一种小鼠巨噬细胞的Ｇｉｅｍｓａ染色方法技术

本发明专利技术公开了一种小鼠巨噬细胞的Ｇｉｅｍｓａ染色方法，包括以下实施步骤：１）细胞培养；２）细胞预处理；３）Ｇｉｅｍｓａ染色；Ｇｉｅｍｓａ染色的最适条件为小圆玻片用前处理烘干后，甲醇固定３ｍｉｎ，过滤的中性染液（ｐＨ７．０～７．４）染色３ｍｉｎ，１×ＰＢＳ缓冲液洗涤。利用本发明专利技术的Ｇｉｅｍｓａ染色方法可以明显的区分出被染色后的细胞核和细胞质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种Giemsa的染色方法，具体涉及一种小鼠巨噬细胞的Giemsa的染 色方法。
技术介绍
光学显微镜仍是目前观察细胞形态使用的最普遍和方便的工具。但大多数细胞在 可见光下几乎是透明的，不经染色在光学显微镜下无法看清结构。染色可使细胞不同结构 显示区别的颜色特征，便于直接观察细胞的生物学特征。Giemsa染液由天青和伊红组成，细胞中的碱性物质与酸性染料伊红结合，呈粉红 色；酸性物质与碱性染料天青结合，呈紫蓝色；中性物质可与两种染料同时结合，呈淡紫 色。Giemsa染色法能将细胞核和细胞质同时染色，操作简便快捷，但染料配制技术和 染色条件不易准确掌握。
技术实现思路
为克服现有技术中的不足，本专利技术的目的是提供一种小鼠巨噬细胞的Giemsa染 色方法，经该方法染色后的细胞，胞核和胞质界限清晰可见。为解决上述技术问题，本专利技术采用了一下技术方案，包括以下实施步骤1)细胞培养；2)细胞预处理；3) Giemsa 染色；进一步的，所述步骤1的细胞培养过程如下将小鼠巨噬细胞用含10% FBS的 RPMI培养基于37°C、5% CO2的条件下培养，隔日传代。进一步的，所述步骤2的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小鼠巨噬细胞的Ｇｉｅｍｓａ染色方法，包括以下实施步骤：１）细胞培养；将小鼠巨噬细胞用含１０％ＦＢＳ的ＲＰＭＩ培养基于３７℃、５％ＣＯ２的条件下培养，隔日传代；２）细胞预处理；将培养至对数生长期的小鼠巨噬细胞用胰酶消化后，于含１０％ＦＢＳ的ＲＰＭＩ培养基中以１５００ｒ／ｍｉｎ的转速离心５ｍｉｎ后洗涤２次，将细胞浓度调整为１×１０５个／ｍｌ，加入铺有小圆玻片的２４孔板中，每孔１ｍｌ，在３７℃、５％ＣＯ２的条件下平衡１２ｈ待用；３）Ｇｉｅｍｓａ染色；其特征在于：所述Ｇｉｅｍｓａ染色的过程如下：取出平衡１２ｈ后的小圆玻片，烘干，甲醇固定３ｍｉｎ，将Ｇｉｅｍｓａ染液ＰＨ值调制到７．０－７．４之间并过...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴淑燕，储元元，黄瑞，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]