【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，尤其是涉及一种猴结核病检测试剂盒和检测方法。
技术介绍
1、欧盟、美国国立卫生研究院(nih)和美国兽医协会(avma)的指导文件或推荐文献，建议平行使用结核菌素皮肤测试(tst)和γ-干扰素释放实验检测，以实现诊断方案的最佳覆盖，及时并高效的发现感染结核分枝杆菌的动物。
2、目前，实验猴感染结核病的检疫结核菌素的方法单一，结核菌素试验敏感性和特异性低；猴结核病血清抗体的检测方法，利用胞浆蛋白，结核菌素作为抗原建立猴结核病血清抗体ehsa检测方法，但其敏感性差，漏检率高；常规结核病γ-干扰素检测方法，检出率高，但有可能出现假阳性，而且进口商品化试剂成本高，操作复杂，检测周期长，无法实现自动化。国内没有猴结核病γ-干扰素释放检测试剂盒。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于提供一种新型的、基于γ-干扰素双抗原夹心法的猴结核病体外检测试剂盒和方法。
2、第一个方面，本专利技术涉及了一种猴结核病体外检测试剂盒，其包括，
3、384孔酶标板，其预先包被抗γ-干扰素抗体，以捕获样品游离或刺激样品后产生的γ-干扰素；
4、刺激物，其用于体外刺激样品，以能够使样品产生相应的应答；
5、生物素化抗体、链霉亲和素试剂以及显色试剂；
6、和，缓冲溶液和/或稀释溶液，以及96孔培养板耗材。
7、所述刺激物包括阳性刺激物p(佛波酯pma)、阴性刺激物n(磷酸盐溶液pbs)、刺激物a(鸟分枝杆菌抗原)以及
8、本专利技术提供的后结核病体外检测试剂盒，用于检测猴外周血。
9、另一方面地，本专利技术还涉及一种体外检测猴结核病的方法，其使用上述的猴结核病体外检测试剂盒，其包括：
10、在96孔培养板中分别依次加入刺激物和样品，并且刺激过夜；
11、将96孔培养板培养后上清液转移到预包被预先包被抗γ-干扰素抗体的384孔酶标板；
12、清洗孵育后的酶标板，并且随后加入生物素化抗体孵育；
13、再次清洗后，加入链霉亲和素试剂、显色剂；
14、在加入显色终止试剂后，通过酶标仪读取显色数据，判断其结核病的阳性或阴性结果。
15、本专利技术所涉及的样品来源于外周血。
16、本专利技术针对结核病γ-干扰素检测方法进行优化，实现自动化操作，应用于实验猴检测，节省人力时间，减低检测成本，提高检测准确度。
17、技术效果：
18、1.全血分液及自动化刺激过程；
19、2.无需离心分离，直接吸取刺激全血上清进行elisa实验；
20、3.采用384elisa板，提高检测效率；
21、4.试剂大都为工作液且组装为试剂盒，客户使用方便。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.猴结核病体外检测试剂盒，其包括，
2.根据权利要求1所述的猴结核病体外检测试剂盒，其中，所述刺激物包括阳性刺激物P(佛波酯PMA)、阴性刺激物N(磷酸盐溶液PBS)、刺激物A(鸟分枝杆菌抗原)以及刺激物B(牛分枝杆菌抗原)。
3.根据权利要求1或2所述的猴结核病体外检测试剂盒，其用于检测猴外周血。
4.一种体外检测猴结核病的方法，其使用权利要求1-3所述的猴结核病体外检测试剂盒，其包括：
5.根据权利要求4所述的体外检测猴结核病的方法，其中，所述样品来源于外周血刺激后上清液。
【技术特征摘要】
1.猴结核病体外检测试剂盒，其包括，
2.根据权利要求1所述的猴结核病体外检测试剂盒，其中，所述刺激物包括阳性刺激物p(佛波酯pma)、阴性刺激物n(磷酸盐溶液pbs)、刺激物a(鸟分枝杆菌抗原)以及刺激物b(牛分枝杆菌抗原)。
3.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：张文娟，时长军，杭沈露，黄颖娟，陆春华，陈思，
申请(专利权)人：苏州西山生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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