【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗体检测，尤其涉及酶联免疫吸附实验，具体为一种邻苯二胺复合材料、检测试剂和检测非洲猪瘟的方法。
技术介绍
1、酶联免疫吸附实验（elisa）是一种常用的免疫检测方法，具有以下优点:高特异性，灵敏度高，操作简单，样本量少。然而，由于天然酶的固有缺陷，传统elisa在低丰度疾病标志物中的应用面临巨大挑战，特别是通过稀释降低其他组合物影响的操作将进一步降低疾病检测中的分析物浓度。因此，开发灵敏度、准确性和稳定性极其优异的免疫分析法具有重要意义。邻苯二胺与3,3',5,5'-四甲基联苯胺（tmb）一样用作过氧化氢的显色底物，常用于过氧化氢的检测或与过氧化氢联合用于酶联免疫测定。与tmb相比，邻苯二胺具有更强的信号读出能力和水溶性，不需要使用停止液，但其稳定性远低于tmb。在空气中，邻苯二胺会以非常快的速度被氧氧化，这导致邻苯二胺在elisa中很难检测到低丰度的检测底物。
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种邻苯二胺复合材料、检测试剂和检测非洲猪瘟的方法，本专利技术的邻苯二胺复合材料由邻苯二胺、聚醚酰亚胺、sn4+合成，在氧气条件不会被氧化，具有极高的稳定性；同时，本邻苯二胺复合材料能够与蛋白质生物标志物形成性质稳定的检测试剂，其具有较高的检测精度。
2、为实现上述目标，本专利技术的技术方案如下：
3、一种邻苯二胺复合材料，采用包括如下步骤的方法制备而成：将聚醚酰亚胺和邻苯二胺溶于超纯水中搅拌至少10 min；然后再加入五水合四
4、一种检测试剂，采用包括如下步骤的方法制备而成：
5、取上述邻苯二胺复合材料溶于水中形成溶液，再向邻苯二胺复合材料的溶液中加入某一病毒的蛋白质生物标志物并在4℃孵育2 h～2.5 h；再加入标准蛋白质溶液并孵育1.5h～2h；最后，将上述混合溶液在3℃～5℃下离心，用超纯水洗涤，干燥得到邻苯二胺纳米材料，即该病毒的检测试剂。
6、作为本专利技术的一种具体实施方式，所述蛋白质生物标志物、标准蛋白质溶液的体积比为0.8~1:1~1.2。
7、一种检测非洲猪瘟的方法，包括如下步骤：
8、s1、以非洲猪瘟的蛋白质生物标志物制备上述检测试剂作为非洲猪瘟的检测试剂；
9、s2、利用固定于固相上的非洲猪瘟捕获抗体吸附待测溶液中的抗原，以将抗原固定于固相上；
10、s3、利用步骤s2中被固相固定的抗原吸附非洲猪瘟的检测试剂中的抗体，以将非洲猪瘟的检测试剂固定在固相上；用超纯水洗涤固相，去除未粘合的非洲猪瘟检测试剂等余下试剂。
11、s4、利用可溶金属盐溶液浸泡步骤s3中被固相固定的非洲猪瘟的检测试剂，在此溶液中，被固相固定的检测试剂中的邻苯二胺复合材料被氧化形成荧光材料；可溶金属盐溶液中金属离子的配位能力大于sn4+、氧化电位高于邻苯二胺的氧化电位；
12、s5、通过测定含荧光材料的溶液的荧光强度确定荧光材料的浓度，进而确定非洲猪瘟抗原的浓度。
13、作为本专利技术的一种具体实施方式，可溶金属盐溶液中金属离子可以为hg2+、au3+、pt4+等。
14、作为本专利技术的一种具体实施方式，可溶金属盐溶液的溶剂为二甲基亚砜。
15、有益效果（1）制备的邻苯二胺复合材料为纳米线，具有极高的稳定性。
16、（2）本专利技术的检测试剂具有很高的灵敏度和准确度，采用荧光免疫分析法对非洲猪瘟抗原的响应范围为100 fg/ml ~10 pg/ml，检测限为16.29 fg/ml。
17、（3）该检测方法操作简单，检测方法简便。
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1.一种邻苯二胺复合材料，其特征在于，采用包括如下步骤的方法制备而成：
2.一种检测试剂，其特征在于，采用包括如下步骤的方法制备而成：
3.一种检测非洲猪瘟的方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的检测非洲猪瘟的方法，其特征在于，所述可溶金属盐溶液中金属离子为Hg2+、Au3+ 或Pt4+。
5.根据权利要求3所述的检测非洲猪瘟的方法，其特征在于，所述可溶金属盐溶液的溶剂为二甲基亚砜。
【技术特征摘要】
1.一种邻苯二胺复合材料，其特征在于，采用包括如下步骤的方法制备而成：
2.一种检测试剂，其特征在于，采用包括如下步骤的方法制备而成：
3.一种检测非洲猪瘟的方法，其特征在于，包括如下步骤：
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【专利技术属性】
技术研发人员：李贺，罗宇潇，付宸航，肖瑶，彭桃梅，张智，蒋家豪，赵雅迪，
申请(专利权)人：成都信息工程大学，
类型：发明
国别省市：
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