【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及一种黑翅土白蚁转录因子ofrelish及其应用。
技术介绍
1、黑翅土白蚁odontotermesformosanus(shiraki)是危害我国林业产业的重要害虫，除危害农林业外，其也能危害堤坝和建筑，造成重大的经济损失。黑翅土白蚁在我国分布范围很广，遍及国内21个省市自治区，在长江流域危害尤其严重。黑翅土白蚁是一种土栖性白蚁，筑巢于地下，在野外其巢群分布通常较为复杂，除了主巢外通常还会有多个副巢，危害范围广且极为隐蔽，给防治带来较大困难。在我国目前防治黑翅土白蚁主要有两种方法：1.物理防治：通过人工挖掘白蚁巢穴等手段进行物理防治，但此方法费时费力，需要有经验的白蚁防治工作者参与，难以大面积推广。2.化学防治：化学防治目前仍是我国白蚁防治最主要的手段，但长期使用化学防治会对人体健康和环境具有潜在的危害，急需寻找更合适的防治手段来取代化学农药。使用微生物的生物防治手段因其具有环境友好、作用高效等优势具有很大的应用潜力。
2、当昆虫被病原微生物侵袭时，先天免疫系统通过有限的种系编码的模式识别受体(prrs)识别微生物，并迅速激活昆虫体内的一系列体液免疫反应，产生抗菌肽来抵抗病原微生物的侵害。抗菌肽基因在模式昆虫黑腹果蝇中的诱导表达由toll途径和免疫缺陷(imd)途径调节。toll途径和imd途径都需要nf-κb家族的核转录因子进行调控，它们之间本来也存在着互通，两个通路之间也存在着相互作用，所以当细菌或真菌入侵时，都会对入侵物产生防御反应。在imd途径中，prr识别革兰氏阴性细菌的pgn会
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种黑翅土白蚁转录因子基因relish(ofrelish)及其dsrna，并结合粘质沙雷氏菌(serratia marcescens，sm1)和/或苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis，bt)来防治白蚁。
2、为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
3、本专利技术利用分子技术首先以黑翅土白蚁工蚁cdna为模板克隆获得了一个黑翅土白蚁转录因子relish(ofrelish)，其核苷酸序列如seq id no：1所示。利用mega-x和dnaman对ofrelish基因进行邻接法neighbor-joining系统发育树构建和多序列比对，显示ofrelish基因与同属于白蚁科的nasutitermes comatus、nasutitermesfumigatus,和nasutitermespluvialis的基因均在同一分支内且具有明显的同源性，确认为黑翅土白蚁relish基因。
4、本专利技术还提出了上述黑翅土白蚁转录因子ofrelish基因在黑翅土白蚁防治上的应用。
5、进一步地，本申请提出了基于上述转录因子ofrelish基因的防治黑翅土白蚁的dsrna，其由所述的黑翅土白蚁转录因子基因的核苷酸序列转录而成。
6、利用rnai技术研究表明dsofrelish处理黑翅土白蚁降低了白蚁的免疫，使得其抗sm1和bt的能力降低，说明ofrelish在抗sm1和bt侵染中起重要作用。
7、本专利技术还提供了编码上述转录因子基因dsrna的dna。
8、进一步地，本专利技术还提供了一种重组表达载体，其包含上述编码dsrna的dna。
9、本专利技术还提出一种转基因工程菌，其转化上述重组表达载体。
10、本专利技术还提出了所述的黑翅土白蚁转录因子ofrelish基因的dsrna在增强粘质沙雷氏菌sm1和/或苏云金芽胞杆菌bt杀虫毒力上的应用。
11、本专利技术还提出以上所述黑翅土白蚁转录因子ofrelish基因dsrna在制备防治白蚁产品中的应用。
12、具体地，在应用时，先用dsrna处理黑翅土白蚁3-24h，然后用粘质沙雷氏菌sm1或苏云金芽胞杆菌bt处理。
13、优选地，先用黑翅土白蚁转录因子ofrelish基因dsrna处理黑翅土白蚁6h，然后用粘质沙雷氏菌sm1或苏云金芽胞杆菌bt处理。
14、本专利技术提供一种所述黑翅土白蚁转录因子ofrelish基因dsrna在制备防治白蚁产品中的应用。
15、本专利技术的有益效果：
16、本专利技术针对获得的黑翅土白蚁转录因子ofrelish设计dsrna(dsofrelish)，利用rnai技术干扰降低了黑翅土白蚁体内ofrelish基因的表达量；通过dsofrelish处理后的黑翅土白蚁再接触生防菌sm1或bt，抗菌活性和存活率显著降低，表明受菌白蚁的主动免疫被打破，并显著提高了sm1或bt生防菌对白蚁的防治效果。本专利技术可应用于rnai技术结合sm1或bt生防菌防治黑翅土白蚁。本专利技术用于防治黑翅土白蚁具有特异性强、效果优异、环境友好等特点，同时还加深了对黑翅土白蚁ofrelish的生理功能及作用的了解，将其作为新的靶标，开发相应的免疫抑制剂，为进一步提高防治黑翅土白蚁的生物防效果提供理论依据。
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1.一种黑翅土白蚁转录因子OfRelish，其特征在于，所述转录因子开放阅读框核苷酸序列如SEQ ID N0:1所示。
2.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如SEQ ID N0：1所示的核苷酸序列。
3.一种转基因工程菌，其特征在于，所述转基因工程菌转化权利要求2所述的重组表达载体。
4.一种防治黑翅土白蚁的方法，其特征在于，所述方法包括降低黑翅土白蚁转录因子OfRelish在黑翅土白蚁体内的表达，所述黑翅土白蚁转录因子OfRelish的核苷酸序列如SEQ ID N0:1所示。
5.一种黑翅土白蚁转录因子OfRelish基因dsRNA，其特征在于，由权利要求1或权利要求4所述的黑翅土白蚁转录因子OfRelish基因转录而成。
6.一种黑翅土白蚁转录因子OfRelish在提高粘质沙雷氏菌和/或苏云金芽胞杆菌杀虫毒力上的应用，其特征在于，使用权利要求5所诉的dsRNA。
7.一种如权利要求6所述黑翅土白蚁转录因子OfRelish基因dsRNA在制备防治白蚁产品中的应用。
8.如权利要
9.一种防治黑翅土白蚁的方法，其特征在于，将权利要求6-8任一所述dsRNA处理黑翅土白蚁3-24 h后，再用粘质沙雷氏菌或苏云金芽胞杆菌处理。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，先用dsRNA处理黑翅土白蚁的时间为6 h。
...【技术特征摘要】
1.一种黑翅土白蚁转录因子ofrelish，其特征在于，所述转录因子开放阅读框核苷酸序列如seq id n0:1所示。
2.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如seq id n0：1所示的核苷酸序列。
3.一种转基因工程菌，其特征在于，所述转基因工程菌转化权利要求2所述的重组表达载体。
4.一种防治黑翅土白蚁的方法，其特征在于，所述方法包括降低黑翅土白蚁转录因子ofrelish在黑翅土白蚁体内的表达，所述黑翅土白蚁转录因子ofrelish的核苷酸序列如seq id n0:1所示。
5.一种黑翅土白蚁转录因子ofrelish基因dsrna，其特征在于，由权利要求1或权利要求4所述的黑翅土白蚁转录因子ofrelis...
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