本发明专利技术涉及生物工程技术领域，具体是安石榴甙分子印迹聚合物微球的制备方法。本发明专利技术步骤：将模板分子安石榴甙、功能单体丙烯酰胺、交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯和引发剂偶氮二异丁腈溶解在致孔剂乙腈中，常温下超声分散，通入氮气，密封；模板分子与功能单体的摩尔比为１∶５～２０，功能单体与交联剂的摩尔比为１∶５，交联剂与致孔剂的体积比为２０∶１０００，引发剂与功能单体与交联剂用量之和的质量比为２∶１００；对混合溶液在６０℃下搅拌２４ｈ进行聚合反应；通过离心分离，５０℃下干燥２４ｈ，采用索氏抽提法除去模板分子；干燥。本发明专利技术可选择性吸附安石榴甙，且吸附量高，最大吸附量达３５２９９μｇ／ｇ。本发明专利技术过程简单、成本低。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的是一种生物工程
的方法，具体地说，是一种。
技术介绍
安石榴甙(pimicalagin)，即3_ (S)-六羟基二酚_4，6_ (S，S)-没食子酰基_D_葡 萄糖，又名安石榴苷。为石榴科植物石榴的皮提取物，属于石榴皮中鞣花单宁的一种，为鞣 花单宁的主要成分。安石榴甙被人体吸收后，在人体酶的作用下，可以分解为鞣花酸，而且 其具有优良的抗氧化性，已被用作食品抗氧化剂，现在日本和法国多将其用于化妆品方面， 同鞣花酸相比，安石榴甙水溶性较好，可用于饮料，而容易被人体吸收，同鞣花酸一样，安石 榴甙也具有抗变异原性和抑制癌细胞增殖的作用。安石榴甙为单一成分，易溶于多种溶剂， 而且石榴皮中含有多种和安石榴甙结构相近的同类化合物以及安石榴甙的同分异构体，这 给它的分离纯化造成一定的难度，目前对其分离提纯的效果并不理想。分子印迹技术，即是指在聚合反应进行前，将模板分子加入到聚合体系中，模板分 子与功能单体通过共价键或非共价键相互作用，而后在交联剂的参与下发生聚合反应，生 成交联高的聚合物。之后通过物理、化学手段将模板分子移除，聚合物内部便形成了一种空 间位点，此位点的空间形状和所拥有的官能团的位置与模板分子是能配合的，从而使有着 这种空间位点的聚合物对模板分子具有高度的特定选择性。该技术已在色谱分离、仿生传 感器、生物酶模拟和临床药物分析等领域展现了很好的应用前景。经对现有技术文献的查阅，至今尚未发现与本专利技术主题安石榴甙分子印迹聚合物 微球的制备方法相关的报道。
技术实现思路
本专利技术针对现有有关安石榴甙的分离提纯技术的不足，提供一种安石榴甙分子印 迹聚合物微球的制备方法，能够快速、简单的制备出具有良好分散性、分子识别性能的分子 印迹聚合物微球，可以用于对安石榴甙的特异性选择。本专利技术是通过以下技术方案实现的，本专利技术所述的安石榴甙分子印迹聚合物的制 备方法，具体包括以下步骤1)将模板分子、功能单体、交联剂和引发剂按一定比例溶解在致孔剂中，常温下超 声分散，通入氮气，密封；2)对混合溶液恒温恒速搅拌进行聚合反应；3)聚合反应结束后，离心分离，50°C下干燥24h，采用索氏抽提法除去模板分子， 用紫外_可见分光光度计检测，直至检测不到模板分子；4)将去除模板分子的聚合物50°C下干燥24h，得到安石榴甙的分子印迹聚合物。所述的1)中，模板分子与功能单体的摩尔比为1 5 20，功能单体与交联剂的 摩尔比为1 5，交联剂与致孔剂的体积比为20 1000，引发剂与功能单体与交联剂用量之和的质量比为2 100，超声分散时间为lh，通入氮气的时间为20min。所述的2)中，恒温恒速搅拌是指在60°C下以400rpm搅拌24h。所述的3)中，离心的速度为4000rpm，离心时间为20min，索氏抽提法采用甲醇与 乙酸的混合溶液，其中甲醇和乙酸的体积比为80 20，抽提时间为48h。所述的模板分子，为安石榴甙。所述的功能单体，为丙烯酰胺(AM)。所述的致孔剂，为乙腈(ACN)。所述的交联剂，为乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)。所述的引发剂，为偶氮二异丁腈(AIBN)。本专利技术采用沉淀聚合法制备的安石榴甙分子印迹聚合物，可以选择性的吸附安石 榴甙，而且吸附量高，最大吸附量可达到35299 u g/g。而且本专利技术制备过程简单、成本低、安 石榴甙分子印迹聚合物可回收再利用。附图说明图1为本专利技术所制得的安石榴甙分子印迹聚合物微球扫描电镜图(一)图2为安石榴甙在安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物上的等温吸附曲线 图，-■-表示安石榴甙在实施例1方法制备的安石榴甙分子印迹聚合物上的等温吸附曲 线，-表示安石榴甙在空白聚合物上的等温吸附曲线。具体实施例方式实施例1.称取安石榴甙模板分子0. lmmol，丙烯酰胺lmmol，乙腈溶液47. 