【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体领域，具体涉及一种a-fabp单克隆抗体2b8及其制备方法和用途。
技术介绍
1、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocyte-type fatty acid binding protein,a-fabp)是载脂蛋白家族的成员之一，分子量为14.6kd，主要表达在成熟脂肪细胞和巨噬细胞中。a-fabp蛋白主要功能是作为游离脂肪酸分子的载体，在脂肪细胞中调节脂肪的储存和分解；在巨噬细胞中调节脂质的累积和促进多种炎性因子的表达，包括mcp-1、tnf-α、il-6、il-1β等。a-fabp蛋白可分泌到细胞外和血液中，促进炎症反应，同时与多种代谢疾病如肥胖、糖尿病、脂代谢紊乱、非酒精性脂肪肝炎、动脉粥样硬化等发生发展密切相关。而在动物实验中，小鼠移植a-fabp基因敲除鼠骨髓已被证明可以全面改善动脉粥样硬化，并且没有代谢副作用；同时a-fabp基因突变导致a-fabp表达水平降低的小鼠，具有较低的甘油三酯水平，降低了心血管疾病的风险，并且减少肥胖引起的2型糖尿病。有关研究还阐明了a-fabp蛋白在巨噬细胞中通过jnk/c-jun/ap-1信号轴上调多种炎症因子表达的分子机制，并证实在发生缺血性脑卒中后，血液中和脑组织中的a-fabp蛋白表达水平都上升，促进炎性因子的表达，从而加剧脑卒中后神经炎症。因此，a-fabp可作为潜在的改善代谢性疾病和相关的心脑血管疾病的治疗靶点。
2、鉴于a-fabp蛋白在代谢类疾病及其心脑血管并发症中的重要作用，世界上多个制药公司和科研机构研发了数以百计的a-fabp蛋白抑制
3、作为生物学研究领域应用最广泛的工具，抗体产品的地位毋庸置疑。而抗体的特异性和应用范围长久以来困扰着抗体产业，也是整个生物学研究领域的极大危机。抗体产品糟糕的质量会直接导致实验结果的误差，以及研究结果无法被重复和再现。研究项目的进展往往会因为抗体带来的问题停滞不前，由此造成的损失也是惊人的。据2015年的数据统计，仅在美国，平均每年就有3.5亿美元被浪费在这些无效抗体上。而在世界范围内，每年竟有8亿美元被浪费，占到了全球科研抗体总开销的50％。
技术实现思路
1、本专利技术涉及一种抗a-fabp单克隆抗体及其制备方法和用途。用杂交瘤技术制备抗a-fabp单克隆抗体，可以用于elisa和免疫印迹等生物学研究实验。
2、本专利技术一个方面提供了一种分离的抗a-fabp的抗体或其抗原结合片段，其具有如seq id no:2、seq id no:3和seq id no:4所示的三个重链互补决定区(cdr)，并具有如seqid no:10、seq id no:11和seq id no:12所示的三个轻链互补决定区。
3、本专利技术另个方面提供了一种分离的抗a-fabp的抗体或其抗原结合片段，其具有如seq id no：1所示的重链可变区，如seq id no:9所示的轻链可变区。
4、本专利技术再一个方面提供了一种核苷酸序列，其特征在于：其编码如前述的抗a-fabp的单克隆抗体或其抗原结合片段。
5、在本专利技术的技术方案中，所述的抗体为单克隆抗体。
6、本专利技术再一个方面提供了一种杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株已于2022年6月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号cgmcc no.45187，其能够产生如上所述单克隆抗体或其抗原结合片段。
7、本专利技术再一个方面提供了一种重组载体，其特征在于：包含前述的核苷酸序列。
8、本专利技术再一个方面提供了一种宿主细胞，其特征在于：包含前述载体或载体组，优选地，所述宿主细胞是原核的或真核的，更优选的选自酵母细胞、哺乳动物细胞或适用于制备抗体或其抗原结合片段的其它细胞。
9、本专利技术再一个方面提供了一种试剂盒，所述试剂盒包含如前述的抗体或其抗原结合片段。
10、本专利技术再一个方面提供了一种检测试剂，所述检测试剂包含如前述的抗体或其抗原结合片段。
11、本专利技术再一个方面提供了上述抗体或其抗原结合片段作为检测试剂的用途，所述试剂用于以下用途的试剂：酶联免疫吸附检测(elisa)、免疫印迹(western blot)、流式细胞术(facs)、免疫组织化学(ihc)检测或者免疫pcr。
12、在上述在免疫学检测中，抗体或其抗原结合片段可单独或与通过化学键偶联，静电吸附或者亲疏水性吸附，而连接缀合物包括辣根过氧化物酶(hrp)，碱性磷酸酶(ap)，生物素(biotin)，异硫氰酸荧光素(fitc)，cy3、cy5、磁珠和琼脂糖等缀合物连接。
13、在本专利技术的技术方案中，检测试剂可用于非诊断的治疗目的检测。
14、本专利技术再一个方面提供了上述抗体或其抗原结合片段作为体外分离或纯化a-fabp的试剂的用途。
15、在本专利技术中，上述抗体或其抗原结合片段通过杂交瘤方法制备。
16、在本专利技术中，所述抗体或其抗原结合片段的重链和轻链可变区的核苷酸和氨基酸序列如下所示。
