嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1亚单位疫苗的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1亚单位疫苗的制备方法及应用，首先进行嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1的重组表达载体构建，其次是进行重组蛋白的诱导表达及纯化，最后将纯化后的蛋白与佐剂MONTANIDETM ISA 763AVG进行乳化混合制备疫苗；针对嗜水气单胞菌选取其两种外膜蛋白OmpTS和Aha 1通过重组表达来制备亚单位疫苗，疫苗抗原是基因表达产物，而不是具有毒性的菌体，相比灭活疫苗相比具有很高的安全性；疫苗成分单一，本身不具备毒性，不会存在毒力恢复的情况；疫苗所用抗原为蛋白质不会发生可能出现的基因重组问题，利用表达菌株BL21(DE3)可以大量生产蛋白，同时本发明专利技术提供了两种蛋白最佳的表达条件，可以更高效的制备目的蛋白，具有大规模使用的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体为嗜水气单胞菌ompts和aha 1亚单位疫苗的制备方法及应用。

技术介绍

1、嗜水气单胞菌(aeromonas hydrophila，ah)是一种人畜鱼共患的革兰氏阴性菌，其感染引起的细菌性败血症给水产养殖业造成了巨大的经济损失。目前，嗜水气单胞菌的全菌灭活疫苗、减毒活疫疫苗、以及菌体成分亚单位疫苗等方面均取得了一定的研究成果。其中，嗜水气单胞菌灭活疫苗于2011年已获生产批文，并在2020年又重新核发批文。

2、嗜水气单胞菌灭活疫苗的制备过程具体为：先从患病鱼体分离致病性嗜水气单胞菌菌株，经菌株鉴定和回感试验后筛选最佳的培养和灭活条件，经无菌检验和安全检验合格后免疫试验鱼，从而检测并确定灭活疫苗的免疫保护效果。灭活疫苗虽然对特定毒株具有较好的免疫保护作用，然而嗜水气单胞菌血清型较多，不同地区和养殖动物分离的菌株具有明显差异，从而限制了灭活疫苗的广谱性免疫保护效果及其应用范围。

3、减毒活疫苗是在保留免疫原性的基础上进行降毒处理，只引起机体产生免疫反应而不致病的一类疫苗。嗜水气单胞菌减毒疫苗，即通过改变培养本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：

2.根据权利要求1所述的嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：所述S21中的IPTG终浓度为0，0.02，0.05，0.20，0.50，1.00mM。

3.根据权利要求1所述的嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：所述S43的具体步骤如下：

4.根据权利要求1所述的嗜水气单胞菌OmpTS和Aha 1亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：所述S44中通过ELISA方法检测血清中特异性抗体(IgM+)水平，具体步骤...

【技术特征摘要】

1.嗜水气单胞菌ompts和aha 1亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：

2.根据权利要求1所述的嗜水气单胞菌ompts和aha 1亚单位疫苗的制备方法，其特征在于：所述s21中的iptg终浓度为0，0.02，0.05，0.20，0.50，1.00mm。

3.根据权利要求1所述的嗜水气单胞菌ompts和aha 1亚单位疫苗...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁祝进，徐泽华，张敏颖，张婷，赵晓恒，程汉良，许建和，陈香凝，
申请(专利权)人：江苏海洋大学，
类型：发明
国别省市：