一种制备高表达冷休克蛋白保加利亚乳杆菌剂的方法技术

本发明专利技术涉及一种制备高表达冷休克蛋白保加利亚乳杆菌剂的方法，包括如下步骤：保加利亚乳杆菌发酵液加入大豆卵磷脂混合均匀，置于恒温水浴中处理，离心，弃去上清液，收集菌体，加入冻干保护剂混匀，真空干燥得到冻干菌粉。冻干保护剂含有脱脂奶粉、乳糖、抗坏血酸和大豆卵磷脂。在保加利亚乳杆菌诱导CspA表达和冻干过程中加入大豆卵磷脂，可以提高菌液体系的稳定性，增强细胞的抗逆性，保护细胞膜的完整性，帮助乳杆菌更好地应对冻干过程中的挑战，使得保加利亚乳杆菌冻干后的存活率得到显著提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及菌体冻干保护，具体涉及一种制备高表达冷休克蛋白保加利亚乳杆菌剂的方法。

技术介绍

1、保加利亚乳杆菌（lactobacillus bulgaricus）属于德氏乳杆菌属保加利亚亚种，革兰染色阳性、兼性厌氧、不移动、不产芽孢的乳酸菌（lactic acid bacterium，lab），因其能赋予酸奶独特的口味，目前被广泛应用于酸奶的发酵；此外，保加利亚乳杆菌具有调节肠道菌群平衡、增强免疫力、抵御病原微生物的侵袭等生理作用，因此被广泛应用于保健品及药品的主要成分；保加利亚乳杆菌可通过液体发酵的方法大量获得，并通过冷冻干燥的方法制得菌粉，菌粉是菌种的最佳保存方式，因此可用作酸奶的直投式发酵剂、药品以及保健品领域。

2、在工业生产过程中，冻干过程会对保加利亚乳杆菌造成严重损伤，主要表现在冰晶的形成对细胞膜产生的机械性损伤，蛋白质的变性失活，细胞膜通透性的改变，dna损伤等因素；然而菌体为了适应低温环境，也会产生冷应激反应，生成一系列的抗低温蛋白，即冷休克蛋白（cold shock proteins，csps）来抵御低温环境对菌体造成的损本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种保加利亚乳杆菌冻干保护剂，其特征在于，所述冻干保护剂含有10-40%脱脂奶粉，5-15%乳糖，5-20%抗坏血酸，0.05-0.35%大豆卵磷脂。

2.一种制备高表达冷休克蛋白保加利亚乳杆菌剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）保加利亚乳杆菌发酵液与0.2%-0.75%大豆卵磷脂液混合均匀，所述发酵液与大豆卵磷脂液的混合比例为1:0.5-1.5（V/V），置于12-25℃恒温水浴中处理2-5h，离心，弃去上清液，收集菌体；

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中的大豆卵磷脂的浓度为0.2%-0.6%。

4.根据权利要求2所述...

【技术特征摘要】

1.一种保加利亚乳杆菌冻干保护剂，其特征在于，所述冻干保护剂含有10-40%脱脂奶粉，5-15%乳糖，5-20%抗坏血酸，0.05-0.35%大豆卵磷脂。

2.一种制备高表达冷休克蛋白保加利亚乳杆菌剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）保加利亚乳杆菌发酵液与0.2%-0.75%大豆卵磷脂液混合均匀，所述发酵液与大豆卵磷脂液的混合比例为1:0.5-1.5（v/v），置于12-25℃恒温水浴中处理2-5h，离心，弃去上清液，收集菌体；

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中的大豆卵磷脂的浓度为0.2%-0.6%。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中的大豆...

【专利技术属性】
技术研发人员：关海滨，贾鑫，麻剑南，李晶，张英，梁宇光，董至恒，田欣圆，刘梦呵，岳艳君，赵璟，
申请(专利权)人：内蒙古医科大学，
类型：发明
国别省市：