17、重链可变区氨基酸序列：
18、vklqesgpelvkpgssvkiscktsgytfteytmywvkqshgkslewigginpknggttynqkfkgkatltvdkssstaymelrsltsedsavyycargfaywgqgttvtvss seq id no.1
19、其中，重链可变区cdr1氨基酸序列为：eytmy seq id no.2
20、重链可变区cdr2氨基酸序列为：ginpknggttynqkfkg seq id no.3
21、重链可变区cdr3氨基酸序列为：gfay seq id no.4
22、重链可变区fr1氨基酸序列为：vklqesgpelvkpgssvkiscktsgytft seq id no.5
23、重链可变区fr2氨基酸序列为：wvkqshgkslewig seq id no.6
24、重链可变区fr3氨基酸序列为：katltvdkssstaymelrsltsedsavyycar seq idno.7
25、重链可变区fr4氨基酸序列为：wgqgttvtvss seq id no.8
26、轻链可变区氨基酸序列：
27、divmtqapatlsvtpgdsvslscrasqsisnnlhwfqqkshesprllikyasqsisgipsrfsg sgsgtdftlsin本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种分离的抗A-FABP的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于：其具有如SEQID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的三个重链互补决定区，并具有如SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的三个轻链互补决定区；
2.一种分离的抗A-FABP的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于：其具有如SEQID No:1所示的重链可变区，如SEQ ID No:9所示的轻链可变区。
3.一种核苷酸，其特征在于：其编码如权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
4.一种重组载体，其特征在于：包含权利要求3所述的核苷酸序列。
5.一种宿主细胞，其特征在于：包含权利要求4所述的重组载体；
6.一种检测A-FABP用的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含如权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
7.一种检测A-FABP用的检测试剂，其特征在于：所述检测试剂包含如权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段；
8.权利要求1或2所述
9.权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段在制备体外分离或纯化A-FABP的试剂中的用途。
10.一种杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株已于2022年6月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No.45187，其能够产生如权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
...【技术特征摘要】
1.一种分离的抗a-fabp的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于：其具有如seqid no:2、seq id no:3和seq id no:4所示的三个重链互补决定区，并具有如seq id no:10、seq id no:11和seq id no:12所示的三个轻链互补决定区；
2.一种分离的抗a-fabp的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于：其具有如seqid no:1所示的重链可变区，如seq id no:9所示的轻链可变区。
3.一种核苷酸，其特征在于：其编码如权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
4.一种重组载体，其特征在于：包含权利要求3所述的核苷酸序列。
5.一种宿主细胞，其特征在于：包含权利要求4所述的重组载体；<...
【专利技术属性】
技术研发人员：畅君雷，杨时伦，李思梦，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：
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