【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物免疫检测领域，具体涉及一种用于检测幽门螺杆菌(hp)的检测试剂盒和相应的检测方法。
技术介绍
1、当涉及到幽门螺旋杆菌(hp)感染的诊断和检测时，有一些重要的因素需要考虑。hp感染通常不会引起明显的症状，但如果未及时诊断和治疗，可能会导致严重的胃部疾病，包括慢性胃炎、消化性溃疡、原发性胃b细胞淋巴瘤和胃癌。因此，确保准确的hp感染检测方法对于患者的健康至关重要。
2、hp是一种革兰氏阴性杆菌，其名称源自其形态特征，即其细胞呈螺旋状。它居住在胃的粘膜层中，通常附着在幽门附近的胃窦和胃体粘膜上。这种微生物的特殊位置使其相对难以访问，因为它不直接暴露于胃酸和胃液的侵蚀。然而，hp感染可以引发一系列严重的胃部疾病，其中最常见的是慢性胃炎和消化性溃疡。
3、一般而言，hp感染可以分为两个主要类型，即i型和ii型。i型hp菌株通常具有较高的病原性，容易引发胃病，而ii型感染通常没有临床症状，或者症状较轻。在hp感染的研究和诊断中，区分这两种类型的能力变得非常重要，因为它们可能需要不同的治疗方法和管理策略。
4、目前，医学界已经开发了多种hp检测方法，以满足不同患者和临床环境的需求。以下是一些常见的hp检测方法：
5、侵入性方法：
6、胃镜检查：这是一种常用的方法，通过内窥镜检查来采集胃黏膜组织样本。然后可以使用不同的技术，如快速脲酶试验(rut)、病理染色或细菌培养，来检测组织样本中是否存在hp。尽管这是一种直接的检测方法，但它需要侵入性检查，可能会引发不适。p>
7、组织生物标志物：这种方法涉及检测胃内hp感染的生物标志物，如抗体或分子，通过采集组织样本或胃黏膜刷片。这些生物标志物的存在可以帮助诊断感染，但同样需要侵入性过程。
8、非侵入性方法：
9、13c尿素呼气试验：这是一种无创的方法，患者只需饮用带有标记的13c尿素的溶液，然后检测其呼出气体中的13co2含量。hp感染者的胃内会产生尿素酶，将尿素分解为13co2，因此可以检测到。这是一种非常有效的方法，但通常需要在胃部手术后的4-8周内进行。
10、pcr检测：这是一种分子生物学方法，通过检测患者生物样本中的hp dna来确认感染。这种方法需要实验室设备和技术，并且需要一定的时间。
11、抗体检测：这是一种简便的方法，通过检测患者血清中的hp特异性抗体来诊断感染。酶联免疫吸附试验(elisa)和蛋白质印迹法是常用的抗体检测方法。然而，它们目前的灵敏度和特异性可能需要改进。
12、虽然已经有多种检测方法可供选择，但每种方法都具有一些局限性。例如，侵入性方法可能会引发不适，而非侵入性方法的灵敏度和特异性可能需要改进。针对hp检测方法的改进，有一些可能的方向和考虑因素：
13、灵敏度和特异性：改进抗体检测方法以提高其对hp抗体的检测能力，从而减少假阴性和假阳性结果。
14、简便性：研究和开发更简便、快速的非侵入性hp检测方法，以满足儿童、孕妇和不适合内窥镜检查的患者的需求。这些方法可以在更早的阶段进行诊断，从而更好地管理感染。
15、生物标志物：探索新的生物标志物或生物分子，如hp感染特异性分子，用于开发新的检测方法。这些生物标志物可能比抗体更早地出现，使得更早的诊断成为可能。
16、分子诊断技术：改进pcr和其他分子诊断技术，使其更快速、准确且易于操作。这些技术可以成为更便携式的诊断工具，适用于不同的临床设置。
17、移动健康应用程序：开发基于智能手机或便携设备的hp检测应用程序，使患者可以在家中进行自测并获取结果，从而提高检测的便捷性。这些应用程序可以帮助监测hp感染的扩散和流行病学。
18、总之，hp感染的早期诊断对于预防相关胃疾病至关重要。不断改进和创新hp检测方法是一个具有潜力的研究领域，可以提高检测的准确性和便捷性，以确保患者能够及时接受治疗，减少与hp感染相关的健康风险。这对于改善患者的生活质量和降低医疗成本都具有积极作用。因此，急需更多创新的hp检测方法，以满足全球范围内的医疗需求。
技术实现思路
1、为了解决现有技术存在的问题，本专利技术的创造者进行了多次尝试，旨在通过噬菌体展示抗体库的方法分离出特异性针对幽门螺杆菌(hp)的重链单域抗体。本专利技术的实施例提供了一种特异性针对hp的抗体以及与其相关的应用。
2、具体地，所述重链单域抗体的序列如下表1所示。
3、表1：单域抗体的全序列及其cdr
4、
5、为了应对现有技术的挑战，开发者经过不断尝试，旨在分离出针对幽门螺杆菌(hp)的特异性重链单域抗体。本专利技术的实施例提供了一种特异性针对hp的抗体，以及与之相关的应用。
