【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水蛭提取液制备，尤其涉及一种天然水蛭提取物的制备方法。
技术介绍
1、水蛭又称蚂蟥，具有良好的活血化瘀作用，我国现存最早的中药专著《神农本草经》中就记载有：“水蛭，味咸平，主逐恶血、瘀血、月闭、破癥瘕积聚、无子、利水道”。现代医学也表明水蛭是世界上天然物质中抗凝血最强、最安全、最有效的。
2、菲牛蛭(poecilobdella manillensis lesson)俗称金边蚂蟥，隶属于环节动物门、蛭纲、无吻蛭目、医蛭科、牛蛭属。在吸血类水蛭中，菲牛蛭是一个体型较大的种类，在我国主要分布于我国华南的广西、广东、福建、海南和香港等地低于海拔500m的广大地区。通常生活在稻田、水沟、江河或池塘里，主要以吸吮人和脊椎动物(如牛、青蛙等)的血液为生。
3、近一个世纪以来，各国学者对吸血水蛭的唾液腺分泌物进行广泛而又深入研究。现代医学科学和药理学研究表明，吸血水蛭在吸吮血液过程中能够分泌大量的唾液，其唾液中含有许多生物活性成分，主要包括：(1)含有直接作用于凝血系统的成分，如水蛭素等。(2)含有类似于吗啡类的生物镇痛及消炎成分。(3)含有抑制各种细菌生长的抗生素物质(如金黄色葡萄球菌等)。(4)含有能促使伤口愈合并减少疤痕形成的成分，如水蛭透明质酸酶类物质等。各国科学家还在吸血水蛭唾液腺分泌物中发现了许多与吸食哺乳动物血液相关联的生物活性物质，如麻醉剂(anaesthetic)、血管扩张剂(vasodilator)、裂纤酶(hementin)、前列腺素(prostaglandins)以及安替斯塔辛(an
4、水蛭中包含抗凝血酶、抗凝多肽、纤维蛋白溶解酶、透明质酸酶、血管扩张剂、抗血小板等多种活性物质。现有技术在提取水蛭提取液时通常会采用烘干、粉碎等方法将水蛭处死后通过浸提提取水蛭提取物，但由于水蛭提取物提取过程复杂，在制备水蛭提取液是需要大规模采杀水蛭，容易造成资源的浪费。因此，亟需一种在不处死水蛭的同时还能有效分离水蛭提取物的分离方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种天然水蛭提取物的制备方法，采用活体水蛭进行提取，避免水蛭大规模采杀，使水蛭能重复利用。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种天然水蛭提取物的制备方法，包括如下步骤：
4、1)将水蛭静养后低温冷冻，收集水蛭分泌出液体，得到初级水蛭提取液，将冷冻后的水蛭置于室温自然化冻；
5、2)将初级水蛭提取液超滤纯化，得到天然水蛭提取物。
6、进一步的，所述天然水蛭提取物的分子量在3～50kd之间。
7、进一步的，步骤1)所述静养的时间为2～3个月。
8、进一步的，步骤1)所述低温冷冻的温度为-20～-25℃，冷冻时间为1～3h。
9、进一步的，步骤2)所述超滤纯化的实验室操作方法为：3kd，5000×g离心10分钟后继续50kd，5000×g离心10分钟。
10、进一步的，步骤2)所述超滤纯化的工业化生产方法为：将提取到的所有初级水蛭提取液合并，通过进样管道进入截留分子量为50kd的中空纤维膜组件，收集分子量小于50kd的组份；再经进样管道进入截留分子量为3kd的中空纤维膜组件，分子量大于3kd的组分回流到进样端，经过两步超滤，收集分子量在3～50kd的组分，得到水蛭提取液。
11、进一步的，步骤2)所述超滤纯化的最高系统压力不得超过0.12mpa，长期工作压力≤0.1mpa；进液温度≤45℃，长期工作温度为10～40℃。
12、本专利技术采用活体低温处理的方法，使水蛭分泌出体内的唾液，避免水蛭大规模的采杀，使水蛭可重复使用。静养、低温诱导又可以减少大量血液等杂蛋白混入，有利于下一步针对初级提取液中的蛭提取物进行分离纯化提取，确保水蛭提取物的纯净度。
13、本专利技术采用超滤的方法进行除杂浓缩，不仅能够快速除去杂蛋白又能有效的收集水蛭素等活性物质，同时采用此法进行浓缩，能有效截留大多数细菌等微生物，极大地减轻了杀菌除菌的负担，提高了产品质量，且处理过程无变相，对物料中组成成分无任何不良影响，且分离、纯化、浓缩过程中始终处于常温状态，有效的保护了原料中的生物活性物质及营养成分。
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1.一种天然水蛭提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述天然水蛭提取物的分子量在3～50kD之间。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤1)所述静养的时间为2～3个月。
4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，步骤1)所述低温冷冻的温度为-20～-25℃，冷冻时间为1～3h。
5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，步骤2)所述超滤纯化的实验室操作方法为：3KD的超滤离心管，5000×g离心10分钟后，液体转到50KD超滤离心管中，5000×g离心10分钟。
6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤2)所述超滤纯化的工业化生产方法为：将提取到的所有初级水蛭提取液合并，通过进样管道进入截留分子量为50kD的中空纤维膜组件，收集分子量小于50kD的组份；再经进样管道进入截留分子量为3kD的中空纤维膜组件，分子量大于3kD的组分回流到进样端，经过两步超滤，收集分子量在3～50kD的组分，得到水蛭提取液。
7.根据权利要求6所述制备方法
...【技术特征摘要】
1.一种天然水蛭提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述天然水蛭提取物的分子量在3～50kd之间。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤1)所述静养的时间为2～3个月。
4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，步骤1)所述低温冷冻的温度为-20～-25℃，冷冻时间为1～3h。
5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，步骤2)所述超滤纯化的实验室操作方法为：3kd的超滤离心管，5000×g离心10分钟后，液体转到50kd超滤离心管中，5000×g...
【专利技术属性】
技术研发人员：马兰，
申请(专利权)人：广西优蛭生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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