【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，涉及淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒的药物新用途，具体涉及淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
技术介绍
1、骨质疏松(osteoporosis，op)是一种以骨量低下、骨微结构损坏，导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身性骨病，好发于绝经后妇女及老年男性，其发病的主要原因之一是骨形成和骨吸收之间的不平衡，因此，抑制破骨细胞过度活化和增强成骨分化是抗骨质疏松的有效策略。
2、淫羊藿(epimedium，ep)又称仙灵脾、刚前，干燥叶为其入药部位，入肝、肾经，具有补肾壮阳、强健筋骨、祛风除湿的功效。细胞外囊泡(extracellular vesicles，evs)含有多种蛋白质、脂质和核酸，可通过介导细胞与细胞之间的通讯发挥重要的生理功能，几乎所有类型的真核和原核细胞都分泌evs。植物evs在形态方面与哺乳动物evs相似，但其组成和功能等方面研究较少。有研究发现植物evs是植物先天免疫系统的组成成分，具有抗真菌作用。此外，植物evs具有跨物种调节功能，不仅可以调节哺乳动物细胞的生理功能，还可以干预和预防疾病进程，对疾病起到治疗作用。这些研究结论证明植物evs作为一种新型的天然产物有可能成为新药开发的良好候选来源。中药多为植物，成本低，副作用小，但中药源性的evs却很少有人研究。从中药淫羊藿中提取细胞外囊泡是否可行，提取出的淫羊藿源性细胞外囊泡样纳米颗粒是否具有生物活性还未可知。
3、因此，如何提供一种从中药淫羊藿中提取高纯度、高质量的细胞外囊泡的方法
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒的药物新用途，具体提供淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
4、本专利技术创造性地提取纯化中药淫羊藿衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能充分被血管内皮细胞内化吸收，能够提高血管内皮生长因子vegf的表达水平，加强血管内皮细胞血管生成能力来缓解骨质疏松，并且具有体内骨靶向性，其用于制备预防或治疗骨科疾病的药物具有潜力，为预防或治疗骨科疾病的方法提供了新的策略。
5、优选地，所述骨科疾病的类型包括骨质疏松、骨代谢疾病、骨肉瘤、骨缺损、骨折或骨性关节炎中的任意一种。
6、本专利技术所涉及的淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒可以通过本领域技术人员公知的任何方法制备得到，更优选下述提取方法，该方法得到的淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒纯度更高，具有更优异的防治骨科疾病的效果。
7、优选地，所述淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒是由包括如下步骤的提取方法制得的：
8、(1)将淫羊藿原料的汁液过滤，滤液进行离心并收集上清液；
9、(2)将上清液进行超速离心后收集沉淀并重悬，即得。
10、优选地，步骤(1)所述进行离心并收集上清液共进行三次，第一次离心的速度为100-500g(例如100g、200g、250g、300g、350g、400g、500g等)，第二次离心的速度为1000-5000g(例如1000g、1200g、1500g、1700g、2000g、2500g、3000g、3500g、4000g、5000g等)，第三次离心的速度为8000-15000g(例如8000g、8500g、9000g、9500g、10000g、10500g、11000g、11500g、12000g、15000g等)，且三次离心的时间各自独立地选择5-50min(例如5min、10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min、50min等)。
11、上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
12、进一步优选地，步骤(1)所述进行离心并收集上清液共进行三次，第一次离心的速度为300-900g，时间为5-20min；第二次离心的速度为1000-3000g，时间为10-30min；第三次离心的速度为8000-15000g，时间为20-40min。
13、优选地，步骤(2)所述超速离心的速度为80000-180000g(例如100000g、110000g、120000g、130000g、140000g、150000g、160000g、170000g、180000g等)，时间为50-100min(例如50min、55min、60min、65min、70min、75min、80min、85min、90min、95min、100min等)。
14、上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
15、优选地，所述重悬后还使用0.22μm过滤器进行过滤。
16、在本专利技术中，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、滴丸剂、溶液剂、气雾剂、喷雾剂、软膏剂或膜剂中的任意一种。
17、优选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料，例如稀释剂、调味剂、粘合剂、填充剂、增稠剂、润滑剂或ph调节剂等。
18、第二方面，本专利技术提供淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备骨靶向制剂中的应用。
19、本专利技术还创造性地发现淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在体内具有骨靶向性，这一发现可进一步应用于骨靶向制剂的制备中，以进行骨科疾病发病机制的研究和相关病症的治疗。
20、优选地，所述骨靶向制剂还包括负载于所述淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒中的其他预防或治疗骨科疾病的药物。
21、所述其他预防或治疗骨科疾病的药物例如钙制剂、雌激素类药物、降钙素、二磷酸盐类药物、特立帕肽等。
22、第三方面，本专利技术还提供淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备血管内皮生长因子促进剂中的应用。
23、第四方面，本专利技术还提供淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒以非治疗目的地在制备血管内皮生长因子促进剂中的应用。
24、根据本专利技术的研究结果，淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒能够在细胞水平(体外水平)促进血管内皮细胞中血管内皮生长因子的表达，即淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒能被制成一种单纯的试验用制剂，用于探究骨形成与血管生成的偶联机制，或者可被应用于血液微生态构建、血管损伤修复、自身免疫性疾病、基因治疗等相关领域，用于增加疗效、作用机制的研究及药物靶向载体的研发等。本专利技术所要求保护的血管内皮生长因子促进剂并不是用于消除病因或病灶，即是一种以非治疗为目的地在制备血管内皮生长因子促进剂中的应用。
25、相对于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：
26、本专利技术创造性地提取纯化中药淫羊藿本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述骨科疾病的类型包括骨质疏松、骨代谢疾病、骨肉瘤、骨缺损、骨折或骨性关节炎中的任意一种。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒是由包括如下步骤的提取方法制得的：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述进行离心并收集上清液共进行三次，第一次离心的速度为100-500g，第二次离心的速度为1000-5000g，第三次离心的速度为8000-15000g，且三次离心的时间各自独立地选择5-50min。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述进行离心并收集上清液共进行三次，第一次离心的速度为300-900g，时间为5-20min；第二次离心的速度为1000-3000g，时间为10-30min；第三次离心的速度为8000-15000g，时间为20-40min。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(2)所述超速离心的速度为8
7.根据权利要求1-6中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、滴丸剂、溶液剂、气雾剂、喷雾剂、软膏剂或膜剂中的任意一种；
8.淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备骨靶向制剂中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述骨靶向制剂还包括负载于所述淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒中的其他预防或治疗骨科疾病的药物。
10.淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备血管内皮生长因子促进剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述骨科疾病的类型包括骨质疏松、骨代谢疾病、骨肉瘤、骨缺损、骨折或骨性关节炎中的任意一种。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒是由包括如下步骤的提取方法制得的：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述进行离心并收集上清液共进行三次，第一次离心的速度为100-500g，第二次离心的速度为1000-5000g，第三次离心的速度为8000-15000g，且三次离心的时间各自独立地选择5-50min。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述进行离心并收集上清液共进行三次，第一次离心的速度为300-900g，时间为5...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵可伟，沈家雯，徐玉坤，赵清，
申请(专利权)人：广州中医药大学第三附属医院广州中医药大学第三临床医学院，广州中医药大学附属骨伤科医院，广东省中医骨伤研究院，
类型：发明
国别省市：
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