一种可用于民猪选育的15K液相芯片制备方法及基因分型方法技术

技术编号:40054165 阅读:36 留言:0更新日期:2024-01-16 21:40
一种可用于民猪选育的15K液相芯片制备方法及基因分型方法,本发明专利技术要解决目前缺少地方猪保种和选育用芯片、固相芯片不灵活的问题。本发明专利技术的民猪15K液相芯片由独立包装的民猪15K探针混合液和杂交捕获试剂构成,所述民猪15K探针为是针对民猪全基因组序列筛选的SNP位点设计并合成的核苷酸序列。利用本发明专利技术制备的民猪15K液相芯片与待测民猪DNA高通量测序文库混合,捕获待测民猪DNA高通量测序文库中包含目标位点的DNA片段进行扩增和纯化,产物经过高通量测序后,将测序结果回帖到猪参考基因组上进行比对,从而获取待测民猪的基因组基因分型。本发明专利技术可用于民猪保种和选育工作,解决我国目前缺少专门针对地方猪品种选育用芯片的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物育种,具体涉及一种可用于民猪选育的15k液相芯片制备方法及基因分型方法。


技术介绍

1、“种业振兴,良种先行”,优良种猪群体是现代生猪产业发展的前提和基础,在促进增产提效方面具有十分关键的作用。我国的地方猪遗传资源是五千年农耕文明流传下来的宝贵财富,是传承中华文明的鲜活载体,也是维护国家生态安全和农业安全的重要战略资源。保护好利用好地方猪遗传资源,对于提升我国畜牧业综合生产能力和核心竞争力,深入实施乡村振兴战略,更好满足广大人民日益增长、不断升级和个性化的畜产品需求意义重大。

2、由于遗传变异的存在,不同品种或群体才表现出表型差异。遗传变异主要通过遗传标记反映,目前被广泛应用的遗传标记是分子水平的snp标记。snp标记的主要检测方法为芯片检测法和高通量测序法。利用芯片进行snp检测,具有操作简便、通量高等特点,目前主要有固相芯片和液相芯片两种。在猪上,已经有成熟的商业芯片如60k芯片(porcinesnp60)、中芯一号芯片等,它们均为固相芯片。在使用中,人们逐渐发现固相芯片存在一些缺点,如①检测位点固定,不灵活,更新换代慢。本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种可用于民猪选育的15K液相芯片制备方法,其特征在于,所述的液相芯片由民猪15K探针混合液和杂交捕获剂构成;所述的15K液相芯片制备方法包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种可用于民猪选育的15K液相芯片制备方法,其特征在于步骤二中所述的对提取的民猪耳组织DNA进行全基因组重测序是指:

3.根据权利要求2所述的一种可用于民猪选育的15K液相芯片制备方法,其特征在于所述的获得高质量的干净读长,是对去除低质量碱基数的读长,进行生物信息学分析,得到高质量SNP数据,具体步骤如下:1)使用软件BWA将完成质控后的干净读长与猪参考基因组序列进行比对,通过比对定位...

【技术特征摘要】

1.一种可用于民猪选育的15k液相芯片制备方法,其特征在于,所述的液相芯片由民猪15k探针混合液和杂交捕获剂构成;所述的15k液相芯片制备方法包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种可用于民猪选育的15k液相芯片制备方法,其特征在于步骤二中所述的对提取的民猪耳组织dna进行全基因组重测序是指:

3.根据权利要求2所述的一种可用于民猪选育的15k液相芯片制备方法,其特征在于所述的获得高质量的干净读长,是对去除低质量碱基数的读长,进行生物信息学分析,得到高质量snp数据,具体步骤如下:1)使用软件bwa将完成质控后的干净读长与猪参考基因组序列进行比对,通过比对定位干净读长在参考基因组上的位置;所述的完成质控指高质量数据获取中完成去除低质量碱基数的读长;2)依据步骤1)的结果,使用软件gatk的haplotypecaller模块进行变异检测,检测参数为:gatk best practices;使用软件gatk的variantfiltration模块进行过滤,过滤参数为:--filter-expression"qd<2.0||qual<30.0||mq<40.0||fs>60.0||sor>3.0||mqranksum<-12.5||readposranksum<-8.0";3)根据参考基因组的注释文件,在参考基因组注释文件的snp数据集基础上进行位置注释,获得高质量snp位点数据。

4.根据权利要求1所述的一种可用于民猪选育的15k液相芯片制备方法,其特征在于步骤二中,在全基因组水平筛选snp位点,筛选原则为:挑选的snp位点要在全基因组均匀分布,每个snp位点的最小等位基因频率大于0.35。

5.根据权利要求1所述的一种可用于民猪选育的15k液相芯片制备方法,其特征在于步骤三中,遵循液相捕获技术的探针设计原则,所述的探针设计原则为:探针长度110bp;探针gc...

【专利技术属性】
技术研发人员:张冬杰刘娣何鑫淼王文涛田明
申请(专利权)人:黑龙江省农业科学院畜牧研究所
类型:发明
国别省市:

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