研究新疆野苹果种子MsWRKY33基因在低温层积中作用机理的方法技术

本发明专利技术公开了研究新疆野苹果种子MsWRKY33基因在低温层积中作用机理的方法，属于新疆野苹果种子休眠调控技术领域，包括步骤S1：MsWRKY33全长CDS序列克隆与基因载体构建；步骤S2：对MsWRKY33进行生物信息学分析；步骤S3：对融合表达载体pART‑CAM‑MsWRKY33‑EGFP进行亚细胞定位，步骤S4：验证MsWRKY33在不同低温层积时期的表达量；本方法通过对新疆野苹果种子MsWRKY33进行克隆，并对其进行生物信息学分析、亚细胞定位及不同低温层积时期种子的基因表达量水平检测，揭示了MsWRKY33基因在低温层积过程对解除种子休眠具有调控功能，为进一步研究其生物学功能及其分子调控休眠机制提供了理论基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及新疆野苹果种子休眠调控，具体涉及研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法。

技术介绍

1、新疆野苹果malus sieversii(ledeb.)roem.属蔷薇科(rosaceaejuss.)，苹果属(malus mill.)，是中亚天山山脉的第三纪孑遗树种，为现代栽培苹果(malus domestica)的起源种，种内变异丰富，在种质资源保存及遗传发育研究中有着不可替代的作用，现已被列为我国的优先保护物种。但由于病虫害及人类活动的干扰，种群繁衍受到严重影响，目前分布面积已不足5000hm2，已于1991年在《中国植物红皮书》中被列为我国濒危二级保护植物。

2、新疆野苹果种群以实生和根蘖繁殖为主要更新繁育方式，实生繁殖方式为主，成熟果实后种植被动物取食后排出、或人为将种子在低温下层积，于来年春季萌发。陈开秀等人对新疆野苹果层积的种子研究发现种子休眠的原因是生理后熟；或是种皮包被导致空气透性不良。而低温层积处理能够有效地软化种皮，增加种子透性，能够促进完成生理变化和后熟过程，降低内源抑制物，增强新陈代谢活动本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.研究新疆野苹果种子MsWRKY33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：包括

2.根据权利要求1所述的研究新疆野苹果种子MsWRKY33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：步骤S1所述的MsWRKY33全长CDS序列克隆与基因载体构建过程包括

3.根据权利要求2所述的研究新疆野苹果种子MsWRKY33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：所述的特异引物WRKY33F和WRKY33R的引物序列分别为：

4.根据权利要求1所述的研究新疆野苹果种子MsWRKY33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：步骤S2所述的对MsWRKY...

【技术特征摘要】

1.研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：包括

2.根据权利要求1所述的研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：步骤s1所述的mswrky33全长cds序列克隆与基因载体构建过程包括

3.根据权利要求2所述的研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：所述的特异引物wrky33f和wrky33r的引物序列分别为：

4.根据权利要求1所述的研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：步骤s2所述的对mswrky33进行生物信息学分析的过程包括

5.根据权利要求1所述的研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：步骤s3所述的对融合表达载体part-cam-mswrky33-egfp进行亚细胞定位的过程包括

6.根据权利要求1所述的研究新疆野苹果种子mswrky33基因在低温层积中作用机理的方法，其特征在于：步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶春秀，李静，房震，马娟，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：