一种检测金黄色葡萄球菌的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测金黄色葡萄球菌的试剂盒，它包括如下部分：1)适配体；所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；2)CRISPR/Cas12a反应体系；所述反应体系中的试剂包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的crRNA、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的ssDNA探针。本发明专利技术适配体联合CRISPR系统检测金黄色葡萄球菌可以在保证方法学特异性的基础上实现高灵敏度检测金黄色葡萄球菌，解决了现有金黄色葡萄球菌检测成本高、检测方案复杂、检测时间过长的问题，具备实际推广应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物分子检测，具体涉及一种检测金黄色葡萄球菌的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，可引起各种组织和器官感染，包括肺炎、脑膜炎、菌血症、尿路感染等。早期检测是诊治相关的细菌性感染疾病的关键。如何实现快速灵敏、可广泛应用于临床的检测技术是目前的一大难题，开发简便快速高效特异的检测方法在公共卫生预防和感染性疾病控制过程中具有重要意义。

2、目前，传统的金黄色葡萄球菌的检测方法主要包括微生物培养法、分子生物学检测方法和免疫分析技术。微生物培养法是金标方法，但该法耗时较长，无法满足快速检测的需要。分子生物学检测技术灵敏度较高，但该法需要精密仪器和专业的技术人员。基于抗体技术的免疫学检测具有简便、快速等特点，但该类方法抗体制备成本较高。另外在一些文献中也报道了关于金黄色葡萄球菌检测的最新进展。例如，通过表面增强拉曼光谱检测金黄色葡萄球菌，然而，激发拉曼光谱需要特定的仪器；还有用比色法检测的，比色法灵敏度受限，这限制了其在实际样品检测中的应用。

3、近年来，基于适配体的生物传感技术得到发展，生本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测金黄色葡萄球菌的试剂盒，其特征在于：它包括如下部分：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述反应体系还包括如下试剂：NEB缓冲液、Cas蛋白、RNA酶抑制剂和水。

3.权利要求1或2所述试剂盒在制备检测体液中金黄色葡萄球菌的试剂盒中的用途。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：检测体液中金黄色葡萄球菌的试剂盒的使用步骤包括：

5.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：步骤a所述待测样品、阳性对照品和系列标准曲线溶液与适配体的体积比为4～20：1～5，优选8:2；所述适配体的浓度为1μM。>

6.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种检测金黄色葡萄球菌的试剂盒，其特征在于：它包括如下部分：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述反应体系还包括如下试剂：neb缓冲液、cas蛋白、rna酶抑制剂和水。

3.权利要求1或2所述试剂盒在制备检测体液中金黄色葡萄球菌的试剂盒中的用途。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：检测体液中金黄色葡萄球菌的试剂盒的使用步骤包括：

5.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：步骤a所述待测样品、阳性对照品和系列标准曲线溶液与适配体的体积比为4～20：1～5，优选8:2；所述适配体的浓度为1μm。

6.根据权利要求4或5所述的用途，其特征在于：步骤a所述混合的温度37℃，时间为15min。

7.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：步骤b所述crispr/cas12a反应体系中各...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘靳波，张丽梅，李宝林，徐学静，
申请(专利权)人：西南医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：