【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子生物学，特别是涉及一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体及其应用。
技术介绍
1、甲胎蛋白(alpha fetoprotein，afp)是一种胚胎特异性糖蛋白，人类在胎儿时期的肝脏和卵黄囊中含量较高。正常情况下，afp的浓度在人出生后会下降，健康成人血清中afp含量一般小于25ng/ml，而患有原发性肝癌和卵黄囊肿瘤等疾病的人群中afp浓度会显著升高。因此，afp作为一种被广泛认可的肿瘤生物标志物，开发针对其的灵敏、高效的分析方法具有重要意义。检测afp最主要的手段是基于免疫分析法，而免疫分析法中最重要的元件为抗体。目前，广泛使用的afp抗体仍为传统的igg抗体，而传统igg抗体制备是通过杂交瘤技术，成本更高，周期更长，并且不易于改造。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体及其应用。本专利技术提供的单域抗体可通过微生物表达，成本低，且易于改造，稳定性高，分子量小。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、本专利技术提供了一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体，所述鲨源单域抗体的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。
4、本专利技术提供了上述技术方案所述鲨源单域抗体的编码序列，所述编码序列的核苷酸序列如seq id no.3所示或seq id no.4所示。
5、本专利技术提供了一种含有上述技术方案所述编码序列的表达载体。
7、本专利技术提供了一种含有上述技术方案所述表达载体的宿主菌。
8、本专利技术提供了一种融合蛋白，包括标记蛋白和上述技术方案所述的鲨源单域抗体。
9、优选的，所述标记蛋白包括c4结合蛋白α。
10、本专利技术提供了上述技术方案所述的鲨源单域抗体或上述技术方案所述的编码序列或上述技术方案所述的表达载体或上述技术方案所述的宿主菌或上述技术方案所述的融合蛋白在制备能结合人甲胎蛋白的试剂中的应用。
11、本专利技术提供了上述技术方案所述的鲨源单域抗体或上述技术方案所述的编码序列或上述技术方案所述的表达载体或上述技术方案所述的宿主菌或上述技术方案所述的融合蛋白在制备检测人甲胎蛋白的试剂中的应用。
12、本专利技术提供了一种检测人甲胎蛋白的试剂盒，所述试剂盒包括上述技术方案所述的鲨源单域抗体或上述技术方案所述的融合蛋白。
13、有益效果：
14、本专利技术提供了一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体，所述鲨源单域抗体的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。本专利技术所述鲨源单域抗体是通过将甲胎蛋白免疫条纹斑竹鲨(chiloscyllium plagiosum)后筛选得到的，具有优势如下：1)分子量小，只有12kda左右，比驼源的更小，是已知动物中最小的类抗体抗原结合结构域；2)鲨鱼与哺乳动物在系统发育树上相距甚远，因此可以对结构保守的哺乳动物药物靶标有高亲和力；3)鲨源单域抗体中较长的cdr3区域具有形成长指状延伸的非凡能力，可以探测蛋白质中的隐藏表位；4)条纹斑竹鲨不属于濒危动物，体型小，便于饲养。
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1.一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体，其特征在于，所述鲨源单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述鲨源单域抗体的编码序列，其特征在于，所述编码序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示或SEQ ID NO.4所示。
3.一种含有权利要求2所述编码序列的表达载体。
4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的基础载体包括载体pET-25b(+)。
5.一种含有权利要求3或4所述表达载体的宿主菌。
6.一种融合蛋白，其特征在于，包括C4结合蛋白α和权利要求1所述的鲨源单域抗体。
7.权利要求1所述的鲨源单域抗体或权利要求2所述的编码序列或权利要求3或4所述的表达载体或权利要求5所述的宿主菌或权利要求6所述的融合蛋白在制备能结合人甲胎蛋白的试剂中的应用。
8.权利要求1所述的鲨源单域抗体或权利要求2所述的编码序列或权利要求3或4所述的表达载体或权利要求5或6所述的宿主菌或权利要求6所述的融合蛋白在制备检测人甲胎蛋白的试剂中的应用。
9.一种检测人甲胎蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的鲨源单域抗体或权利要求6所述的融合蛋白。
...【技术特征摘要】
1.一种能结合人甲胎蛋白的鲨源单域抗体，其特征在于，所述鲨源单域抗体的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。
2.权利要求1所述鲨源单域抗体的编码序列，其特征在于，所述编码序列的核苷酸序列如seq id no.3所示或seq id no.4所示。
3.一种含有权利要求2所述编码序列的表达载体。
4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的基础载体包括载体pet-25b(+)。
5.一种含有权利要求3或4所述表达载体的宿主菌。
6.一种融合蛋白，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘星，贺贞云，孙志昶，王哲铭，谢晓霞，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：
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