【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一类靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽及其制备方法与应用。
技术介绍
1、蛋白酪氨酸磷酸酶1b(protein tyrosine phosphatase 1b，ptp1b)是蛋白酪氨酸磷酸酶超家族的一员，是自从1988年从人体胎盘中提取，并验证发现得最早的ptp家族蛋白，它主要分布在细胞内质网上，其晶体结构在1994年被解析出来。近年来研究观点表明：ptp1b不仅与2型糖尿病及肥胖症的发病和发展有密切的关系，还可以作为抗肿瘤和阿尔兹海默症药物开发的(潜在)靶标。ptp1b的作用包括与ptk拮抗调节胰岛素活性、通过vegfr2抑制血管生成、肿瘤抗原呈递和瘦素信号传导等。ptp1b是胰岛素信号转导通路中的关键的负调节蛋白，ptp1b抑制剂通过阻断胰岛素刺激的胰岛素受体(ir)的酪氨酸磷酸化，进而影响胰岛素受体(irs-1)的磷酸化，使类胰岛素和胰岛素增敏，降低血糖。同时，其能使瘦素信号增强，诱导脂肪代谢水平升高，体重下降。因此，ptp1b是近年来研究t2dm的热门靶点，并且已有多个候选化合物已进入临床前及临床i、ii期实验。一些研究发现ptp1b过表达能够显著促进小鼠体内肿瘤的发生和生长，通过抑制剂抑制ptp1b的表达能够产生抗肿瘤效果；机制研究发现ptp1b通过调控rnf213基因从而控制细胞非线粒体氧消耗，进而促进缺氧条件下肿瘤细胞的生存和生长。据此，ptp1b被看作是抗肿瘤药物的靶标。近些年ptp1b还被作为中枢神经系统中与阿尔兹海默症相关生理过程中的调控作用，提出通过抑制ptp1
2、目前，ptp1b的抑制剂主要包括无机小分子类化合物、有机化合物和天然产物中ptp1b抑制剂。迄今为止，只有三种小分子抑制剂：ertiprotafib、msi-1436和jtt-551进入临床试验，但它们最终因疗效不佳或不良反应而终止研发，选择性不佳和细胞膜通透性差是阻碍ptp1b小分子抑制剂开发进程的主要原因；而有机化合物大多通过有机合成和组合化学的方法进行筛选，先筛选到具有抑制ptp1b活性的化合物，再对化合物的取代基团进行修饰，最后得到一种较好的ptp1b抑制剂，此类抑制剂存在稳定性差、带电荷较高、亲脂系数过高等制约成药性的问题；天然产物中ptp1b抑制剂是通过对自然界中分离鉴定的天然产物进行高通量筛选，虽然其具有高选择性和活性，但作用位点并不是很明确。因此，弥补现有ptp1b抑制分子的缺陷，开发结构新颖、选择性强、低毒且长效的新型ptp1b抑制剂以满足国内临床上的迫切需求，就显得十分必要。
3、本专利技术涉及的模拟肽化合物衍生自bim-bh3结构域的核心区域，第2位氨基酸采用天然或非天然氨基酸定点替换修饰，n端缀合了具有高血清白蛋白结合率的脂肪酸小分子，理论上能够大大地延长降糖作用维持时间，发挥一周一次给药长效降糖效果。综上所述，此类降糖多肽是一种靶向ptp1b、并具有一周一次长效降糖作用的潜在长效化多肽降糖药物。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一类新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽及其制备方法与应用。所述bimbh3模拟肽类似物具有较好的ptp1b的抑制活性，能够抵抗多种蛋白酶和离体血浆的降解，离体血浆半衰期显著延长，可用于制备预防或治疗以ptp1b为靶点的相关疾病(优选为2型糖尿病)的长效药物开发。
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：本专利技术公开了一类新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽及其制备方法与应用。所述的bim bh3模拟肽类似物的结构通式如如式i所示所示：
3、
4、式i.bimbh3模拟肽化合物的结构通式。
5、所述bh3模拟肽衍生自bim-bh3结构域的核心区域，第2位氨基酸采用天然或非天然氨基酸定点替换修饰，n端缀合小分子脂肪酸修饰(n＝14)。
6、进一步的，所述raa位置的取代的天然或非天然氨基酸分别为：gly、aib、ser、asp、lys、val、thr、phe、pro、hyp、leu、ile、trp、tyr、cys、met、glu、arg、d-ala、β-ala、d-ser、d-leu、d-pro、d-his和n-ch3-ala。
7、进一步的，所述的新型bimbh3模拟肽的制备方法包括以下步骤：
8、(1)室温下，将ctc树脂置于手动多肽固相合成器中，用二氯甲烷、二甲基甲酰胺活化；
9、(2)加入哌啶/二甲基甲酰胺混合液脱除fmoc保护基；
10、(3)加入2-3倍树脂摩尔量的n-fmoc保护氨基酸或脂肪酸及2.4-4.8倍树脂摩尔量的hobt、dic或hobt、hbtu和diea，40℃鼓泡反应30min～60min；
11、(4)重复步骤(2)和(3)，直至完成整个模拟肽序列的合成；
