藏药黑果枸杞质量控制方法技术

本发明专利技术涉及一种藏药黑果枸杞质量控制方法，该方法以总花色苷含量、原花青素含量和总多酚含量的测定作为质量控制指标，具有所用试剂量少、操作简单方便、灵敏度高、精密度高、稳定性好等优点，可以实现对藏药黑果枸杞进行保健功能的有效评价。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种藏药质量控制方法，尤其涉及。
技术介绍
藏药黑果枸杞为茄科枸杞属植物黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)的成熟果实，有较强的抗氧化性，无毒，应用于医药、食品。藏药黑果枸杞中主要含有花色苷类物质、原花青素和总多酚。其中花色苷类物质 是水溶性植物色素之一，广泛存在于植物的花和果实中，属酚类化合物中的类黄酮，具有清 除体内自由基、抗氧化、抗突变抗癌、抗高血糖活性、降血脂及防治动脉粥 样硬化等作用；原 花青素(Proanthocyanidins或Procyanidins，简称PC，又译原花色素、前花色素等)是植 物中广泛存在的一大类天然多酚化合物的总称，具有清除人体自由基、抗氧化、抗紫外线损 伤、抗致突变、酶抑制等活性；总多酚具有清除自由基、抗动脉硬化、降血脂、抗氧化的功能。但是，藏药黑果枸杞目前还没有完整的质量控制方法，不利于保证藏药黑果枸杞 应用的有效性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种简单、快速、准确的藏药黑果枸杞质量控 制方法。为解决上述问题，本专利技术所述的一种，其特征在于该 方法以总花色苷含量、原花青素含量和总多酚含量的测定作为质量控制指标；其中——总花色苷含量的测定方法是(1)制备样品溶液将0. 03 3g藏药黑果枸杞 置于瓶中，加入10 IOOml盐酸-乙醇溶液，在15 80°C温度下保温1 36小时后稀释 5 25倍即得；(2)测定样品溶液吸光度值用紫外_可见光分光光度计在波长为450 600nm处测定样品溶液吸光度值；(3)计算样品溶液中总花色苷含量；——原花青素含量的测定方法是①制备对照品溶液将甲醇加入到儿茶素对照 品中，制成每Iml含儿茶素0. Img的溶液后即得；②制备标准曲线分别将0. 0,0. 5、1、1. 5、 2、2. 5ml的对照品溶液用甲醇定容至25ml，即得浓度为0. 01 0. 5mg/ml的标准使用液；③ 制备样品溶液在0.01 2g藏药黑果枸杞中加入甲醇，经超声处理10 40分钟后，冷却至 室温，并用甲醇定容至5 250ml，摇勻，即得；④测定样品溶液中原花青素含量在0. 1 2ml样品溶液中，依次加入1 5ml香草醛甲醇溶液、0. 5 2ml浓盐酸，混合均勻，室温下 显色10 20mim后，在波长为400 600nm处比色即得；—总多酚含量的测定方法是(a)制备对照品溶液在1 IOmg没食子酸对照 品中加入水，经超声溶解后定容至2 25ml，即得每Iml含没食子酸0. 25g的溶液；(b)制 备标准曲线分别将0. 0,0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5ml的对照品溶液用水定容至50ml，摇勻，即 得；(c)制备样品溶液将0. 01 2g藏药黑果枸杞加入5 50ml乙醇超声30分钟，并用水 逐级稀释1 50倍，即得样品溶液；(d)测定样品溶液吸光度值在样品溶液中加福林_酚显色剂，摇勻后加入碳酸钠溶液，定容至IOml ；以加入福林-酚显色剂和碳酸钠的溶液为空 白，用紫外-可见光分光光度计在波长为300 SOOnm处测定样品溶液吸光度值；(e)计算 样品溶液中总多酚含量。所述总花色苷含量的测定方法中的步骤(1)中盐酸的质量浓度为0. 01 1%，乙 醇的质量浓度为50 90%。所述原花青素含量的测定方法中的步骤③中超声处理条件是功率为250 400W， 频率35 60KHz。 所述原花青素含量的测定方法中的步骤④中香草醛甲醇溶液的质量浓度为4%。所述总多酚含量的测定方法中的步骤(d)中碳酸钠溶液的质量浓度为20%。本专利技术与现有技术相比具有以下优点1、由于本专利技术采用分光光度法测定藏药黑果枸杞中总花色苷、原花青素及总多 酚，而该法具有所用试剂量少、操作简单方便、灵敏度高、精密度高、稳定性好等优点，因此， 适宜测定藏药黑果枸杞的花色苷、原花青素及总多酚，从而实现对藏药黑果枸杞进行保健 功能的有效评价。2、经对本专利技术进行精密度实验、稳定性实验、回收率实验后，可以看出本专利技术具有 较高的精密度、在8小时内稳定性良好、准确可靠，可以实现对藏药黑果枸杞有效地质量控制(参见表1、表2、表3)。表1 精密度实验(次数η = 5) 表2 稳定性实验(t = 8h) 表3:回收率实验 3、本专利技术简单、快速，易于推广。 具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术做进一步说明，下述实施例仅用于说明本专利技术，而并非 对本专利技术的限制。实施例1 一种，该方法以总花色苷含量、原花青素含 量和总多酚含量的测定作为质量控制指标。其中——总花色苷含量的测定方法是(1)制备样品溶液取0.03g藏药黑果枸杞，加入IOmlO. 