6、针对幽门螺杆菌(hp)的抗体，例如单域抗体ayc03、ayc09，其重链的cdr1、cdr2和cdr3区的氨基酸序列在上述表格中以加粗斜体显示。
7、本专利技术提供了一种抗hp抗体或其抗原结合片段的核酸分子，其编码上述表格中所示的重链单域抗体或其变体。
8、本专利技术还涉及编码抗hp抗体的核酸分子，以及包含这些核酸分子的表达载体和宿主细胞。
9、本专利技术还包括制备抗hp抗体的方法，其包括培养包含本专利技术的核酸分子的微生物，例如细菌，或通过多肽合成的方式制备本专利技术的抗体。
10、本专利技术还涉及抗hp抗体的应用，尤其是在诊断与hp相关的疾病方面的用途和方法。
11、此外，本专利技术提供了针对hp的抗体变体，这些变体可以是人源化的或具有高度相似性(例如至少99％、95％、90％等)的变体。
12、本专利技术的抗体可以具有多种类型，如骆驼抗体或单结构域抗体、双或三特异性抗体等。优选的抗体包括ayc03、ayc09的vhh或其人源化变体。
13、本专利技术还提供了融合蛋白，其中融合了本专利技术的抗体或其变体以及标签序列(如poly-his)的融合蛋白，以利于分离纯化。或者，包含fc区域，以增加半衰期。
14、此外，本专利技术还提供了表达抗体或其抗原结合片段的多核苷酸的分离物，这些多核苷酸可以表达本专利技术的抗体及其变体，或其抗原结合片段；或者这些多核苷酸可以表达本专利技术的融合蛋白。
15、本专利技术还提供了载有上述多核苷酸的载体，优选为质粒载体。
16、本专利技术还包括宿主细胞，其中包含上述多核苷酸或载体，优选为真核细胞。
17、本专利技术还提供了检测样品中是否含有hp的方法，其中包括将本专利技术的抗体及其变体，或其抗原结合片段，或融合蛋白与样品接触的步骤。这种检测可以用于诊断或非诊断目的。
18、最后，本专利技术还提供了检测产品，其中包含本专利技术的抗体及其变体，或其抗原结合片段，这些产品可以是检测试剂、试剂盒、芯片或试纸等。
19、考虑到本专利技术采用了小分子量的单域抗体，为了最大程度减少检测幽门螺旋杆菌时的假阴性风险，可以考虑将本专利技术的重链本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.针对幽门螺旋杆菌抗体及其变体，所述针对幽门螺旋杆菌抗体包含名称为AYC03、AYC09的VHH的3个互补决定区CDR1、CDR2和CDR3，
2.根据权利要求1所述的抗体及其变体，所述变体为人源化变体。
3.如权利要求1-2中任一项所述的抗体及其变体，其选自骆驼抗体、scFv、双或三特异性抗体。
4.融合蛋白，其包含权利要求1-3中任一项所述的抗体及其变体。
5.如权利要求4所述的融合蛋白，其融合了标签序列(如组氨酸标签)或免疫球蛋白的Fc。
6.分离的表达抗体或其抗原结合片段的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸能够表达权利要求1-3中任一项所述的抗体及其变体；所述多核苷酸能够表达权利要求4-5中任一项所述的融合蛋白。
7.载体，其包含根据权利要求6所述的多核苷酸，优选为质粒载体。
8.宿主细胞，其包含根据权利要求6所述的多核苷酸或权利要求7所述的载体，优选地，所述宿主细胞是真核细胞。
9.检测样品中是否含有幽门螺旋杆菌的方法，其包括将权利要求1-3中任一项所述的抗体及其变体，权利
10.一种检测产品，其包含权利要求1-3中任一项所述的抗体及其变体，优选地，所述产品选自检测试剂、试剂盒、芯片或试纸中一种或多种。
...【技术特征摘要】
1.针对幽门螺旋杆菌抗体及其变体，所述针对幽门螺旋杆菌抗体包含名称为ayc03、ayc09的vhh的3个互补决定区cdr1、cdr2和cdr3，
2.根据权利要求1所述的抗体及其变体，所述变体为人源化变体。
3.如权利要求1-2中任一项所述的抗体及其变体，其选自骆驼抗体、scfv、双或三特异性抗体。
4.融合蛋白，其包含权利要求1-3中任一项所述的抗体及其变体。
5.如权利要求4所述的融合蛋白，其融合了标签序列(如组氨酸标签)或免疫球蛋白的fc。
6.分离的表达抗体或其抗原结合片段的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸能够表达权利要求1-3中任一项所述的抗...
【专利技术属性】
技术研发人员：约翰·泰勒·徐，
申请(专利权)人：EZZ生命科学控股有限公司，
类型：发明
国别省市：
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