12、(5)将步骤(4)的产物中加入裂解液，40℃震荡2h，过滤，加入无水冰乙醚析出固体后，经洗涤、真空干燥得模拟肽类似物粗产物；
13、(6)所述肽类似物粗产物使用反相制备液相色谱纯化，收集目标峰流动相溶液脱去乙腈后，冷冻干燥得到絮状或粉末状固体，即得bimbh3模拟肽类似物纯品。
14、进一步地，所述裂解液包括三异丙基硅烷、3,6-二氧杂-1,8-辛烷二硫醇、水和三氟乙酸。
15、进一步地，所述步骤(5)中过滤后鼓吹n2去除多余的三氟乙酸。
16、本专利技术还提供了权利要求1-5任一项所述新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽为活性成分的药物或药物组合物，其特征在于，所述药物或药物组合物包括任一所述新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽和一种或多种药学上可接受的载体或赋型剂。
17、进一步地，所述的bimbh3模拟肽类似物应用于制备抑制ptp1b活性的抑制剂；
18、进一步地，所述的bimbh3模拟肽类似物应用于制备用于预防或治疗以ptp1b为靶点的疾病的药物；
19、进一步地，所述疾病包括糖尿病、癌症和阿尔兹海默症，其中优选适应症为2型糖尿病(一周一次长效治疗药物)；
20、进一步地，以所述的bimbh3模拟肽为活性成分的药物或药物组合物的给药方式为口服或注射。
21、与现有技术相比，本专利技术的优点和有益效果是：本专利技术通过多肽固相合成方法得到一类新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽，此类多肽化合物衍生自bim-b本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.本专利技术公开了一类新型靶向PTP1B的长效化降糖BimBH3模拟肽及其制备方法与应用。所述的BimBH3模拟肽类似物的结构通式如式I所示：
2.根据权利要求1所述的新型靶向PTP1B的长效化降糖BimBH3模拟肽，其特征在于，Raa位置的取代的天然或非天然氨基酸分别为：Gly、Aib、Ser、Asp、Lys、Val、Thr、Phe、Pro、Hyp、Leu、Ile、Trp、Tyr、Cys、Met、Glu、Arg、D-Ala、β-Ala、D-Ser、D-Leu、D-Pro、D-His和N-CH3-Ala。
3.根据权利要求1所述新型靶向PTP1B的长效化降糖BimBH3模拟肽，其特征在于，制备方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，制备步骤中所述裂解液包括三异丙基硅烷、3,6-二氧杂-1,8-辛烷二硫醇、水和三氟乙酸。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，其特征在于，所述步骤(5)中过滤后鼓吹N2去除多余的三氟乙酸。
6.以权利要求1-5任一项所述新型靶向PTP1B的长效化降糖Bim
7.权利要求1-5任一项所述的BimBH3模拟肽类似物在制备用于抑制PTP1B活性的抑制剂中的应用。
8.权利要求1-5任一项所述的BimBH3模拟肽类似物在制备用于预防或治疗以PTP1B为靶点的疾病的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述疾病包括糖尿病、癌症和阿尔兹海默症，其中优选为长效糖尿病治疗药物。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：以所述的BimBH3模拟肽为活性成分的药物或药物组合物的给药方式为口服或注射。
...【技术特征摘要】
1.本发明公开了一类新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽及其制备方法与应用。所述的bimbh3模拟肽类似物的结构通式如式i所示：
2.根据权利要求1所述的新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽，其特征在于，raa位置的取代的天然或非天然氨基酸分别为：gly、aib、ser、asp、lys、val、thr、phe、pro、hyp、leu、ile、trp、tyr、cys、met、glu、arg、d-ala、β-ala、d-ser、d-leu、d-pro、d-his和n-ch3-ala。
3.根据权利要求1所述新型靶向ptp1b的长效化降糖bimbh3模拟肽，其特征在于，制备方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，制备步骤中所述裂解液包括三异丙基硅烷、3,6-二氧杂-1,8-辛烷二硫醇、水和三氟乙酸。
5.根据权利要求3所述的制备方法...
【专利技术属性】
技术研发人员：张传亮，杨献敏，公丽艳，董国振，史意颖，顾宗文，
申请(专利权)人：青岛科技大学，
类型：发明
国别省市：
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