1 %盐酸-80%乙醇溶液， 在25°C温度下保温24小时后稀释5倍即得。(2)测定样品溶液吸光度值用紫外_可见光分光光度计在波长为540nm处测定 样品溶液吸光度值为1.79。(3)计算样品溶液中总花色苷含量。总花色苷含量(mg/g) = (AX丽XDF)/b，式中A为吸光度；丽为相对分子量(取 449. 2) ；DF为稀释倍数；b为摩尔吸光度(取26900)，得到藏药黑果枸杞的总花色苷的含量 为 10mg/go——原花青素含量的测定原理原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合 物。原花青素本身无色，在酸性介质中与香草醛反应，可以生产深红色的花青素离子。测定方法是①制备对照品溶液将甲醇加入到儿茶素对照品中，制成每Iml含儿茶素0. Img的 溶液后即得。@制备标准曲线分别将0.0、0.5、1、1.5、2、2.51111的对照品溶液置25ml量 瓶中，甲醇定容至25ml，摇勻，即得浓度为0.01 0.5mg/ml的标准使用液。以甲醇为 空白，在500nm波长测定吸光度A，以浓度C对吸光度A进行回归，得回归方程为A = 5. 4012C+0. 0014，Γ = 0.9997。③制备样品溶液取藏药黑果枸杞0. lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲 醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率35KHz) 10分钟后，冷却至室温，再称定 重量，用甲醇补足减失的重量，定容至25ml，摇勻，即得。④测定样品溶液中原花青素含量用锡箔纸将试管包裹严，仅留管口用于加样。取 样品Iml加入试管中，再加3ml的4%香草甲醛溶液混合，然后加入1. 5ml的浓盐酸，彻底混 勻，室温显色10分钟，最后在波长为500nm处比色。含量测定结果经计算，藏药黑果枸杞原花青素含量为1. 6g/100g。—总多酚含量的测定方法是(a)制备对照品溶液在1 IOmg没食子酸对照品中加入水，经超声(功率400W， 频率57KHz)溶解后定容至2 25ml，即得每Iml含没食子酸0. 25g的溶液。(b)制备标准曲线分别将0. 0,0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5ml的对照品溶液置于50ml 量瓶中，用水定容至50ml，摇勻，即得。在760nm波长测定吸光度A，以浓度C对吸光度A进 行回归，得回归方程为A = 3. 0940C+0. 0178，Γ = 0.9994。(c)制备样品溶液将0. Ig藏药黑果枸杞加入25ml乙醇超声30分钟，并用水逐 级稀释25倍，即得样品溶液；(d)测定样品溶液吸光度值取样品溶液1ml，置IOml量瓶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种藏药黑果枸杞质量控制方法，其特征在于：该方法以总花色苷含量、原花青素含量和总多酚含量的测定作为质量控制指标；其中－－总花色苷含量的测定方法是：（１）制备样品溶液：将０．０３～３ｇ藏药黑果枸杞置于瓶中，加入１０～１００ｍｌ盐酸－乙醇溶液，在１５～８０℃温度下保温１～３６小时后稀释５～２５倍即得；（２）测定样品溶液吸光度值：用紫外－可见光分光光度计在波长为４５０～６００ｎｍ处测定样品溶液吸光度值；（３）计算样品溶液中总花色苷含量；－－原花青素含量的测定方法是：①制备对照品溶液：将甲醇加入到儿茶素对照品中，制成每１ｍｌ含儿茶素０．１ｍｇ的溶液后即得；②制备标准曲线：分别将０．０、０．５、１、１．５、２、２．５ｍｌ的对照品溶液用甲醇定容至２５ｍｌ，即得浓度为０．０１～０．５ｍｇ／ｍｌ的标准使用液；③制备样品溶液：在０．０１～２ｇ藏药黑果枸杞中加入甲醇，经超声处理１０～４０分钟后，冷却至室温，并用甲醇定容至５～２５０ｍｌ，摇匀，即得；④测定样品溶液中原花青素含量：在０．１～２ｍｌ样品溶液中，依次加入１～５ｍｌ香草醛甲醇溶液、０．５～２ｍｌ浓盐酸，混合均匀，室温下显色１０～２０ｍｉｍ后，在波长为４００～６００ｎｍ处比色即得；－－总多酚含量的测定方法是：（ａ）制备对照品溶液：在１～１０ｍｇ没食子酸对照品中加入水，经超声溶解后定容至２～２５ｍｌ，即得每１ｍｌ含没食子酸０．２５ｇ的溶液；（ｂ）制备标准曲线：分别将０．０、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５ｍｌ的对照品溶液用水定容至５０ｍｌ，摇匀，即得；（ｃ）制备样品溶液：将０．０１～２ｇ藏药黑果枸杞加入５～５０ｍｌ乙醇超声３０分钟，并用水逐级稀释１～５０倍，即得样品溶液；（ｄ）测定样品溶液吸光度值：在样品溶液中加福林－酚显色剂，摇匀后加入碳酸钠溶液，定容至１０ｍｌ；以加入福林－酚显色剂和碳酸钠的溶液为空白，用紫外－可见光分光光度计在波长为３００～８００ｎｍ处测定样品溶液吸光度值；（ｅ）计算样品溶液中总多酚含量。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邵赟，陶燕铎，陈晨，赵晓辉，梅丽娟，文怀秀，张兴旺，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：63[中国|青海]