2ml于100ml反应 烧瓶中，在常温25°C下超声分散lh，然后加入5mmolEDMA，引发剂0.0212g AIBN，超声分散 lh，通入氮气除氧20min，密封，60°C下以400rpm搅拌反应24h。所得混合物以4000rpm的转速离心20min，滤除上清液，得到聚合物，50°C下烘干 24h。用甲醇乙酸(80 20，V/V)对聚合物进行索氏抽提48h去除模板分子，用紫 外_可见分光光度计进行检测，直至检测不到模板分子。将抽提后得到的聚合物在50°C下 烘干24h，最后得到安石榴甙的分子印迹聚合物。其专利技术效果如图1所示。按照上述方法制备不加安石榴甙模板分子的空白聚合物；利用本实施方式方法制 备的安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物吸附安石榴甙来验证吸附效果。分别称取本具 体实施方式方法得到的安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物各20. Omg，分别置于两个磨 口锥形瓶中，加入5mll000i! g/ml安石榴甙模板的乙腈溶液，密封，常温下振荡24h，然后离 心取上清液，用澳大利亚GBC的CITRA-200紫外分光光度计对其进行测试，分别计算平衡吸 附液中安石榴甙的游离浓度，从而确定出安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物对安石榴 甙的吸附量Q(Pg/g)。计算结果如表1:表1 由表1可知，采用本实施方式的方法制备的安石榴甙分子印迹聚合物对安石榴甙 的吸附量、吸附率比空白聚合物的吸附量、吸附率高，即采用本实施方式的方法制备的安石 榴甙分子印迹聚合物对安石榴甙的吸附效果好。实施例2.称取安石榴甙模板分子0. Immol，丙烯酰胺0. 5mmol,乙腈溶液23. 6ml于IOOml反 应烧瓶中在常温25°C下超声分散lh，然后加入5mmolEDMA，引发剂0. 0212g AIBN，超声分散 Ih,通入氮气除氧20min，密封，60°C下以400rpm搅拌反应24h。所得混合物以4000rpm的转速离心20min，滤除上清液，得到聚合物，50°C下烘干 24h。用甲醇乙酸(80 20，V/V)对聚合物进行索氏抽提48h去除模板分子，用紫 外_可见分光光度计进行检测，直至检测不到模板分子。将抽提后得到的聚合物在50°C下 烘干24h，最后得到安石榴甙的分子印迹聚合物。其专利技术效果基本等同于如图1所示。按照上述方法制备不加安石榴甙模板分子的空白聚合物；利用本实施方式方法制 备的安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物吸附安石榴甙来验证吸附效果。分别称取本具 体实施方式方法得到的安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物各20. Omg，分别置于两个磨 口锥形瓶中，加入5mll000y g/ml安石榴甙模板的乙腈溶液，密封，常温下振荡24h，然后离 心取上清液，用澳大利亚GBC的CITRA-200紫外分光光度计对其进行测试，分别计算平衡吸 附液中安石榴甙的游离浓度，从而确定出安石榴甙分子印迹聚合物和空白聚合物对安石榴 甙的吸附量Q(yg/g)。计算结果如表2:表 2 由表2可知，采用本实施方式的方法制备的安石榴甙分子印迹聚合物对安石榴甙 的吸附量、吸附率比空白聚合物的吸附量、吸附率高，即采用本实施方式的方法制备的安石 榴甙分子印迹聚合物对安石榴甙的吸附效果好。实施例3.称取安石榴甙模板分子0. 05mmol，丙烯酰胺Immol，乙腈溶液47. 2ml于IOOml反应烧瓶中，在常温25°C下超声分散lh，然本文档来自技高网...
【技术保护点】
安石榴甙分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： １）将模板分子安石榴甙、功能单体丙烯酰胺、交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯和引发剂偶氮二异丁腈溶解在致孔剂乙腈中，常温下超声分散，通入氮气，密封；其中模板分子与功能单体的摩尔比为１∶５～２０，功能单体与交联剂的摩尔比为１∶５，交联剂与致孔剂的体积比为２０∶１０００，引发剂与功能单体与交联剂用量之和的质量比为２∶１００； ２）对混合溶液在６０℃下搅拌２４ｈ进行聚合反应； ３）聚合反应结束后，离心分离，５０℃下干燥２４ｈ，采用索氏抽提法除去模板分子； ４）去除模板分子后５０℃下干燥２４ｈ，得到安石榴甙的分子印迹聚合物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：石艳，张笑，付志峰，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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