一种嵌合抗原受体T细胞的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及免疫技术领域，具体涉及一种嵌合抗原受体T细胞的制备方法及其应用。方法包括：（1）激活T细胞，T细胞激活17~19 h后采用完全培养基调整细胞密度8~9×10<supgt;6</supgt;/ml，向完全培养基中加入慢病毒，同时加入聚凝胺，对激活后的T细胞进行培养；（2）培养6~8 h后加入完全培养基以稀释聚凝胺，继续培养；（3）培养至第3~5天，每天进行取样计数，根据计数结果补液，调整细胞密度至1×10<supgt;6</supgt;/ml继续培养。（4）培养至第5~11天，每48 h进行取样计数，根据计数结果补液，调整细胞密度至1×10<supgt;6</supgt;/ml继续培养。本发明专利技术的方法可以提高T细胞嵌合抗原受体基因转导效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫，具体涉及一种嵌合抗原受体t细胞的制备方法及其应用。

技术介绍

1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、嵌合抗原受体t细胞（chimeric antigen receptor t cells，car-t）疗法是血液系统恶性肿瘤领域最重要的突破之一。嵌合抗原受体t细胞疗法作为一种基因工程化免疫细胞治疗方法，能够精准、快速、高效地杀灭肿瘤，近年来在恶性肿瘤治疗中取得了较大的突破和进展，尤其在血液类肿瘤的临床治疗中获得很大成就，但嵌合抗原受体t细胞也面临缺乏特异性靶点、肿瘤微环境抑制及实体瘤浸润效果不佳等问题。

3、嵌合抗原受体car是嵌合抗原受体t细胞发挥作用的关键结构，其表达效率直接关系到嵌合抗原受体t细胞的治疗效果。目前，有多种外源基因导入办法，包括慢病毒、逆转录病毒、腺病毒、转座子技术及各种瞬时表达电转技术等。目前嵌合抗原受体几乎用的是逆转录病毒或者瞬时表达技术转导进入并稳定表达在t细胞上，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种嵌合抗原受体T细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述聚凝胺的浓度为8~12 μg/ml。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述聚凝胺的浓度为10 μg/ml。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中激活T细胞之前，还包括：

5.一种嵌合抗原受体T细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述聚凝胺的浓度为8~12 μg/ml。

7.如权利要求6所述的方法，其特征...

【技术特征摘要】

1.一种嵌合抗原受体t细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述聚凝胺的浓度为8~12 μg/ml。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述聚凝胺的浓度为10 μg/ml。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中激活t细胞之前，还包括：

5.一种嵌合抗原受体t细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（1...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱学良，苏彦鑫，杨学文，张文丽，齐昌，王英宗，
申请(专利权)人：山东丽山生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：