【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，尤其涉及急性心肌炎生物标志物的标记引物、应用、检测传感器及制备方法。
技术介绍
1、急性心肌炎(acute myocarditis)是一种心肌的炎症性疾病，常继发于细菌、病毒等感染，而急性重度病毒性心肌炎患者，可因心源性休克或急性充血性心力衰竭于数小时至数日内发生死亡，死亡率超过50％。因此，急性心肌炎的早期诊断和早期治疗尤为关键。
2、目前临床常规诊断方法主要是心电图、心肌坏死标志物、超声心动图、胸片、心血管磁共振成像、试纸条、增强拉曼光谱方法等，但特异性均较差；心内膜心肌活检目前仍是诊断急性心肌炎的金标准，但其为有创性操作，风险极高，且对操作者的技术水平同样要求很高，这种有创性检查通常只适用于危重症病例。
3、现有的急性心肌炎的临床检测常规方法，需要结合不同的检测结果进行综合判断。目前急性心肌炎的各种检测方法存在消耗时间长，费用高，并且往往发现太晚导致患者抢救不及时，出现许多问题。
4、因此，迫切需要一种可靠和方便的工具，以快速筛查断急性心肌炎。
技术实现思路
1、为了克服上述技术缺陷，本专利技术的目的在于提供急性心肌炎生物标志物的标记引物、应用、检测传感器及制备方法，旨在解决现有心肌炎检测繁琐，无法快速检测的问题。
2、本专利技术公开了一种急性心肌炎生物标志物的标记引物，所述生物标志物为mirna-721，其核苷酸序列如seq id no.1所示；所述标记引物中作用链的核苷酸序列如seq idno.2所示
3、优选地，还包括与所述生物标志物混合以配合所述标记引物的辅助链，所述辅助链的核苷酸序列如seq id no.3所示。
4、本专利技术还公开上述标记引物在急性心肌炎生物标志物检测以及制备急性心肌炎生物标志物检测装置中的应用。
5、本专利技术还公开一种急性心肌炎生物标志物的检测传感器，应用上述的标记引物，包括：
6、发卡结构探针，采用所述作用链修饰的金纳米粒子制备；
7、样品，多个梯度浓度的生物标志物混合所述辅助链并通过所述探针催化发卡自组装；
8、试纸条，用于样品滴加其上生成显色条带。。
9、优选地，根据试纸条上的显色条带进行心肌炎生物标志物的定性检测；
10、和/或，基于试纸条上的显色条带进行数据分析，进行急性心肌炎生物标志物的定量检测。
11、本专利技术还公开一种急性心肌炎生物标志物检测传感器的制备方法，其特征在于，制备上述的检测传感器，包括以下步骤：
12、制备金纳米粒子，将标记引物中的作用链活化，对金纳米粒子进行修饰，形成探针；
13、将急性心肌炎的生物标志物稀释成多个梯度浓度的溶液，所述辅助链与所述溶液混合并通过所述探针，获得催化发卡自组装的样品；
14、采用sa溶液和羊鼠抗igg抗体喷点于nc膜上形成t线和c线，将样品垫、结合垫、所述nc膜和吸水垫依次粘贴到底板上，制备试纸条。
15、本专利技术还公开一种急性心肌炎生物标志物的检测传感器，应用所述的标记引物，包括：
16、发卡结构探针，采用所述作用链修饰的拉曼信号分子内嵌式金核银壳纳米粒子制备；
17、样品，多个梯度浓度的生物标志物混合所述辅助链并通过所述探针催化发卡自组装；
18、试纸条，用于样品滴加其上生成显色条带。
19、优选地，根据试纸条上的显色条带进行心肌炎生物标志物的定性检测；
20、和/或，采用拉曼设备检测显色条带上的拉曼信号强度，拟合进行急性心肌炎生物标志物的定量检测。
21、本专利技术还公开一种心肌炎生物标志物检测传感器的制备方法，制备上述的检测传感器，包括以下步骤：
22、制备金纳米粒子，将拉曼信号分子偶联至金纳米粒子，再采用硝酸银溶液反应制备拉曼信号分子内嵌式金核银壳纳米粒子；采用活化的作用链对所述金核银壳纳米粒子进行修饰，制备发卡结构探针；
23、将所述生物标志物稀释成多个梯度浓度的溶液，将所述辅助链与所述溶液混合并通过所述探针，获得催化发卡自组装的样品；
24、采用sa溶液和羊鼠抗igg抗体喷点于nc膜上形成t线和c线，将样品垫、结合垫、所述nc膜和吸水垫依次粘贴到底板上，以制备试纸条。
25、优选地，在制备所述探针后，离心去除游离的作用链。
26、采用了上述技术方案后，与现有技术相比，具有以下有益效果：
27、1.本专利技术提供标记引物和应用该引物制备的测试传感器，可以定性和定量检测急性心肌炎生物标志物，具有灵敏度高、特异性强、组装过程简单、检测速度快等优点；
28、2.本专利技术提供的测试传感器，将作用链活化在金纳米粒子表面修饰形成发卡结构探针，当有生物标志物mirna-721和辅助链存在时，发生cha反应，发卡结构打开，就会被试纸条测试线上的sa捕获；
29、3.本专利技术提供的另一测试传感器，结合拉曼技术，利用拉曼信号分子内嵌式金核银壳纳米粒子制备发卡结构探针，由此可以在试纸条上显色，还可结合拉曼设备准确确定急性心肌炎生物标志物浓度。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种急性心肌炎生物标志物的标记引物，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的标记引物，其特征在于：
3.权利要求1或2中任一项所述的标记引物在急性心肌炎生物标志物检测以及制备急性心肌炎生物标志物检测装置中的应用。
4.一种急性心肌炎生物标志物的检测传感器，其特征在于，应用权利要求2所述的标记引物，包括：
5.根据权利要求4所述的检测传感器，其特征在于：
6.一种急性心肌炎生物标志物检测传感器的制备方法，其特征在于，制备权利要求4～5任一项所述的检测传感器，包括以下步骤：
7.一种急性心肌炎生物标志物的检测传感器，其特征在于，应用权利要求2所述的标记引物，包括：
8.根据权利要求7所述的检测传感器，其特征在于：
9.一种急性心肌炎生物标志物检测传感器的制备方法，其特征在于，制备权利要求7～8任一项所述的检测传感器，包括以下步骤：
10.根据权利要求6或9所述的制备方法，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.一种急性心肌炎生物标志物的标记引物，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的标记引物，其特征在于：
3.权利要求1或2中任一项所述的标记引物在急性心肌炎生物标志物检测以及制备急性心肌炎生物标志物检测装置中的应用。
4.一种急性心肌炎生物标志物的检测传感器，其特征在于，应用权利要求2所述的标记引物，包括：
5.根据权利要求4所述的检测传感器，其特征在于：
6.一种急性心肌炎生物标志物检测...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘英，陆峰，何丽娟，奚潇雨，封加栋，
申请(专利权)人：上海理工大学，
类型：发明
国别省市：
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