【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本披露涉及杀有害生物微细胞，包括杀有害生物微细胞的组合物，以及制备杀有害生物微细胞的方法。
技术介绍
1、需要能够靶向细胞并递送生物试剂的递送载体；含有这样的递送载体的组合物；以及将所述载体递送至细胞，从而调节包括动物、植物和昆虫细胞、组织和生物体的生物系统的相关方法。特别地，需要既能够作为递送载体又能作为活性成分(例如杀有害生物活性成分)的递送载体。
技术实现思路
1、因此，本披露提供了包括杀有害生物微细胞的组合物。杀有害生物微细胞由杀有害生物亲代细菌产生，可以抑制包括昆虫、真菌和线虫的有害生物。杀有害生物微细胞保留亲代细菌的杀有害生物活性并且是可天然降解的。另外，杀有害生物微细胞可用于产生、扩增和递送多种生物活性成分，包括蛋白质毒素和核酸。本披露进一步提供了通过修饰杀有害生物亲代细菌的细胞分配功能来产生杀有害生物微细胞的方法。
2、本披露的方面包括杀有害生物组合物，其包括液体载剂相；以及分散在该载剂相中的多个杀有害生物微细胞，其中该多个杀有害生物微细胞衍生自多个杀有害生物亲代细菌，该多个杀有害生物亲代细菌包含引起该亲代细菌的细胞分配功能中的修饰的至少一个遗传突变，并且其中当该组合物应用于植物时，该多个杀有害生物微细胞以足以控制在该植物中或在该植物上的至少一种有害生物的颗粒浓度存在。在该方面的一些实施例中，控制包括以下中的至少一个：当与未用组合物处理的对照植物相比时，植物上的有害生物数量减少，并且当与未用组合物处理的对照植物相比时，对植物的物理损坏减少。在该方面的另外
3、在该方面的一些实施例中，其可以与前述实施例中任一项组合，亲代细菌的细胞分配功能中的修饰包括以下中的至少一种修饰：z-环抑制蛋白、细胞分裂拓扑特异性因子、或隔膜机构组分。在该方面的另外的实施例中，z-环抑制蛋白选自以下的组：minc多肽、mind多肽或mine多肽；其中细胞分裂拓扑特异性因子选自以下的组：mine多肽或diviva多肽，并且其中隔膜机构组分选自以下的组：ftsz多肽或ftsa多肽。
4、在该方面的一些实施例中，其可以与前述实施例中任一项组合，杀有害生物亲代细菌选自以下的组：除虫链霉菌(streptomyces avermitilis)、刺糖多孢菌(saccharopolyspora spinose)、苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringiensis)、侧孢短芽孢杆菌(brevibacillus laterosporus)、双酶梭菌(clostridium bifermentans)、日本金龟子芽孢杆菌(bacillus popilliae)、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)、发光杆菌(photorhabdus luminescens)、嗜线虫致病杆菌(xenorhabdus nematophila)、嗜虫沙雷氏菌(serratia entomophila)、嗜虫耶尔森氏菌(yersinia entomophaga)、喜昆虫假单胞菌(pseudomonas entomophila)、伯克霍尔德氏菌属物种(burkholderia spp.)、萨布茨格色杆菌(chromobacterium subtsugae)或大肠杆菌(escherichia coli)。在该方面的另外的实施例中，杀有害生物亲代细菌选自以下的组：枯草芽孢杆菌菌株rti477、枯草芽孢杆菌菌株atcc 6633、枯草芽孢杆菌菌株atcc 21332、枯草芽孢杆菌菌株168、枯草芽孢杆菌菌株atcc 9943、枯草芽孢杆菌菌株qst713、和枯草芽孢杆菌菌株ncib 3610，萎缩芽孢杆菌菌株abi02a dsm 32019、萎缩芽孢杆菌菌株abi03 dsm32285、萎缩芽孢杆菌菌株abi05dsm 24918，解淀粉芽孢杆菌菌株rti301、解淀粉芽孢杆菌fzb24、解淀粉芽孢杆菌fzb42、解淀粉芽孢杆菌ba-1、解淀粉芽孢杆菌lmg 5-29032、解淀粉芽孢杆菌mbi600、解淀粉芽孢杆菌cect8836、或解淀粉芽孢杆菌m4(s499)。在该方面的一些实施例中，杀有害生物亲代细菌是发光杆菌，并且其中该杀有害生物微细胞包括外源杀有害生物蛋白质毒素pir。在该方面的一些实施例中，杀有害生物亲代细菌是枯草芽孢杆菌，并且其中杀有害生物微细胞包括外源杀有害生物分子。在该方面的一些实施例中，杀有害生物亲代细菌是经遗传修饰的表达一种或多种外源杀有害生物活性成分的大肠杆菌。
