一种提高Clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法技术

一种提高Clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其包括以下步骤：(1)设计AOR基因启动子附近的gRNA并合成该序列片段；(2)构建CRISPRa激活融合蛋白；(3)构建CRISPRa质粒；(4)细菌转化及质粒提取；(5)目标微生物转化；(6)恢复和筛选菌株；(7)使用步骤(6)得到的菌株采用合成气发酵产乙醇和微生物细胞。本申请通过CRISPRa活化AOR基因，可以在合成气发酵中实现更高的乙醇产量，并通过ATP的过量产生进一步促进细胞浓度的增加。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物发酵，尤其是涉及一种提高clostridiumljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法。

技术介绍

1、厌氧菌clostridium ljungdahlii是一种潜在的微生物工厂，被广泛研究用于合成生物学和代谢工程领域。它能够在没有氧气存在的条件下，利用合成气(含有co和h2的混合物)作为原料进行发酵，产生有价值的化合物，如乙醇、乙酸和其他生化产品；此外，这种细菌还可用于将有机废弃物转化为有价值的化合物，从而实现废物资源化利用、帮助减少碳排放。

2、厌氧菌clostridium ljungdahlii特点：这种细菌在缺氧环境下生长，因此在一些特殊的生产过程中很有用，比如废弃物处理和生物燃料生产；它具备独特的气体发酵能力，能够利用合成气作为碳源和能源，通过多步反应合成有机化合物。作为厌氧菌，clostridium ljungdahlii在合成气发酵以产生乙醇、乙酸等化合物方面具有非常大的潜力。

3、整体而言，当使用一氧化碳作为原料，通过合成气发酵产生乙醇时，化学反应式如下：6co+3h2o→c2本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高Clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的提高Clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的序列片段为：

3.根据权利要求1所述的提高Clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的构建CRISPRa激活融合蛋白：使用dCas9-VP64作为激活融合蛋白的基础，与gRNA结合时，可精确地引导激活融合蛋白到目标基因的启动子区...

【技术特征摘要】

1.一种提高clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的提高clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的序列片段为：

3.根据权利要求1所述的提高clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的构建crispra激活融合蛋白：使用dcas9-vp64作为激活融合蛋白的基础，与grna结合时，可精确地引导激活融合蛋白到目标基因的启动子区域。

4.根据权利要求1所述的提高clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，步骤(3)中所述crispra质粒构件方法为：使用puc19作为基本质粒骨架，将步骤(1)中合成的grna序列和步骤(2)中构建的激活融合蛋白基因插入质粒中，构建crispra质粒。

5.根据权利要求1所述的提高clostridium ljungdahlii合成气发酵产乙醇和微生物细胞浓度的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的细菌转化及质粒提取的方法：将构...

【专利技术属性】
技术研发人员：李长沙，刘金课，周堃，符波，
申请(专利权)人：中邦碳能江苏科技有限公司，
类型：发明
国别省市：