【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及一种通过抑制鸡盲肌样蛋白1（mbnl1）基因表达的反义寡核苷酸（aso）及其应用。
技术介绍
1、盲肌样蛋白（muscleblind-like protein，mbnl）家族是一类rna结合蛋白，主要功能是参与前体mrna的选择性剪接，另有研究表明，mbnl还与mrna的运输、稳定性以及microrna的产生过程相关。mbnl1是mbnl蛋白家族研究最为广泛和深入的分子，在组织中广泛表达，在骨骼肌和成肌细胞分化过程中高度表达。人类已有的一些研究，探讨了mbnl1在强直性肌营养不良、血管平滑肌细胞表型转换以及乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌等恶性肿瘤中的作用。但在鸡上，对mbnl1的研究还比较少。
2、在组织中广泛表达的mbnl1有许多转录本异构体，不同异构体的表达具有组织特异性。研究表明，mbnl1 mrna在鸡不同部位肌肉中的表达与其肌纤维类型组成密切相关，mbnl1 mrna在胸大肌、髂胫外侧肌等快肌中表达较高，在缝匠肌、腓肠肌内侧头、前背阔肌等慢肌中表达较低；鸡mbnl1蛋白主要表达于细胞核。
3、反义寡核苷酸（aso）是一种短的、化学合成的单链寡核苷酸，通过对其骨架和糖基进行修饰，可增加其稳定性、药理特性以及与靶标的结合，并通常具有较小的毒性，常用于细胞和动物体内基因功能研究以及aso核酸药物的开发等。研究表明，aso的活性与rnase h水平有关，细胞核中rnase h水平较高，核内靶标mrnas的降解率要高于胞质，往往比主要在胞浆起作用的sirna更适用于沉默细胞核定位的r
技术实现思路
1、为了揭示鸡骨骼肌生长发育和肌纤维类型形成的调控机制，本专利技术提供了一种靶向鸡mbnl1基因的反义寡核苷酸及其应用。
2、第一方面，本专利技术提供了一种靶向鸡mbnl1基因的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸的序列为5’-cggutatgtaggaaauuggc-3’（seq no.1）。
3、进一步地，所述反义寡核苷酸的序列全链硫代修饰，并在首尾两端5个碱基的核糖引入2’甲氧基修饰。
4、第二方面，本专利技术提供了一种含有编码上述的靶向鸡mbnl1基因的反义寡核苷酸的序列的重组表达载体、转基因细胞系或重组病毒。
5、第三方面，本专利技术提供了一种上述的靶向鸡mbnl1基因的反义寡核苷酸的试剂盒。
6、进一步地，所述试剂盒还包括用于检测鸡mbnl1基因表达的引物组。
7、第四方面，本专利技术提供了第一方面所述的反义寡核苷酸，第二方面所述的重组表达载体、转基因细胞系或重组病毒，第三方面所述的试剂盒，在鉴定鸡mbnl1基因功能中的应用。
8、通过上述技术方案，本专利技术实现了以下有益效果：
9、本专利技术提供了一种能够靶向鸡mbnl1基因的aso，将其转入原代鸡成肌细胞后可以有效降低鸡mbnl1基因的表达，抑制效率达到50%以上，可见其敲降效率很高。本专利技术的aso通过特异性敲降鸡mbnl1基因的表达来鉴定基因功能，可应用于优质鸡的遗传育种以及为人类疾病研究提供参考数据，具有很大的经济价值和科研价值。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种靶向鸡MBNL1基因的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸的序列为5’-CGGUTATGTAGGAAAUUGGC-3’（SEQ NO.1）。
2.根据权利要求1所述的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸的序列全链硫代修饰，并在首尾两端5个碱基的核糖引入2’甲氧基修饰。
3.含有编码权利要求1或2所述的靶向鸡MBNL1基因的反义寡核苷酸的序列的重组表达载体、转基因细胞系或重组病毒。
4.含有权利要求1或2所述的靶向鸡MBNL1基因的反义寡核苷酸的试剂盒。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于检测鸡MBNL1基因表达的引物组。
6.权利要求1或2所述的反义寡核苷酸，权利要求3所述的重组表达载体、转基因细胞系或重组病毒，权利要求4或5所述的试剂盒，在鉴定鸡MBNL1基因功能中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种靶向鸡mbnl1基因的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸的序列为5’-cggutatgtaggaaauuggc-3’（seq no.1）。
2.根据权利要求1所述的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸的序列全链硫代修饰，并在首尾两端5个碱基的核糖引入2’甲氧基修饰。
3.含有编码权利要求1或2所述的靶向鸡mbnl1基因的反义寡核苷酸的序列的重组表达载...
【专利技术属性】
技术研发人员：束婧婷，单艳菊，姬改革，章明，巨晓军，屠云洁，刘一帆，盛中伟，邹剑敏，张海涛，韦涛，许盛海，
申请(专利权)人：江苏省家禽科学研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。