5、在该方面的一些实施例中，其可以与前述实施例中任一项组合，组合物作为叶面处理、注射处理、出苗前处理、和出苗后处理中的至少一种应用于植物。在该方面的其他实施例中，其可以与前述实施例中任一项组合，将组合物配制为以下中的至少一种：即用型(rtu)配制品、悬浮液浓缩物、罐混合物、气溶胶、种子处理、根浸渍、土壤处理、灌溉配制品、喷洒配制品、和浸透处理。在该方面的一些实施例中，将组合物配制为种子处理。在该方面的另外的实施例中，组合物以约1x 102至约1x 109颗粒/种子的比率应用，并且其中比率根据种子大小来确定。在该方面的另外的实施例中，组合物以约1x 104颗粒/种子的比率应用。在该方面的其他实施例中，将组合物配制为根浸渍。在该方面的另外的实施例中，组合物以约1x 103至约1x 108颗粒/植物根系的比率应用。该方面的另外的实施例可以与前述实施例中任一项组合，进一步包括农用化学表面活性剂，其中该农用化学表面活性剂改善以下特征中的至少一种：喷雾性、铺展性、和可注射性。在该方面的另外的实施例中，液体载剂相是水性或油性的。
6、该方面的其他实施例可以与前述实施本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种杀有害生物组合物，其包含：
2.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该多个杀有害生物微细胞的至少一部分进一步包含以下中的至少一种：外源杀有害生物蛋白质毒素、外源杀有害生物核酸、和外源杀有害生物活性成分。
3.如权利要求2所述的杀有害生物组合物，其中该多个杀有害生物微细胞的该部分进一步包含外源表达盒，该外源表达盒被编码以表达该外源杀有害生物蛋白质毒素和该外源杀有害生物核酸中的任一种或两种，其中该外源杀有害生物蛋白质毒素包含Pir毒素和Cry毒素中的至少一种，并且其中该外源杀有害生物核酸是双链RNA(dsRNA)或发夹RNA(hpRNA)。
4.如权利要求2所述的杀有害生物组合物，其中该外源杀有害生物活性成分选自由以下组成的组：具有杀真菌活性的成分、具有杀昆虫活性的成分、具有杀线虫活性的成分、具有选择性除草活性的成分、具有杀细菌活性的成分、以及具有广谱活性的成分。
5.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该亲代细菌的细胞分配功能中的修饰包括以下中的至少一种修饰：z-环抑制蛋白、细胞分裂拓扑特异性因子、或隔膜机构组分；其中
6.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌选自由以下组成的组：除虫链霉菌、刺糖多孢菌、苏云金芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌、双酶梭菌、日本金龟子芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、发光杆菌、嗜线虫致病杆菌、嗜虫沙雷氏菌、嗜虫耶尔森氏菌、喜昆虫假单胞菌、伯克霍尔德氏菌属物种、萨布茨格色杆菌和大肠杆菌。
7.如权利要求6所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌选自由以下组成的组：枯草芽孢杆菌菌株RTI477、枯草芽孢杆菌菌株ATCC 6633、枯草芽孢杆菌菌株ATCC21332、枯草芽孢杆菌菌株168、枯草芽孢杆菌菌株ATCC 9943、枯草芽孢杆菌菌株QST713、和枯草芽孢杆菌菌株NCIB 3610，萎缩芽孢杆菌菌株ABI02A DSM 32019、萎缩芽孢杆菌菌株ABI03 DSM 32285、萎缩芽孢杆菌菌株ABI05DSM 24918，解淀粉芽孢杆菌菌株RTI301、解淀粉芽孢杆菌FZB24、解淀粉芽孢杆菌FZB42、解淀粉芽孢杆菌BA-1、解淀粉芽孢杆菌LMG 5-29032、解淀粉芽孢杆菌MBI600、解淀粉芽孢杆菌CECT8836、和解淀粉芽孢杆菌M4(S499)。
8.如权利要求6所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌是发光杆菌，并且其中该杀有害生物微细胞包含外源杀有害生物蛋白质毒素Pir。
9.如权利要求6所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌是枯草芽孢杆菌，并且其中该杀有害生物微细胞包含该外源杀有害生物分子。
10.如权利要求6所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌是经遗传修饰的表达一种或多种外源杀有害生物活性成分的大肠杆菌。
11.如权利要求1-10中任一项所述的杀有害生物组合物，其中该组合物作为叶面处理、注射处理、出苗前处理、和出苗后处理中的至少一种应用于该植物。
12.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中将该组合物配制为以下中的至少一种：即用型(RTU)配制品、悬浮液浓缩物、罐混合物、气溶胶、种子处理、根浸渍、土壤处理、灌溉配制品、喷洒配制品、和浸透处理。
