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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法及其应用。
技术介绍
1、子宫内膜炎是子宫内膜层及肌层产生严重炎症反应的疾病,是导致母畜繁殖性能下降的主要疾病之一。该病病因复杂,而病原微生物感染是其主要病因之一,其中大肠杆菌(escherichia coli,e.coli)和金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,s.aureus)是子宫内膜炎的主要致病菌。病原微生物入侵,引起子宫内膜层及肌层出现炎症反应,造成子宫内膜受损,进而导致繁殖障碍。
2、子宫内膜炎严重影响经济动物和伴侣动物的生产性能和繁殖年限,甚至影响动物的正常寿命。子宫内膜炎患犬的发病情况调查显示患病率逐年增加。另外,有研究显示奶牛子宫内膜炎所引起的繁殖性能下降、空怀期延长和产奶量下降,由此造成间接的经济损失高达154美元/头;另一调查研究表明美国每年在奶牛子宫疾病的治疗和预防上需要花费6.5亿美元。所以,子宫内膜炎在养殖业和宠物行业发病率高,直接影响母畜的繁殖性能,并造成巨大的经济损失。
3、子宫内膜炎的治疗包括抗生素疗法、微生态制剂法、激素疗法和中药治疗。其中,抗生素以抗菌谱广,见效快的优点深受临床重视,目前仍广泛应用于母畜子宫内膜的治疗。严业广等采用甲羟孕酮联合甲硝唑与头孢曲松钠治疗牛急性子宫内膜炎,总有效率达90%以上。对于轻症患畜首先采用0.1%高锰酸钾溶液反复冲洗子宫,排净子宫内的污秽、恶露、炎性物质、子宫组织脱落碎片,直至流出澄清冲洗液为止,对于纤维蛋白性炎症的母畜不可以进行子宫冲洗以免炎症扩散,然
4、微生态制剂即微生态调节剂,能调整机体局部微生态失调,提高机体免疫力,由益生菌及其代谢产物经特殊加工制成的一类生物制品。微生态制剂治疗子宫内膜炎有效率为95.23%,治愈率85.71%。张祯等采用溶菌酶治疗子宫内膜炎,取得了较青霉素、链霉素更为良好的治疗效果。但是微生态制剂对于子宫内正常菌群的影响目前没有详细的研究,不排除存在造成宫腔内菌群失调的问题。
5、对于轻度或慢性子宫内膜炎的病畜,可以采用激素治疗。催产素和雌激素不仅能诱发母畜发情,使子宫颈松弛、开张,促进子宫收缩,加速子宫排除病原菌及炎性分泌物,引起子宫充血,还能促进腺体分泌增加,增强多形核白细胞的功能,阻止子宫感染。但是长期炎症、子宫下垂等因素会影响其促进收缩的能力。激素类药物如己烯雌酚和前列烯醇等,可在子宫颈紧闭的情况下促进子宫颈开张,作为辅助治疗的同时还具有保护子宫颈管的作用。前列腺素及其类似物对慢性子宫内膜炎和子宫蓄脓均具有良好的疗效,同时具有溶解功能性黄体,促进重新发情,增强局部免疫力的效果。heuwieser等经过对比发现,合理使用前列腺素f2α可以缩短产后到第一次受精的时间间隔,并提高受孕率,但是过度使用雌激素会增加子宫内膜癌变的风险,而前列腺素类药物会增加血管系统疾病风险。
6、中兽药因其毒性低、无残留、不易产生耐药性以及改善机体性能和增强机体的抗病能力等优势在子宫内膜炎的治疗中得到广泛应用。有学者应用黄酮类化合物黄芩苷治疗兔子宫内膜炎,结果显示黄芩苷有效的降低促炎因子的表达,明显缓解组织炎症浸润,出血充血等组织病理学现象,对家兔子宫内膜炎具有一定的保护作用。中兽药凭借天然、有效、无残留等特点,在子宫内膜炎的临床应用中具有潜在的治疗优势,但中兽药制剂普遍以水煎剂为主,药剂种类单一,局限了子宫内膜炎的治疗方式,且中兽药成分过于复杂,有效成分含量较低,导致目前治疗所用的瘤胃投服或子宫灌注等治疗方法存在见效慢,药物作用时间短等缺点。由此可见,提高天然药剂有效成分含量,增加药物作用时间已成为临床亟待解决的问题。
7、综上,目前局部或全身给予抗生素是临床常用的子宫内膜炎治疗方法,但存在易产生耐药性、药物残留量高和毒副作用大的问题,因此亟待开发替代抗生素治疗子宫内膜炎的新型药物制剂。植物源性药物具有不易产生耐药性、药物残留量低及毒副作用小的特性,其中植物源性活性成份小檗碱(berberine,bbr)和香芹酚(carvacrol,car)具有抑菌和抗炎的药理作用,但受给药方式、制剂工艺和药物利用率等条件制约,仍未广泛应用于兽医临床疾病的治疗。因此亟待开发新型天然药物制剂来替代抗生素治疗家畜子宫内膜炎。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决开发用于家畜子宫内膜炎的新型天然药物制剂,来替代抗生素药物治疗家畜子宫内膜炎的问题,而提出一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法。
