【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学领域，涉及一种抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4(ctla-4)单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4(ctla-4或cd152)是免疫球蛋白相关受体家族的成员之一，主要表达于活化的t淋巴细胞上，是t细胞免疫应答中的负调节因子之一，对维持机体的免疫平衡具有重要作用。ctla-4的表达和功能与t细胞的激活具有内在联系。cd28/b7通路为t细胞的激活提供正向刺激信号，但ctla-4的竞争性抑制有效减弱了t细胞活化。与pd-1、pd-l1抗体抑制剂直接阻断肿瘤pd-1信号通路的免疫抑制机制不同，ctla-4抗体抑制剂发挥的是免疫增强作用，主要通过提高机体免疫细胞的杀伤作用，来达到免疫增强的效果。在人类癌症研究中已利用杂交瘤技术成功制备出ctla-4单克隆抗体用于治疗实体瘤。ctla-4抗体与治疗性疫苗结合使用在癌症、病毒和慢性感染治疗等方面具有巨大潜力。walsh等发现在小鼠曼氏血吸虫感染期间ctla-4显著扩增，这有助于它逃避宿主的免疫攻击。tang在建立日本血吸虫病感染小鼠模型的研究中发现，抗ctla-4抗体可以作为佐剂，通过诱导th1型免疫反应来增强gapdh疫苗的免疫保护。lina liu在三阴性乳腺癌的体内研究中发现，抗ctla-4抗体与mrna疫苗联合使用与单独使用抗体或疫苗相比，可显著增强机体的抗肿瘤免疫应答能力。这些结果表明，抗ctla-4单抗可作为一种有效的佐剂，以增强疫苗的免疫保护效果。
2、目前一些禽类病原是通过抑制淋巴器官或淋巴细胞的功能来降低机体的免
技术实现思路
1、为了解决现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种抗鸡ctla-4单克隆抗体及其应用。
2、本专利技术的具体技术方案如下：
3、本专利技术第一方面提供保藏编号为cctcc no:c2022207的抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4单克隆抗体杂交瘤细胞株ctla-4-3d7，该杂交瘤细胞株的分类命名为杂交瘤细胞株ctla-4-3d7，于2022年6月29日保藏于中国典型培养物保藏中心。
4、本专利技术第二方面提供一种抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体，由保藏编号为cctcc no:c2022207的杂交瘤细胞株ctla-4-3d7产生。
5、本专利技术第三方面提供所述的单克隆抗体在制备如下(1)-(9)任一所示的产品中的应用：
6、(1)抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的产品；
7、(2)解除鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4对t淋巴细胞活化的抑制的产品；
8、(3)解除鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4对机体免疫的抑制的产品；
9、(4)激活鸡t淋巴细胞的产品；
10、(5)提高鸡机体免疫水平的产品；
11、(6)检测鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的产品；
12、(7)特异性结合鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的产品；
13、(8)预防和/或治疗鸡病毒性免疫抑制疾病的产品；
14、(9)增强鸡病毒性免疫抑制疾病疫苗的免疫效果的辅助产品。
15、上述应用中，所述疾病包括鸡马立克病、鸡传染性贫血、鸡传染性法氏囊病、禽腺病毒病、禽流感和鸡新城疫。
16、上述应用中，所述疾病为鸡新城疫时，所述疫苗优选为鸡新城疫lasota疫苗株。
17、本专利技术第四方面提供一种疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物包含针对鸡病毒性免疫抑制疾病的疫苗和所述的单克隆抗体。
18、上述组合物中，所述疾病包括鸡马立克病、鸡传染性贫血、鸡传染性法氏囊病、禽腺病毒病、禽流感和鸡新城疫。
19、上述组合物中，所述疾病为鸡新城疫时，所述疫苗优选为鸡新城疫lasota疫苗株。
20、进一步地，所述疫苗组合物的应用方法为：对鸡同时进行疫苗免疫和单克隆抗体注射，之后注射单克隆抗体加强免疫一次。
21、进一步地，所述单克隆抗体的注射剂量为1mg/kg。
22、本专利技术的有益效果为：
23、1.本专利技术提供一种抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体，由保藏编号为cctcc no:c2022207的杂交瘤细胞株ctla-4-3d7产生。该单抗能够特异性地识别pcaggs-ctla-4-flag真核表达系统和bac-to-bac系统中表达的ctla-4蛋白。通过fcm和ifa分析，该单抗与鸡的pbmc有较好的结合活性，与cd3+t淋巴细胞的结合率约为16％，远高于杂交瘤细胞株ctla-4-5a4和ctla-4-6a12产生单抗与cd3+t淋巴细胞的结合率，取得了预料不到的技术效果。
24、2.本专利技术抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体通过干扰ctla-4负调节t淋巴细胞活化过程，从而增强机体抗病毒作用和提高疫苗的免疫效果，可用于制备解除鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4对t淋巴细胞活化的抑制的产品、解除鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4对机体免疫的抑制的产品、激活鸡t淋巴细胞的产品、提高鸡机体免疫水平的产品、预防和/或治疗鸡病毒性免疫抑制疾病的产品以及增强鸡病毒性免疫抑制疾病疫苗的免疫效果的辅助产品。
25、3.本专利技术抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体与新城疫lasota疫苗株联合免疫，可显著提高新城疫lasota疫苗株的免疫效果。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.保藏编号为CCTCC NO:C2022207的抗鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4单克隆抗体杂交瘤细胞株CTLA-4-3D7。
2.一种抗鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体，由保藏编号为CCTCC NO:C2022207的杂交瘤细胞株CTLA-4-3D7产生。
3.权利要求2所述的单克隆抗体在制备如下(1)-(9)任一所示的产品中的应用：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述疾病包括鸡马立克病、鸡传染性贫血、鸡传染性法氏囊病、禽腺病毒病、禽流感和鸡新城疫。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述疾病为鸡新城疫时，所述疫苗为鸡新城疫LaSota疫苗株。
6.一种疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物包含针对鸡病毒性免疫抑制疾病的疫苗和权利要求2所述的单克隆抗体。
7.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疾病包括鸡马立克病、鸡传染性贫血、鸡传染性法氏囊病、禽腺病毒病、禽流感和鸡新城疫。
8.根据权利要求7所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疾病为鸡新城疫时，所述疫苗
9.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物的应用方法为：对鸡同时进行疫苗免疫和单克隆抗体注射，之后注射单克隆抗体加强免疫一次。
10.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其特征在于，所述单克隆抗体的注射剂量为1mg/kg。
...【技术特征摘要】
1.保藏编号为cctcc no:c2022207的抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4单克隆抗体杂交瘤细胞株ctla-4-3d7。
2.一种抗鸡细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体，由保藏编号为cctcc no:c2022207的杂交瘤细胞株ctla-4-3d7产生。
3.权利要求2所述的单克隆抗体在制备如下(1)-(9)任一所示的产品中的应用：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述疾病包括鸡马立克病、鸡传染性贫血、鸡传染性法氏囊病、禽腺病毒病、禽流感和鸡新城疫。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述疾病为鸡新城疫时，所述疫苗为鸡新城疫lasota疫苗株。
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【专利技术属性】
技术研发人员：秦爱建，刘青，吴少鹏，钱琨，邵红霞，叶建强，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：
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