一种重组菌及其在合成4-羟基-3-甲氧基扁桃酸中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组菌及其在合成4‑羟基‑3‑甲氧基扁桃酸中的应用。该重组菌同时表达酪氨酸解氨酶、L‑氨基酸氧化酶和4‑羟基扁桃酸合成酶，其可作为生物催化剂将底物阿魏酸转化为4‑羟基‑3‑甲氧基扁桃酸，通过该重组菌发酵生产4‑羟基‑3‑甲氧基扁桃酸，既不会对后续提取纯化工艺和环境造成影响，也不会导致工程菌受损，绿色环保的同时提高了生产效率；同时产4‑羟基‑3‑甲氧基扁桃酸的平均摩尔转化率较高，最高可达97％以上，具有良好的工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体而言，涉及一种重组菌及其在合成4-羟基-3-甲氧基扁桃酸中的应用。

技术介绍

1、4-羟基-3-甲氧基扁桃酸，又称3-甲氧基-4-羟基扁桃酸、香草扁桃酸或3-甲氧基-4-羟基苯乙醇酸，是制备磺胺增效剂3，4，5-三甲氧基苄氨嘧啶(tmp)和合成香兰素的重要中间体，而香兰素作为广谱型香原料、矫味剂或定香剂，广泛用于食品、日化、烟草等行业中，需求量巨大，这也导致3-甲氧基-4-羟基扁桃酸的巨大需求量。

2、目前制备3-甲氧基-4-羟基扁桃酸的主流制备工艺为乙醛酸法，在碱性条件下，由愈创木酚和乙醛酸合成3-甲氧基-4-羟基扁桃酸。2000年，承德石油高等专科学校赵元等人发表了《3-甲氧基-4-羟基扁桃酸的合成》文章，该工艺以愈创木酚和乙醛酸为原料，反应温度25～85℃下进行缩合反应，反应时间7～8h，产品收率为48％～77％，随温度升高，产品颜色加深，粘度增大，焦油增多。国内专利cn200910242086.8、cn201711437817.5和cn202211322666.x均公开了制备3-甲氧基-4-羟基扁桃酸的方法，但是本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种合成4-羟基-3-甲氧基扁桃酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌包含编码酪氨酸解氨酶、L-氨基酸氧化酶、4-羟基扁桃酸合成酶的基因；

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌的宿主为大肠杆菌。

3.一种全细胞催化剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组菌。

4.一种核酸分子，编码具有将阿魏酸转化为4-羟基-3-甲氧基扁桃酸功能的蛋白，其特征在于，所述核酸分子包括编码酪氨酸解氨酶、L-氨基酸氧化酶、4-羟基扁桃酸合成酶的基因；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带权利要求4所述的核酸分子。

6.含...

【技术特征摘要】

1.一种合成4-羟基-3-甲氧基扁桃酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌包含编码酪氨酸解氨酶、l-氨基酸氧化酶、4-羟基扁桃酸合成酶的基因；

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌的宿主为大肠杆菌。

3.一种全细胞催化剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组菌。

4.一种核酸分子，编码具有将阿魏酸转化为4-羟基-3-甲氧基扁桃酸功能的蛋白，其特征在于，所述核酸分子包括编码酪氨酸解氨酶、l-氨基酸氧化酶、4-羟基扁桃酸合成酶的基因；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带权利要求4所述的核酸分子。

6.含有权利要求4所述的核酸分子或权利要求5所述表达载体的微生物细胞。

7.权利要求1或2所...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦勇，杨波，张炜，
申请(专利权)人：杭州唯铂莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：