其中该多肽含有猪抗-PRRS病毒抗体的表位；和(b)抗-猪Ig抗体。该多肽至少长8个氨基酸残基。该多肽可含有至少长100个氨基酸的氨基酸序列，该序列的全长与SEQ ID NO5所示核酸序列所编码的氨基酸序列至少约80％相同。该多肽可含有至少长100个氨基酸的氨基酸序列，该序列的全长与SEQ ID NO5所示核酸序列所编码的氨基酸序列至少约90％相同。该多肽可含有至少长20个氨基酸的氨基酸序列，该序列的全长与SEQ IDNO22所示序列至少约80％相同。该多肽可含有至少长20个氨基酸的氨基酸序列，该序列在整个长度上与SEQ ID NO22所示序列至少约90％相同。该多肽可含有SEQ ID NO11所示核酸序列所编码的氨基酸序列。该多肽可含有SEQ ID NO32所示的氨基酸序列。该多肽可含有SEQ ID NO16、19、22、26、29、32、39、45、61或64所示的氨基酸序列。该多肽可以是用未受PRRS病毒感染的细胞产生的重组多肽。所述抗-猪Ig抗体可以是抗-猪IgG或IgM抗体。抗-猪Ig抗体可以是山羊抗-猪Ig抗体。此试剂盒可装有包含存在于PRRS病毒NSP 2多肽中的氨基酸序列的多肽与包含存在于PRRS病毒ORF 5多肽中的氨基酸序列的多肽。此试剂盒可装有包含存在于PRRS病毒ORF 7多肽中的氨基酸序列的多肽(例如，含有SEQ ID NO36或54所示氨基酸序列的多肽)。此试剂盒可装有包含存在于PRRS病毒ORF 6多肽中的氨基酸序列的多肽(例如，含有SEQ ID NO32、48、51或67所示氨基酸序列的多肽)。抗-猪Ig抗体可包含某种酶(标记)。此试剂盒可装有包含存在于PRRS病毒NSP 1多肽中的氨基酸序列的多肽。此试剂盒可装有包含猪抗-PRRS病毒抗体的对照样品。此试剂盒可装有包含缺乏猪抗-PRRS病毒抗体的猪血清对照样品。 在另一实施方案中，本专利技术的特征在于测定样品是否含有猪抗-PRRS病毒抗体的方法。该方法包括(a)在某多肽能与样品中的抗体(如果存在)形成多肽猪抗-PRRS病毒抗体复合物的条件下使该多肽与样品接触，其中该多肽含有存在于选自NSP 2多肽和ORF 5多肽的PRRS病毒多肽中的氨基酸序列，其中该多肽含有猪抗-PRRS病毒抗体的表位；和(b)检测是否存在该复合物，其中存在此复合物表明该样品含有猪抗-PRRS病毒抗体。样品可以是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测猪抗－ＰＲＲＳ病毒抗体的试剂盒，所述试剂盒装有：　　　　（ａ）包含存在于选自ＮＳＰ２多肽和ＯＲＦ５多肽的ＰＲＲＳ病毒多肽中的氨基酸序列的多肽，其中所述多肽含有所述猪抗－ＰＲＲＳ病毒抗体的表位；和　　　　（ｂ）抗－猪Ｉｇ抗体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：CR约翰逊，MP穆尔塔赫，
申请(专利权)人：明尼苏达大学董事会，
类型：发明
国别省市：US[美国]