2、上述目的通过以下的技术方案实现:
3、一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,所述方法通过以下步骤实现:
4、步骤一、制备壳聚糖水凝胶,包括,
5、制备乙酸溶液:将冰乙酸溶于蒸馏水中,配制成浓度为0.1mol/l的乙酸溶液,常温保存备用;
6、制备cs溶液:
7、将cs粉末平铺在称量纸上,紫外线照射1h,照射期间每隔30min翻动一次;之后,将cs粉末溶于步骤一制备的乙酸溶液中,搅拌并静置至完全溶解,配制成浓度为2.0%的cs溶液;之后,利用150钼绢丝过滤,在4℃的温度下保存备用;
8、制备β-gp溶液:
9、将β-甘油磷酸钠粉末溶于蒸馏水中,配制成浓度为56%的β-gp溶液,在4℃的温度下保存备用;
10、制备cs/β-gp水凝胶:
11、将cs溶液置于烧杯中,烧杯中放入磁力搅拌子,在冰浴条件下于磁力搅拌器上磁力搅拌;之后,将β-gp溶液缓慢滴加至搅拌后的cs溶液中,并保证滴加操作过程中溶液中无絮状沉淀,若滴加操作过程中溶液中出现絮状沉淀则认定操作失败,则重新制备cs/β-gp水凝胶,滴加操作完毕后持续搅拌5-20min,获得cs/β-gp水凝胶,在4℃温度下保存备用;
12、步骤二、制备小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶,包括,
13、制备car和bbr混合药物溶液:采用无水乙醇溶解car,得到car溶液;采用蒸馏水溶解bbr,得到bbr溶液;之后,向car溶液中加入bbr溶液,制成含有car和bbr的混合溶液,其中,混合溶液car的浓度为4-8mg/ml,bbr的浓度为1-5mg/ml;
14、制备小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶:取cs/β-gp水凝胶在冰浴条件下磁力搅拌至质地均匀;并在冰浴搅拌状态下逐渐滴加步骤五制备的混合溶液,得到小檗碱和香本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:所述方法通过以下步骤实现:
2.根据权利要求1所述的一种小檗碱/香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:步骤二所述的将CS粉末溶于步骤一制备的乙酸溶液中,静置时间12-15小时至完全溶解。
3. 根据权利要求1或2所述的一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:步骤二所述的制备CAR和BBR混合药物溶液的步骤中,混合溶液是含有CAR的浓度为6mg/mL,BBR的浓度为3 mg/mL。
4. 根据权利要求1或2所述的一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:步骤二所述的制备小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的步骤中,小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶中,CAR的最终浓度为1000μg/mL,BBR的最终浓度为500 μg/mL。
5.一种利用上述任一权利要求方法制备的小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶在用于制备治疗子宫内膜炎类疾病药物中的用途。
【技术特征摘要】
1.一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:所述方法通过以下步骤实现:
2.根据权利要求1所述的一种小檗碱/香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:步骤二所述的将cs粉末溶于步骤一制备的乙酸溶液中,静置时间12-15小时至完全溶解。
3. 根据权利要求1或2所述的一种小檗碱和香芹酚复合壳聚糖水凝胶的制备方法,其特征在于:步骤二所述的制备car和bbr混合药物溶液的步骤中,混合溶液是含有car的...
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