一种响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物学技术领域，提供了一种响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，包括以下步骤：(1)首先提取相应免疫细胞，随后在含有多种细胞因子的培养基中，进行体外培养扩增；(2)PEG化PD‑L1抗体的制备：将PD‑L1抗体、双官能团PEG混合后，反应即得PEG化PD‑L1抗体(DPA)；(3)PD‑L1响应阻断型工程化免疫细胞的制备：将可在肿瘤组织响应性断裂且与细胞膜发生物理或化学链接的PEG类分子(DPR)、步骤(2)制得的DPA与步骤(1)获得的免疫细胞共培养，制备得到DPR@DPA@Im细胞，即响应阻断型工程化免疫细胞；其可肿瘤微环境特异性响应地解除肿瘤细胞的免疫抑制，提高对肿瘤的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物学，具体而言，涉及一种响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法。

技术介绍

1、免疫细胞治疗在恶行血液肿瘤中的治疗具有良好的效果。例如car-t细胞，其通过基因工程技术在t细胞上装载导航装置car，用于特异性识别体内cd19阳性肿瘤细胞，可以较好的杀灭癌细胞。但是，其在实体瘤的治疗中有较多的治疗障碍，治疗效果不佳。另外，tcr-t细胞治疗通过将特异性结合靶点抗原的tcr序列，通过基因工程转入到t细胞，使其特异性识别和杀伤表达抗原的肿瘤细胞，与之类似的亦有car-nk治疗策略等。尽管如此，以上的细胞治疗在实体瘤的治疗中依旧存在诸多局限性。以目前在临床上已有使用的car-t细胞治疗策略为例。首先，由于改造后的t细胞在进入人体后，难于突破实体瘤屏障，主要在外周循环，导致实体瘤中t细胞浸润较少。同时，由于肿瘤细胞可通过以免疫检查点为代表的机制而形成免疫抑制微环境，使免疫细胞难以识别肿瘤细胞，进而影响其有效激活、增殖以及招募更多的免疫细胞参与针对肿瘤细胞的杀灭过程，严重限制免疫治疗策略的临床效果。

2、目前，临床上使用细胞治疗联合pd-l1抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，以肿瘤组织中特征高表达的蛋白酶或pH或温度或光照为响应信号源，利用不同分子量的PEG分子分别获得具有肿瘤组织响应性断裂的PEG类分子以及PEG化PD-L1抗体，通过超分子作用或化学反应，对细胞膜进行修饰，最终获得PD-1/PD-L1响应阻断型工程化免疫细胞。

2.根据权利要求1所述的响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶包括但不限于基质金属蛋白酶、组织蛋白酶；所述pH为4-7；所述温度为37-50℃；所述光照为波长范围200-1000nm的光照。

3.根据权利要求1或2所述的响应阻断型工程...

【技术特征摘要】

1.一种响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，以肿瘤组织中特征高表达的蛋白酶或ph或温度或光照为响应信号源，利用不同分子量的peg分子分别获得具有肿瘤组织响应性断裂的peg类分子以及peg化pd-l1抗体，通过超分子作用或化学反应，对细胞膜进行修饰，最终获得pd-1/pd-l1响应阻断型工程化免疫细胞。

2.根据权利要求1所述的响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶包括但不限于基质金属蛋白酶、组织蛋白酶；所述ph为4-7；所述温度为37-50℃；所述光照为波长范围200-1000nm的光照。

3.根据权利要求1或2所述的响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述免疫细胞包括但不限于t细胞、nk细胞、car-t细胞、car-nk细胞；步骤(2)中，所述双官能团peg为可同时与细胞膜以及pd-l1抗体发生物理或化学连接作用的官能团。

5.根据权利要求3所述的响应阻断型工程化免疫细胞的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，培养时，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：周兴，张成元，龙红艳，娄杰，
申请(专利权)人：重庆理工大学，
类型：发明
国别省市：