一种基于大黄鱼LEAP2A合成的抗菌肽ARI14及其应用制造技术

技术编号：40126895 阅读：9 留言：0更新日期：2024-01-23 21:31

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种基于大黄鱼LEAP2A合成的抗菌肽ARI14及其应用。所述抗菌肽ARI14的全序列为Ala‑Leu‑Arg‑Trp‑Ile‑Arg‑Arg‑Met‑Arg‑Arg‑Leu‑Trp‑Arg‑Ile，分子量为1982.46D，等电点为12.8，属于碱性多肽。本发明专利技术的抗菌肽ARI14具有广谱抗菌活性，可特异性杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。同时，抗菌肽ARI14具有较弱的溶血活性和较小的细胞毒性，表现出良好的生物安全性。抗菌肽ARI14可代替抗生素，应用于细菌性疾病的防治。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，特别涉及一种基于大黄鱼leap2a合成的抗菌肽ari14及其应用。

技术介绍

1、抗菌肽(antimicrobial peptides,amps)又叫抗微生物肽，是由生物体内产生的具有广谱抗真菌、细菌、病毒、抑杀肿瘤细胞等活性作用的小分子多肽，由几个至几十个不等的氨基酸组成，是生物体免疫系统的重要组成部分。在自然界中，已经从各种生物(动物、植物、微生物等)中分离出了抗菌肽。目前已发现的抗菌肽主要来源于动植物中提取、通过人工合成、以及通过基因工程等途径获取。常见的抗菌肽可分为五个家族：α-螺旋型抗菌肽，β-折叠及小蛋白质的肽段抗菌肽，带有一个硫代-醚环的肽段的抗菌肽，无规则的卷曲型抗菌肽，富含半胱氨酸的抗菌肽。

2、抗菌肽分子量较小，因而更容易渗透，从而杀菌作用更佳。大多数抗菌肽水溶性好，因而可以制成水溶制剂使用，应用场景简单。此外，抗菌肽还具有热稳定性好、不易失活、广谱抗菌活性、及不易诱发细菌产生耐药性等优点。

3、抗菌肽杀伤细菌的作用机制大体可以分为三类：作用于细胞膜、作用于胞内基质及作用于特殊组分。与抗生素作用于单一靶点不同，抗菌肽不针对特定的分子或途径，这使得致病菌难以对其产生耐药性。研究表明，抗菌肽可以通过膜渗透作用与细胞膜结合，引起细胞膜的穿孔，形成离子通道，破坏细胞膜的完整性，使细胞内的细胞质外流而导致细胞死亡，从而起到抗菌作用。很多抗菌肽通过细胞膜后，会进一步靶向作用胞内组分发挥其生物活性，从而杀灭细菌，如插入dna螺旋的碱基对中，从而破坏dna双螺旋结构；取代原肽序列中

技术实现思路

1、为得到具有广谱抗菌活性，同时具有较好生物安全性的抗菌肽，本专利技术基于大黄鱼leap2a合成了一种抗菌肽ari14，并明确了其应用。

2、本专利技术的目的通过如下技术实现：

3、本专利技术首先提供了一种抗菌肽ari14，所述抗菌肽ari14的氨基酸序列为：ala-leu-arg-trp-ile-arg-arg-met-arg-arg-leu-trp-arg-ile。

4、本专利技术进一步提供了上述抗菌肽ari14的制备方法，具体如下：

5、(1)以大黄鱼leap2a蛋白质序列为模板，截取14个氨基酸的线性多肽，获得多肽ami14，多肽ami14的氨基酸序列为：ala-leu-arg-arg-ile-ala-arg-met-thr-pro-leu-trp-arg-ile；

6、(2)将线性多肽ami14氨基酸序列中的第四位精氨酸(arg)替换为色氨酸(trp)，第六位丙氨酸(ala)、第九位苏氨酸(thr)和第十位脯氨酸(pro)替换为精氨酸(arg)，得到抗菌肽ari14，抗菌肽ari14的氨基酸序列为：ala-leu-arg-trp-ile-arg-arg-met-arg-arg-leu-trp-arg-ile；

7、(3)采用固相化学合成法合成抗菌肽ari14全部序列。

8、本专利技术还提供了上述一种抗菌肽ari14在制备抗细菌药物中的应用，所述抗细菌药物具有广谱抗菌活性。

9、本专利技术还提供了上述一种抗菌肽ari14在制备饲料添加剂中的应用。

10、本专利技术抗菌肽ari14具有如下优点及有益效果：

11、本专利技术制备的抗菌肽ari14具有广谱杀菌活性，可杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。此外，抗菌肽ari14还具有溶血活性小和细胞毒性低的特点。

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【技术保护点】

1.一种基于大黄鱼LEAP2A合成的抗菌肽ARI14，其特征在于：所述抗菌肽ARI14的氨基酸序列为：Ala-Leu-Arg-Trp-Ile-Arg-Arg-Met-Arg-Arg-Leu-Trp-Arg-Ile。

2.一种如权利要求1所述的抗菌肽ARI14的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

3.如权利要求1所述的抗菌肽ARI14在制备具有广谱抗菌效果的抗细菌药物中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述细菌包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述细菌包括变形假单胞菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠沙门氏菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌。

6.如权利要求1所述的抗菌肽ARI14在制备饲料添加剂中的应用。

【技术特征摘要】

1.一种基于大黄鱼leap2a合成的抗菌肽ari14，其特征在于：所述抗菌肽ari14的氨基酸序列为：ala-leu-arg-trp-ile-arg-arg-met-arg-arg-leu-trp-arg-ile。

2.一种如权利要求1所述的抗菌肽ari14的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

3.如权利要求1所述的抗菌肽ari14在制备具有广谱抗菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈新华，张向阳，姜基涛，何鸿禹，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：

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