用于分化和扩增B谱系细胞的组合物和方法技术

技术编号:40123340 阅读:20 留言:0更新日期:2024-01-23 21:00
公开了用于使细胞定向分化为B细胞谱系的培养基、试剂盒以及方法。所公开的分化方法可使用一种或多种阶段特异性培养基制剂使原代细胞或多能干细胞源性细胞通过一种或多种中间细胞群体,得到所述B谱系细胞。因此,用于执行定向分化工艺流程的培养基和补充物可包含在试剂盒中,所述试剂盒含有一种或多种基础培养基和要添加至其中的一种或多种补充物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开涉及细胞培养应用,并且更具体地说涉及使用造血细胞的细胞培养应用,并且更具体地说涉及与一种或多种b细胞群体有关的细胞培养应用。


技术介绍

1、哺乳动物的血液由各种细胞类型组成,包括淋巴细胞、凝血细胞、红细胞以及它们的直接和间接前体。白细胞可称为白血细胞,并且这些细胞在宿主的免疫系统中发挥功能。白细胞可进一步再分成b细胞、t细胞、nk细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞以及嗜中性粒细胞。此类白细胞中的每一者在宿主的免疫系统中执行特定的功能。

2、与其他血细胞一样,b细胞来源于能够自我更新和分化为每种血细胞谱系的造血干细胞/祖细胞(hspc)。b细胞为体液免疫的中心组分,并且在结合抗原后(经由在其表面上表达的b细胞受体)分泌抗体。

3、在体内,哺乳动物b细胞在骨髓中发育,并且从hspc开始,通过各个发育阶段,包括祖b细胞、前b细胞以及未成熟b细胞。未成熟b细胞在第二淋巴器官(例如脾脏、胸腺等)中成熟为记忆b细胞,并且在第二淋巴器官或骨髓中成熟为成浆细胞和浆细胞(即产生抗体的细胞)。在体外或离体重现这些发育步本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于制备B细胞前体群体的方法,所述方法包括:

2.如权利要求1所述的方法,其中所述HSPC群体为从脐带血或骨髓富集的,或从多能干细胞(PSC)分化的。

3.如权利要求1所述的方法,其中所述B细胞前体群体表达CD10或CD19中的一者或两者。

4.如权利要求1所述的方法,其中所述衍生培养基包含SCF或TPO。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,所述方法还包括使所述B细胞前体群体与分化培养基接触以及在不含血清的条件下在所述分化培养基中培养所述B细胞前体群体。

6.根据权利要求5所述的方法,所述方法还包括获得CD19+...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于制备b细胞前体群体的方法,所述方法包括:

2.如权利要求1所述的方法,其中所述hspc群体为从脐带血或骨髓富集的,或从多能干细胞(psc)分化的。

3.如权利要求1所述的方法,其中所述b细胞前体群体表达cd10或cd19中的一者或两者。

4.如权利要求1所述的方法,其中所述衍生培养基包含scf或tpo。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,所述方法还包括使所述b细胞前体群体与分化培养基接触以及在不含血清的条件下在所述分化培养基中培养所述b细胞前体群体。

6.根据权利要求5所述的方法,所述方法还包括获得cd19+b谱系细胞群体。

7.根据权利要求6所述的方法,所述方法还包括与在所述衍生培养基中培养所述hspc群体之后相比获得更多的cd19+b谱系细胞。

8.根据权利要求6所述的方法,其中至少一部分的所述cd19+b谱系细胞为igm+细胞。

9.根据权利要求5所述的方法,其中所述分化培养基包含基础培养基;scf、tpo以及flt3l中的至少一者;以及所述至少一种其他细胞因子。

10.根据权利要求6所述的方法,所述方法还包括使所述cd19+b谱系细胞群体与下游分化培养基接触以及在不含血清的条件下在所述下游分化培养基中培养所述cd19+b谱系细胞群体。

11.根据权利要求10所述的方法,所述方法还包括与在所述分化培养基中培养所述b细胞前体群体之后相比获得更多的igm+细胞。

12.根据权利要求11所述的方法,其中至少一部分的所述igm+细胞为抗体分泌细胞。

13.根据权利要求10所述的方法,其中所述下游分化培养基包含基础培养基、人cd40的配体以及所述至少一种其他细胞因子。

14.一种用于制备b谱系细胞群体的方法,所述方法包括:

15.根据权利要求14所述的方法,其中所述b细胞前体群体表达cd10或cd19中的一者或两者。

16.如权利要求14所述的方法,其中所述b细胞前体群体来源于cd34+造血干细胞或祖细胞(hspc)群体,所述cd34+造血干细胞或祖细胞(hspc)群体为从脐带血或骨髓富集的,或从多能干细胞(psc)分化的。

17.根据权利要求16所述的方法,其中所述b谱系细胞群体表达cd19并且与在衍生培养基中培养所述hspc群体以得到所述b细胞前体群体之后相比,所述b谱系细胞群体包含更多的cd19+细胞。

18.根据权利要求17所述的方法,其中至少一部分的cd19+b谱系细胞为igm+细胞。

19.根据权利要求14所述的方法,所述方法还包括使所述b谱系细胞群体与下游分化培养基接触以及在不含血清的条件下在下游分化培养基中培养所述b谱系细胞群体。

20.根据权利要求19所述的方法,所述方法还包括与在所述分化培养基中培养所述b细胞前体群体之后相比获得更多的igm+细胞。

21.根据权利要求20所述的方法,其中至少一部分的所述igm+细胞为抗体分泌细胞。

22.根据权利要求19所述的方法,其中所述下游分化培养基包含基础培养基、人cd40的配体以及所述至少一种其他细...

【专利技术属性】
技术研发人员:N·塔巴塔拜萨瓦雷P·布劳尔
申请(专利权)人:加拿大干细胞技术公司
类型:发明
国别省市:

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