13.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其进一步包含农用化学表面活性剂，其中该农用化学表面活性剂改善以下特征中的至少一种：喷雾性、铺展性、和可注射性。
14.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该液体载剂相是水性或油性的。
15.如权利要求2所述的杀有害生物组合物，其进一步包含以下中的至少一种：分散在该载剂相中的外源杀有害生物蛋白质毒素、外源杀有害生物核酸、和外源杀有害生物活性成分，其中该外源杀有害生物蛋白质毒素包含Pir毒素和Cry毒素，并且其中该外源杀有害生物核酸是双链RNA(dsRNA)或其前体、发夹RNA(hpRNA)或其前体、或微RNA(miRNA)或其前体。
16.如权利要求15所述的杀有害生物组合物，其中该外源杀有害生物活性成分选自由以下组成的组：具有杀真菌活性的成分、具有杀昆虫活性的成分、具有杀线虫活性的成分、具有选择性除草活性的成分、具有杀细菌活性的成分、以及具有广谱活性的成分。
17.如权利要求2所述的杀有害生物组合...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种杀有害生物组合物，其包含：
2.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该多个杀有害生物微细胞的至少一部分进一步包含以下中的至少一种：外源杀有害生物蛋白质毒素、外源杀有害生物核酸、和外源杀有害生物活性成分。
3.如权利要求2所述的杀有害生物组合物，其中该多个杀有害生物微细胞的该部分进一步包含外源表达盒，该外源表达盒被编码以表达该外源杀有害生物蛋白质毒素和该外源杀有害生物核酸中的任一种或两种，其中该外源杀有害生物蛋白质毒素包含pir毒素和cry毒素中的至少一种，并且其中该外源杀有害生物核酸是双链rna(dsrna)或发夹rna(hprna)。
4.如权利要求2所述的杀有害生物组合物，其中该外源杀有害生物活性成分选自由以下组成的组：具有杀真菌活性的成分、具有杀昆虫活性的成分、具有杀线虫活性的成分、具有选择性除草活性的成分、具有杀细菌活性的成分、以及具有广谱活性的成分。
5.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该亲代细菌的细胞分配功能中的修饰包括以下中的至少一种修饰：z-环抑制蛋白、细胞分裂拓扑特异性因子、或隔膜机构组分；其中该z-环抑制蛋白选自由以下组成的组：minc多肽、mind多肽和mine多肽；其中该细胞分裂拓扑特异性因子选自由以下组成的组：mine多肽和diviva多肽；并且其中该隔膜机构组分选自由以下组成的组：ftsz多肽和ftsa多肽。
6.如权利要求1所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌选自由以下组成的组：除虫链霉菌、刺糖多孢菌、苏云金芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌、双酶梭菌、日本金龟子芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、发光杆菌、嗜线虫致病杆菌、嗜虫沙雷氏菌、嗜虫耶尔森氏菌、喜昆虫假单胞菌、伯克霍尔德氏菌属物种、萨布茨格色杆菌和大肠杆菌。
7.如权利要求6所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌选自由以下组成的组：枯草芽孢杆菌菌株rti477、枯草芽孢杆菌菌株atcc 6633、枯草芽孢杆菌菌株atcc21332、枯草芽孢杆菌菌株168、枯草芽孢杆菌菌株atcc 9943、枯草芽孢杆菌菌株qst713、和枯草芽孢杆菌菌株ncib 3610，萎缩芽孢杆菌菌株abi02a dsm 32019、萎缩芽孢杆菌菌株abi03 dsm 32285、萎缩芽孢杆菌菌株abi05dsm 24918，解淀粉芽孢杆菌菌株rti301、解淀粉芽孢杆菌fzb24、解淀粉芽孢杆菌fzb42、解淀粉芽孢杆菌ba-1、解淀粉芽孢杆菌lmg 5-29032、解淀粉芽孢杆菌mbi600、解淀粉芽孢杆菌cect8836、和解淀粉芽孢杆菌m4(s499)。
8.如权利要求6所述的杀有害生物组合物，其中该杀有害生物亲代细菌是发光杆菌，并且其中该杀有害生物微细胞包含外源杀有害生物蛋白质毒素pir。
9.如权利要求6所述的杀有害生物组...
【专利技术属性】
技术研发人员：迈尔·史蒂夫·阿文道·阿玛多，罗摩·克里希纳·辛哈德里，杜安·李·克里斯滕森二世，詹姆士·亚伦·克莱默，
申请(专利权)人：英薇艾欧科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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