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用于将核酸有效细胞内递送至免疫细胞的树枝状肽缀合聚合物制造技术

技术编号:40080854 阅读:34 留言:0更新日期:2024-01-17 02:43
本发明专利技术提供了用于将多核苷酸序列递送至细胞、具体为包括树突细胞的免疫细胞的纳米载体以及使用方法。相比现有技术的方法,这些方法提供了改善的递送和降低的毒性。本公开内容的方法提供了一种将核酸递送至细胞的系统,该系统由合成的PEG‑b‑PPS‑接头‑DP聚合物组成,用于生产包含与树枝状特异性支链阳离子肽(DP)缀合的聚乙二醇‑嵌段‑聚丙烯硫醚共聚物(PEG‑b‑PPS)的纳米结构。该系统提供了一种无毒的将多核苷酸递送至包括树突细胞的免疫细胞的体外方法,包括将细胞培养基中的细胞与纳米载体接触,其中该方法对细胞无毒。本发明专利技术中描述的方法可用于治疗需要基因治疗的受试者,包括向受试者施用有效量的包含多核苷酸的系统,其中多核苷酸含有用于基因治疗的感兴趣的基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍


技术实现思路

【技术保护点】

1.一种用于生产纳米结构的合成PEG-b-PPS-接头-DP聚合物,其包含与树枝状特异性支链阳离子肽(DP)缀合的聚乙二醇-嵌段-聚丙烯硫醚共聚物(PEG-b-PPS)。

2.根据权利要求1所述的合成PEG-b-PPS-接头-DP聚合物,其中通过接头缀合PEG-b-PPS,任选地,其中接头是二硫键(-ss-)。

3.根据权利要求1所述的合成PEG-b-PPS-接头-DP聚合物,其中

4.根据前述权利要求中任一项所述的合成PEG-b-PPS-接头-DP聚合物,其中DP是SEQID NO:1的肽。

5.根据前述权利要求中任一项所述的合成PEG-b-PPS-接头-DP聚合物,其中聚合物是PEGm-b-PPSn,其中m和n各自是选自1-500的整数。

6.一种用于将核酸递送至细胞的纳米载体系统,该系统包含:

7.根据权利要求6所述的纳米载体系统,其中PEG-b-PPS-接头-DP纳米结构的PEG重量分数为0.17-0.45。

8.根据权利要求6或7所述的纳米载体系统,其中PEG-b-PPS-接头-DP纳米结构的PPS重量分数为0.25-0.80。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的纳米载体系统,其中PEG-b-PPS-接头-DP纳米结构的DP是SEQ ID NO:1的肽。

10.根据权利要求6-9中任一项所述的纳米载体系统,其中多核苷酸是DNA,优选地,其中DNA是编码感兴趣的蛋白质、肽或其片段的质粒DNA、DNA构建体或多核苷酸序列。

11.根据权利要求10所述的纳米载体系统,其中PEG-b-PPS-ss-DP:DNA的质量比(w/w)为5:1至50:1。

12.根据权利要求10所述的纳米载体系统,其中PEG-b-PPS-ss-DP:DNA的质量比(w/w)为15:1至120:1。

13.根据权利要求6-12中任一项所述的纳米载体系统,其中聚合物组分是PEGm-b-PPSn,其中m和n各自是选自1-500的整数。

14.一种用于将多核苷酸序列递送至细胞的方法,该方法包括将根据权利要求6-13中任一项所述的纳米载体系统与细胞接触或施用于细胞。

15.根据权利要求14所述的方法,其中PEG-b-PPS-接头-DP纳米结构的DP是SEQ ID NO:1的肽。

16.根据权利要求14或15所述的方法,其中多核苷酸是DNA或RNA。

17.根据权利要求14-16中任一项所述的方法,其中PEG-b-PPS-接头-DP:DNA的质量比(w/w)为5:1至50:1。

18.根据权利要求14-17中任一项所述的方法,其中PEG-b-PPS-接头-DP:DNA的质量比(w/w)为15:1至120:1。

19.根据权利要求14-18中任一项所述的方法,其中与没有缀合DP相比,缀合DP不对细胞产生细胞毒性。

20.根据权利要求14-19中任一项所述的方法,其中细胞是免疫细胞,优选地,细胞是树突细胞。

21.根据权利要求14-20中任一项所述的方法,其中细胞在体外。

22.一种转染免疫细胞以将多核苷酸序列递送至免疫细胞的细胞核的方法,该方法包括将根据权利要求6-13中任一项所述的系统与免疫细胞接触足够长的时间以将多核苷酸序列递送至免疫细胞的细胞核。

23.根据权利要求22所述的方法,其中细胞在体外。

24.根据权利要求21或22所述的方法,其中多核苷酸编码治疗剂或细胞因子。

25.一种无毒的转导细胞的方法,该方法包括:

26.根据权利要求25所述的方法,其中在步骤(a)和(b),在包含血清的培养基中培养细胞。

27.根据权利要求25或26所述的方法,其中该方法在体外进行。

28.根据权利要求25-27中任一项所述的方法,其中至少50%的细胞转导有多核苷酸。

29.根据权利要求25-28中任一项所述的方法,其中细胞是免疫细胞,优选地,细胞是树突细胞。

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于生产纳米结构的合成peg-b-pps-接头-dp聚合物,其包含与树枝状特异性支链阳离子肽(dp)缀合的聚乙二醇-嵌段-聚丙烯硫醚共聚物(peg-b-pps)。

2.根据权利要求1所述的合成peg-b-pps-接头-dp聚合物,其中通过接头缀合peg-b-pps,任选地,其中接头是二硫键(-ss-)。

3.根据权利要求1所述的合成peg-b-pps-接头-dp聚合物,其中

4.根据前述权利要求中任一项所述的合成peg-b-pps-接头-dp聚合物,其中dp是seqid no:1的肽。

5.根据前述权利要求中任一项所述的合成peg-b-pps-接头-dp聚合物,其中聚合物是pegm-b-ppsn,其中m和n各自是选自1-500的整数。

6.一种用于将核酸递送至细胞的纳米载体系统,该系统包含:

7.根据权利要求6所述的纳米载体系统,其中peg-b-pps-接头-dp纳米结构的peg重量分数为0.17-0.45。

8.根据权利要求6或7所述的纳米载体系统,其中peg-b-pps-接头-dp纳米结构的pps重量分数为0.25-0.80。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的纳米载体系统,其中peg-b-pps-接头-dp纳米结构的dp是seq id no:1的肽。

10.根据权利要求6-9中任一项所述的纳米载体系统,其中多核苷酸是dna,优选地,其中dna是编码感兴趣的蛋白质、肽或其片段的质粒dna、dna构建体或多核苷酸序列。

11.根据权利要求10所述的纳米载体系统,其中peg-b-pps-ss-dp:dna的质量比(w/w)为5:1至50:1。

12.根据权利要求10所述的纳米载体系统,其中peg-b-pps-ss-dp:dna的质量比(w/w)为15:1至120:1。

13.根据权利要求6-12中任一项所述的纳米载体系统,其中聚合物组分是pegm-b-ppsn,其中m和n各自...

【专利技术属性】
技术研发人员:E·A·斯科特S·易
申请(专利权)人:西北大学
类型:发明
国别省市:

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